一种试剂卡、检测方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种试剂卡、检测方法及应用，所述面盖和所述底盖之间通过定位孔和定位柱卡接将试纸条固定；所述底盖内部设置卡槽结构、凸起平台；所述卡槽结构内设置有支撑凸起，所述支撑凸起的高度小于等于所述凸起平台的高度；所述面盖设置固定板、反应窗口、加样孔、检测液孔；所述面盖和所述底盖通过定位孔和定位柱卡接后，在所述面盖固定板和检测液孔的挤压下，所述试纸条中部向上凸起，与水平面形成“拱桥”结构。这一“拱桥”结构控制检测液液体在试纸条上的流向及层析速度，进而提高了试剂卡的检测结果准确度和精密度，达到精准检测微量样本的目的，填补了现有POCT微量样本检测产品的市场空白。

A reagent card, detection method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种试剂卡、检测方法及应用
本专利技术涉及一种试剂卡，具体说是一种微量样本体外精准简捷检测的试剂卡、检测方法及应用。
技术介绍
POCT，即时检验(point-of-caretesting)，指在病人旁边进行的临床检测及床边检测(bedsidetesting)，通常不一定是临床检验师来进行，而是在采样现场即刻进行分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。试剂卡是即时检验中常用的工具，用于检验血液、尿、粪便和其他体液中的生化物质，例如血清、血浆和尿中的胆红素和蛋白质、葡萄糖、血红素、酮体、亚硝酸盐、尿胆素原等生物标记物。试剂卡由卡壳(面盖及底盖)与卡壳内的试纸条组成，试纸条固定于底盖的卡槽内，将面盖与底盖结合后组装成试剂卡。目前的快速检测技术，对样本体积要求一般至少10uL。可是临床上有些样本仅可获得1uL甚至更少，例如泪液样本。现有的快速检测技术，对于样本量体积极为微量的情况下如2μL，如果对样本进行额外步骤的操作处理，例如稀释，这会不可避免地降低检测灵敏度、精密度和准确度，增加检测操作的复杂性、对工具的要求较高和产生差错的机率较大。现有的快速检测技术其灵敏度一般在0.05ng/mL(荧光免疫检测0.1ng/mL，量子点0.05ng/mL)，精密度一般在5％～15％。如果以待测物的总量检测下限计算：约为0.5pg，对于微量样本来说测试较为困难。对于眼类疾病来说，由于眼睛器官的敏感和脆弱，其对检测要求比较高；而在实际操作中，由于眼睛可采的样本泪液、房水、眼表润洗液均属微量样本，检测难度大；例如患者眼睛红肿、结膜充血，临床医生不借助检测技术很难判断病因，是感染还是过敏引起，准确快速诊断病因对指导用药具有十分重要作用；如果是过敏引起会使用抗过敏药，如果是感染，例如病毒感染或者阿米巴感染会使用抗病毒或相应的抗阿米巴感染治疗；如果因为误诊对感染的眼睛使用了抗过敏药甚至激素的话，有可能会导致患者病情更加严重，甚至造成严重的医疗事故。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种试剂卡，通过卡壳结构的特殊设计，控制检测液液体在试纸条上的的流向及层析速度，达到精准检测临床上微量样本的目的，用于解决现有技术中存在的问题。本专利技术提供了一种试剂卡，包括面盖、底盖、试纸条；所述面盖和所述底盖将试纸条固定；所述底盖内部设置卡槽结构、凸起平台；所述卡槽结构内设置有支撑凸起，所述支撑凸起的高度小于等于所述凸起平台的高度；所述面盖设置固定板、反应窗口、加样孔、检测液孔；所述反应窗口、加样孔、检测液孔依次设置；所述固定板分布在所述反应窗口两侧；所述试纸条装入所述底盖的卡槽结构固定后，所述试纸条被所述凸起平台和支撑凸起支撑，所述面盖和所述底盖通过定位孔和定位柱卡接后，在所述面盖固定板和检测液孔的挤压下，所述试纸条中部向上凸起。优选地，所述试纸条包括三层或四层结构，第一层为底板，第二层为反应膜，第三层为吸收垫、结合垫和缓冲垫；或者第一层为底板，第二层为反应膜和缓冲垫，第三层为吸收垫、和结合垫；或者第一层为底板，第二层为反应膜，第三层为吸收垫和结合垫，第四层为缓冲垫；所述反应膜设置在所述底板中部，所述反应膜上分布有检测线T和质控线C，所述检测线T和质控线C与所述反应窗口对应；所述反应膜的一端设置结合垫，所述反应膜的另外一端设置吸收垫，所述结合垫与所述加样孔对应；所述结合垫上或结合垫下设置缓冲垫或者所述结合垫与所述缓冲垫对接，所述缓冲垫与所述检测液孔对应。优选地，所述卡槽结构数量为两个，分布在所述凸起平台两侧。优选地，所述卡槽结构内设置1-5个支撑凸起。优选地，所述卡槽结构内设置3个支撑凸起优选地，与所述检测液孔对应的所述卡槽结构的两边对称设置有导流口。优选地，所述卡槽结构的深度为1.2-1.7mm，所述支撑凸起的高度为0.1-0.15mm，所述凸起平台高度为0.15-0.25mm。优选地，所述固定板的数量为4个，分别为用于固定所述试纸条的第一固定板、用于固定所述试纸条的第二固定板、用于固定所述试纸条上所述吸收垫和反应膜结合的第三固定板、用于固定所述试纸条上所述反应膜和结合垫结合的第四固定板；所述第四固定板设置在所述加样孔和所述反应窗口之间，所述第一固定板、第二固定板、第三固定板分布在所述反应窗口另一侧。优选地，第一固定板、第二固定板、第三固定板、第四固定板的宽度为3-5mm；第一固定板、第二固定板的高度为1.0-1.5mm，第三固定板、第四固定板的高度为0.1-0.3mm。优选地，所述加样孔为漏斗状结构，面盖正面圆直径4-6mm，面盖内部圆直径为3-5mm，凸起高度为0.1-0.2mm，孔壁与水平面呈30°-45°夹角。优选地，所述检测液孔为漏斗状结构，面盖正面圆直径6-8mm，面盖内部圆直径为1-3mm，凸起高度为0.3～0.5mm，孔壁与水平面呈30°-45°夹角。优选地，所述反应窗口为椭圆形环结构，面盖正面椭圆长150-200mm，宽度为70-90mm，面盖内部圆直径为130-150mm，凸起高度为0.1-0.2mm，孔壁与水平面呈30°-45°夹角，反应窗内底部与试纸条接触面为0.01-0.02mm的垂直凸起。优选地，所述面盖包括手持端，所述手持端的表面为螺纹状或凸点状凸起结构。优选地，所述面盖和所述底盖之间通过定位孔和定位柱卡接。所述反应膜上分布的检测线T为一条、两条或多条。此外，本申请还提供了一种使用上述任一试剂卡实现的检测方法，步骤(1)加样孔内加样样本采集后，将样本加入所述加样孔内的结合垫上，结合垫上有纳米微球偶联的抗体，即抗体纳米微球，样本中的待测物与结合垫上的抗体纳米微球免疫结合形成抗体纳米微球复合物；步骤(2)检测液孔内加入检测液在检测液孔中加入检测液后，检测液开始沿着试纸条的吸水垫端的方向开始层析，检测液层析经过加样孔位置溶解结合垫上未与待测物结合的抗体纳米微球及已与待测物结合的抗体纳米微球复合物，检测液在试纸条上的层析经历了“爬坡、平行、下坡”，检测液在试纸条上移动，在“平行”阶段进行第二次免疫识别反应，步骤(1)中抗体纳米微球复合物在检测线T处进行第二次免疫识别反应，并且开始显色；而不与检测线T反应的抗体纳米微球则继续向前运动，与质控线C结合显色。优选地，加样孔内加样为0.1-50ul；检测液孔内加入检测液0-150ul。优选地，所述试剂卡反应完成后通过仪器检测或者色卡对比T、C线的信号值或色深来计算样本中待测物的浓度。优选地，上述检测方法用于对泪液、伤口渗出液、组织液、汗液、房水、眼表润洗液等微量样本的检测，也可用于对于常规样本血液(末梢血、血清、血浆)、唾液、尿液等常规样本的检测；也可用于对于其它非临床样本的检测，例如宠物、畜牧业、农业、鱼类、食品、环保检测等。由于所述支撑凸起的高度小于等于所述凸起平台的高度，试纸条装入卡槽固定后，试纸条在两端卡槽内的支撑凸起的支撑下形成“桥”的结构；在面盖和底盖通过定位孔和定位柱卡接过程中，面盖上固定板、加样孔、检测液孔与凸起平台配合向下挤压，中间部位反应膜向上凸起，与水平面形成“拱桥”结构。这一“拱桥”结构控制检测液液体在试纸条上的的流向及层析速度，进而提高了试剂卡的检测结果准确度和精密度，达到精准检测临床上微量样本的目的，填补了现有PO本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种试剂卡，包括面盖、底盖、试纸条；所述面盖和所述底盖将试纸条固定；其特征在于：所述底盖内部设置卡槽结构、凸起平台；所述卡槽结构内设置有支撑凸起，所述支撑凸起的高度小于等于所述凸起平台的高度；所述面盖设置固定板、反应窗口、加样孔、检测液孔；所述反应窗口、加样孔、检测液孔依次设置；所述固定板分布在所述反应窗口两侧；所述试纸条装入所述底盖的卡槽结构固定后，所述试纸条被所述凸起平台和支撑凸起支撑，所述面盖和所述底盖通过定位孔和定位柱卡接后，在所述面盖固定板和检测液孔的挤压下，所述试纸条中部向上凸起。

【技术特征摘要】
1.一种试剂卡，包括面盖、底盖、试纸条；所述面盖和所述底盖将试纸条固定；其特征在于：所述底盖内部设置卡槽结构、凸起平台；所述卡槽结构内设置有支撑凸起，所述支撑凸起的高度小于等于所述凸起平台的高度；所述面盖设置固定板、反应窗口、加样孔、检测液孔；所述反应窗口、加样孔、检测液孔依次设置；所述固定板分布在所述反应窗口两侧；所述试纸条装入所述底盖的卡槽结构固定后，所述试纸条被所述凸起平台和支撑凸起支撑，所述面盖和所述底盖通过定位孔和定位柱卡接后，在所述面盖固定板和检测液孔的挤压下，所述试纸条中部向上凸起。2.根据权利要求1所述的一种试剂卡，其特征在于，所述试纸条包括三层或四层结构，第一层为底板，第二层为反应膜，第三层为吸收垫、结合垫和缓冲垫；或者第一层为底板，第二层为反应膜和缓冲垫，第三层为吸收垫、和结合垫；或者第一层为底板，第二层为反应膜，第三层为吸收垫和结合垫，第四层为缓冲垫；所述反应膜设置在所述底板中部，所述反应膜上分布有检测线T和质控线C，所述检测线T和质控线C与所述反应窗口对应；所述反应膜的一端设置结合垫，所述反应膜的另外一端设置吸收垫，所述结合垫与所述加样孔对应；所述结合垫上或结合垫下设置缓冲垫或者所述结合垫与所述缓冲垫对接，所述缓冲垫与所述检测液孔对应。3.根据权利要求2所述的一种试剂卡，其特征在于，所述卡槽结构数量为两个，分布在所述凸起平台两侧。4.根据权利要求3所述的一种试剂卡，其特征在于，所述卡槽结构内设置1-5个支撑凸起。5.根据权利要求4所述的一种试剂卡，其特征在于，所述卡槽结构内设置3个支撑凸起。6.根据权利要求5所述的一种试剂卡，其特征在于，与所述检测液孔对应的所述卡槽结构的两边对称设置有导流口。7.根据权利要求6所述的一种试剂卡，其特征在于，所述卡槽结构的深度为1.2-1.7mm，所述支撑凸起的高度为0.1-0.15mm，所述凸起平台高度为0.15-0.25mm。8.根据权利要求7所述的一种试剂卡，其特征在于，所述固定板的数量为4个，分别为用于固定所述试纸条的第一固定板、用于固定所述试纸条的第二固定板、用于固定所述试纸条上所述吸收垫和反应膜结合的第三固定板、用于固定所述试纸条上所述反应膜和结合垫结合的第四固定板；所述第四固定板设置在所述加样孔和所述反应窗口之间，所述第一固定板、第二固定板、第三固定板分布在所述反应窗口另一侧。9.根据权利要求8所述的一种试剂卡，其特征在于，第一固定板、第二固定板、第三固定板、第四固定板的宽度为3-5mm；第一固定板、第二固定板的高度为1.0-1.5mm...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄静峰，李之华，
申请(专利权)人：广东盛泽康华生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44