一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法技术

本发明专利技术涉及一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，具体步骤为：以水为初始溶剂，提取三次，合并提取液，除去不溶物，上清液得到黄芩提取液，加热后，调节pH至1‑3，沉降，分出上浊液，沉淀物过滤，滤液并入上浊液，过滤固体物为黄芩苷粗品；将得到的上浊液调节pH至5‑7，加热后，加入絮凝剂，调节pH至5‑7，除去不溶物；滤液通过大孔树脂吸附，得到过柱液A和大孔负载树脂B，洗涤大孔负载树脂B，得到黄芩总黄酮；过柱液A通过离子交换树脂柱，浓缩液除去沉降物，清液中加入乙醇，过滤，干燥得到黄芩多糖。一次性得到的粗品黄芩苷纯度在83％以上，粗品黄酮在80％以上，黄芩多糖产率达到10％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法
本专利技术属于中药成分综合提取分离
，具体涉及一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。中药黄芩为唇形科植物黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的根，为中药常用药材，性味苦寒，具有清热燥湿，解毒败火之功效。其有效成分主要包括黄酮类化合物和黄芩多糖，其中黄酮类化合物如：黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、鼠尾草素、千层纸素、7-甲氧基黄芩素,7-甲氧基去甲基汉黄芩素,黄芩黄酮Ⅰ,黄芩黄酮Ⅱ等(温华珍,肖盛元,王义明等黄芩化学成分及炮制学研究,《天然产物研究与开发》2004,16(6)：575),具有抗氧化、抗炎、抗变态、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛药理作用；黄芩多糖具有抗氧化和增强免疫力的功能，其对超氧阴离子的清除能力明显高于VC，当质量浓度达到1.4mg/mL时，黄芩多糖的清除率能达89.55％，[金迪，梁英，郑文凤等.黄芩多糖体外抗氧化活性研究[J].中兽医医药杂志，2012，31(3)：33-37.]，和植物活性多糖一样，黄芩多糖保健品和添加剂将成为新型保健食品和饲料添加剂中的重要一员，黄芩多糖的开发利用具有广阔的前景。黄芩有效成分提取分离的报道有很多，主要集中于某一成分的提取。如：CN201110065938.8，一种从黄芩中提取黄芩苷的方法(四川济生堂药业有限公司任治军)；“超声法提取黄芩多糖的工艺考察”(哈尔学滨商业大药学院，杨波等)；CN201710203101.2，一种黄芩苷的提取方法，(温典明等)；CN201710137476.3，从黄芩根中提取黄芩多糖的分离纯化方法(崔新爱等)。天津士兰科技有限公司公开了一种从黄芩中同时分离汉黄芩素与黄芩素单体的方法(CN103555784A，201310508967.6)，提供了一种从黄芩中同时分离汉黄芩素与黄芩素单体的方法，通过将黄芩药材粉碎，加入适量水以及食用酶进行酶解，将酶解后的药材进行超临界萃取，使用夹带剂分段收集，进行重结晶后可分别得到黄芩素与汉黄芩素；山东省中医药研究院公开了一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法(CN201510086688.4)，是将黄芩水提，再经大孔树脂吸附、沉淀、凝胶柱分离得到黄芩苷、黄芩素、和汉黄芩素。韩桂茹等公开了黄芩中黄芩苷及黄芩总苷元同时提取分离工艺(CN200910075407.X)，用水和无机酸类，先分离脂溶性黄芩总苷元，再酸沉淀、分离水中溶解的黄芩苷的综合提取分离工艺。以上专利尽管考虑到了黄芩有效成分的多样性，但是主要还是关注于黄芩中主要黄酮如黄芩苷以及黄芩素的提取，没有把黄芩有效成分的提取加以综合设计。专利技术人发现，在以黄芩切片为原料工业生产黄芩苷的过程中，主要是采用水提酸沉以及两酸一碱提取黄芩苷的生产工艺，提取黄芩苷后的溶液还含有大量有效成分，常常未加利用直接排放到污水系统。有效成分未加合理利用，是一种资源的浪费，另一方面，大量有机物进入废水系统，徒增污水处理的压力。
技术实现思路
针对上述现有技术中存在的问题，本专利技术的一个目的是提供一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法。黄芩中的主要有效成分—黄芩苷、总黄酮、黄芩多糖被充分提取，原来的黄芩提取废液被充分利用，极大地减少了废液中的有机物，即增加黄芩提取物的附加值，又减少了废液处理负担；该工艺设备简单、流程短，在原生产工艺的基础上适当延伸即可副产两种新产品。本专利技术将原来的酸沉废液加以利用，即减少废液排放、降低了污染，又增加了资源的利用率。为了解决以上技术问题，本专利技术的技术方案为：一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，具体步骤为：1)黄芩切片，加入5倍沸水，提取三次，合并提取液，沉降除去不溶物，分出上清液得到黄芩提取液，加热后，调节pH至1-3，沉降，分出上浊液，沉淀物过滤，滤液并入上浊液，过滤后的固体沉淀物即为黄芩苷粗品；2)将步骤1)得到的上浊液调节pH至5-7，加热后，加入絮凝剂，调节pH至5-7，沉降过滤除去不溶物；3)将步骤2)得到的滤液通过大孔树脂吸附，得到过柱液A和大孔负载树脂B，洗涤大孔负载树脂B，收集得到黄酮洗脱液，干燥得到黄芩总黄酮；4)将步骤3)得到的过柱液A通过离子交换树脂柱，浓缩液离心除去沉降物，清液中加入乙醇，沉降后，将沉淀物过滤，干燥得到黄芩多糖。本专利技术先是将通常两次8倍水量提取工艺改为三次5倍水提，在减少用水量的同时，提取率明显提高。其次将酸沉后的废液收集，通过调节pH将上浊液中的黄酮类化合物复溶，再通过絮凝除去胶质、蛋白和鞣酸类杂质，通过大孔树脂吸附总黄酮，流出的水溶液通过脱盐、浓缩、醇沉得到粗多糖。大孔树脂吸附物通过乙醇解析，再通过干燥得到总黄酮。该工艺能将黄芩中的有效成分分步分离。整体上提高黄芩苷、黄芩总黄酮、黄芩多糖的产量。一次性得到的粗品黄芩苷纯度在83％以上，粗品黄酮在80％以上，黄芩多糖产率达到10％以上。本专利技术依据的原理：在以水作为溶剂提取黄芩苷的过程中，黄芩苷以天然产物镁盐的状态溶于热水，此时水溶液pH4～5，同时其他黄酮(如汉黄芩苷、野黄芩苷、千层纸素苷、黄芩素、白杨素等)、和多糖成分也一起被浸出到水溶液中。在提取液酸化时(pH＝1～2)，通过控制温度，黄芩苷以一种致密晶型沉于罐底，其他黄酮成分部分溶于水，部分以无定型物悬浮于溶液中。在此过程中，仍有部分的黄芩苷悬浮于水相，也有部分黄芩苷分解成黄芩素。通过倾出上浊液、调至适当pH值(PH＝5.5～6)，这类黄酮成分复溶于水中。然后加入适当的絮凝剂，通过控制pH值，可以有效地除去胶质、蛋白等杂质。通过大孔树脂吸附分离出黄芩黄酮，过柱液通过脱盐处理，再通过浓缩醇沉获得粗多糖。在一些实施例中，步骤1)中加水后在80～100℃下进行提取，黄芩提取液加热的温度为70～100℃；优选的，黄芩提取液加热的温度为80-90℃。在一些实施例中，黄芩提取液酸化后沉降的时间为10-60min；优选为20-40min。在一些实施例中，步骤2)中的絮凝剂为氯化钙、氯化镁、硫酸镁其中的一种或多种。在一些实施例中，上浊液加入絮凝剂之前，加热后的温度为80～90℃。在一些实施例中，步骤2)中的絮凝剂用量为溶液总质量的0.01％～0.8％；优选为0.1％～0.4％，溶液的质量浓度为10～20％。在一些实施例中，加入絮凝剂后调节pH至5.5～6.5。在一些实施例中，大孔树脂为AB-8或D101。在一些实施例中，步骤3)中黄酮洗脱液通过减压浓缩后稠膏比重1.05～1.18，然后经过真空或喷雾干燥后得到黄芩总黄酮。在一些实施例中，步骤4)中通过大孔树脂吸附后的出液电导率≤120μs/cm，所得过柱液减压浓缩至稠膏比重为1.05-1.18。在一些实施例中，步骤4)中加入的乙醇后的混合液中，乙醇的体积浓度为70～80％(V/V)。黄芩用水提取代替乙醇提取，成本降低、安全性增加，同时，也增大了多糖等有效成分的溶解量。步骤1)中缩短了沉降时间，有效降低了酸性条件下黄芩苷的水解，黄芩苷纯度提高。步骤2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，其特征在于：具体步骤为：1)黄芩切片，加入5倍沸水，提取三次，合并提取液，沉降除去不溶物，分出上清液得到黄芩提取液，加热后，调节pH至1‑3，沉降，分出上浊液，沉淀物过滤，滤液并入上浊液，过滤后的固体沉淀物即为黄芩苷粗品；2)将步骤1)得到的上浊液调节pH至5‑7，加热后，加入絮凝剂，调节pH至5‑7，沉降过滤除去不溶物；3)将步骤2)得到的滤液通过大孔树脂吸附，得到过柱液A和大孔负载树脂B，洗涤大孔负载树脂B，收集得到黄酮洗脱液，干燥得到黄芩总黄酮；4)将步骤3)得到的过柱液A通过离子交换树脂柱，浓缩液离心除去沉降物，清液中加入乙醇，沉降后，将沉淀物过滤，干燥得到黄芩多糖。

【技术特征摘要】
1.一种从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，其特征在于：具体步骤为：1)黄芩切片，加入5倍沸水，提取三次，合并提取液，沉降除去不溶物，分出上清液得到黄芩提取液，加热后，调节pH至1-3，沉降，分出上浊液，沉淀物过滤，滤液并入上浊液，过滤后的固体沉淀物即为黄芩苷粗品；2)将步骤1)得到的上浊液调节pH至5-7，加热后，加入絮凝剂，调节pH至5-7，沉降过滤除去不溶物；3)将步骤2)得到的滤液通过大孔树脂吸附，得到过柱液A和大孔负载树脂B，洗涤大孔负载树脂B，收集得到黄酮洗脱液，干燥得到黄芩总黄酮；4)将步骤3)得到的过柱液A通过离子交换树脂柱，浓缩液离心除去沉降物，清液中加入乙醇，沉降后，将沉淀物过滤，干燥得到黄芩多糖。2.根据权利要求1所述的从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，其特征在于：步骤1)中加水后在80～100℃下进行提取，黄芩提取液加热的温度为70～100℃；优选的，黄芩提取液加热的温度为80-90℃。3.根据权利要求1所述的从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，其特征在于：黄芩提取液酸化后沉降的时间为10-60min；优选的，沉降的时间为20-40min。4.根据权利要求3所述的从黄芩提取液分离制备黄芩苷、总黄酮和黄芩多糖的方法，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：高乾善，王晓，吕瑞敏，程燕，张广启，赵恒强，
申请(专利权)人：山东省分析测试中心，山东天华制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37