一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽制造技术

本发明专利技术公开了一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，涉及医药相关领域，为解决现有技术中的多数改善子痫前期胎盘功能障碍的药物对母胎具有一定毒副作用的问题。所述的多肽序列为Ac‑RFAACAA‑COOH，所述的多肽在改善子痫前期胎盘功能障碍的药物或药剂中的应用，所述的多肽在降低子痫前期孕鼠尿蛋白/肌酐水平上的应用，所述的多肽在提高子痫前期孕鼠胎盘利用率上的应用，所述的多肽在反转TNFα对滋养细胞迁移和侵袭抑制作用上的应用。

A Novel Polypeptide for Improving Placental Dysfunction in Preeclampsia

【技术实现步骤摘要】
一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽
本专利技术涉及医药相关领域，具体为一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽。
技术介绍
子痫前期(Pre-eclampsia，PE)是妊娠期特有的疾病，可引发孕妇多脏器功能损害、脑水肿、胎儿生长受限等，是导致孕妇和胎儿病死率最高的疾病之一。据统计每年约49000例孕产妇、50000例围产儿死于子痫前期及其并发症，占孕产妇各类死亡病因的14％；我国PE发病率更是高达为3.91-5.57％，严重危害产妇和胎儿健康。目前临床除拉贝洛尔、硝苯地平等极少数药物相对安全外，其余均对母胎存在毒副作用；在治疗措施极度缺乏的今天，终止妊娠仍然是最终手段，而新生儿因孕龄小给个人、家庭和社会带来极重负担。多肽(Peptidome)被称为天然存在的低分子量(LMW)肽和分子量小于10kDa的蛋白水解片段。与疾病微环境相关的LMW肽很容易脱落到细胞外间质中，并且容易穿过血管系统的内皮细胞屏障，最终进入循环。近年来，多肽在预防和治疗疾病的重要作用引起学者的关注：人β防御素2(β-defensin2)可选择性地作用于钙激活钾离子(BK)通道，降低血管的舒张压、收缩压和血流速度，有望成为新型高血压治疗药物；胰高血糖素肽(GLP-1)则可通过调控NF-κB信号通路，改善血管内皮细胞损伤，治疗糖尿病动脉粥样硬化。多数改善子痫前期胎盘功能障碍的药物对母胎具有一定的毒副作用，在出现子痫前期胎盘功能障碍时，终止妊娠仍然是最终手段；因此市场急需研制一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽来帮助人们解决现有的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，以解决上述
技术介绍
中提出的多数改善子痫前期胎盘功能障碍的药物对母胎具有一定的毒副作用的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，所述的多肽序列为Ac-RFAACAA-COOH。优选的，所述的多肽在改善子痫前期胎盘功能障碍上的应用。优选的，所述的多肽在降低子痫前期孕鼠尿蛋白/肌酐水平上的应用。优选的，所述的多肽在提高子痫前期孕鼠胎盘利用率上的应用。优选的，所述的多肽在反转TNFα对滋养细胞迁移和侵袭抑制作用上的应用。优选的，所述的多肽通过多肽组学方法筛选获得。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、该专利技术中，Cys-peptide多肽序列为Ac-RFAACAA-COOH，纯度大于95％，能显著改善子痫前期孕鼠的蛋白尿症状，提高患病孕鼠的胎盘利用率(胎儿体重/胎盘体重)，降低其血液中sFlt-1和TNFα含量，通过对孕鼠观察实验，其药物功能能达到目标要求；2、该专利技术中，Cys-peptide多肽能有效改善TNFα诱导的滋养细胞迁移、侵袭的下降，Cys-peptide多肽对大鼠的生殖能力，胚胎/胎儿致死率、畸形率没有不良影响，即表明其没有明显的毒副作用，具有一定的安全性；3、该专利技术中，Cys-peptide多肽具有分子量低、稳定性好、亲脂性好、易于入胞与入核等作为多肽药物的良好分子基础。附图说明图1为本专利技术的Cys-peptide对大鼠蛋白尿的影响图；图2为本专利技术的Cys-peptide对胎盘利用率的影响图；图3为本专利技术的Cys-peptide对滋养细胞侵袭能力的影响图；图4为本专利技术的Cys-peptide对滋养细胞迁移能力的影响图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，多肽(Cys-peptide)序列为Ac-RFAACAA-COOH。Cys-peptide委托上海科肽生物科技有限公司通过固相法按照以下序列Ac-RFAACAA-COOH合成(纯度大于95％)，10mg/管。取1mg多肽，用无菌双蒸水稀释成10mmol/L-20℃储存备用。实施例1进一步，多肽在改善子痫前期胎盘功能障碍的药物或药剂中的应用，其中多肽及多肽组合物可制成任何药学上可接受的剂型。将大鼠饲养在在光照和湿度受控的环境中，随意进食并自由饮用自来水，在此条件下适应一周，可育雌性与雄性以1:1的比例饲养过夜，于早晨进行捡栓，如存在则证实已妊娠，此日为GD0。妊娠14天时，孕鼠被随机分配到三组。第一组(Saline)(n＝10)：在孕14天，每只大鼠通过尾静脉接受生理盐水(1mg/kg)；第二组(LPS)：在孕14天，通过尾静脉注射LPS(1μg/kg)；第三组(LPS+Cys-peptide)：在孕14天时，大鼠先经尾静脉用LPS(1μg/kg)处理，然后每天用Cys-peptide给药从在孕14天至在孕20天。妊娠12天和19天，收集大鼠24小时尿样，尿液样品在室温下以2000rpm离心15分钟，分别使用尿蛋白定量测试盒(C035-2，中国)和肌酸酐测定试剂盒(C011-2，China)进行尿蛋白质和尿肌酐水平检测，计算尿蛋白与肌酐比值。妊娠20天时，对大鼠实施安乐死，对胎鼠和胎盘进行称重并记录，计算胎盘利用率等指标。如图1和2所示，为了评估LPS给药是否诱导了子痫前期表型，评估了大鼠的尿蛋白水平和胎盘利用率情况。在GD19，LPS处理组的尿蛋白/肌酐水平升高，比盐水组高2倍以上(图1)，与Saline组相比，LPS治疗组的胎儿体重降低约23％和胎盘有效率降低约25％(图2)，且用LPS处理的大鼠中观察到明显的FGR。因此，建立了LPS诱导的先兆子痫样大鼠模型。通过从GD14至GD20每日接受Cys-peptide，与LPS组相比，LPS+Cys-peptide组的尿蛋白/肌酐比值显著降低，因此Cys-peptide可以改善LPS诱导的蛋白尿。此外，与LPS组相比，在(LPS+Cys-peptide)组中，胎儿重量和胎盘有效率可以恢复到更高水平，分别提高16％和18％。所以Cys-peptide能显著改善子痫前期孕鼠的蛋白尿症状，提高患病孕鼠的胎盘利用率(胎儿体重/胎盘体重)，降低其血液中sFlt-1和TNFα含量。同时这种肽对大鼠的生殖能力，胚胎/胎儿致死率、畸形率没有不良影响。鉴于Cys-peptide具有分子量低、稳定性好、亲脂性好、易于入胞与入核等作为多肽药物的良好分子基础，因此Cys-peptide有望为子痫前期临床治疗提供新的药物手段。实施例2进一步，多肽在降低子痫前期孕鼠尿蛋白/肌酐水平上的应用。Sprague-Dawley(SD)大鼠(10-12周，280-350g)购自南京医科大学实验动物中心。将大鼠饲养在在光照和湿度受控的环境中，随意进食并自由饮用自来水。适应一周后，可育雌性与雄性以1:1的比例饲养过夜，于早晨进行捡栓，如存在则证实已妊娠，此日为GD0。(标准实验室条件下(温度23-26℃，相对湿度50-60％，照射在06:00am和06:00pm之间)，自由获取颗粒食物和水)妊娠14天时，孕鼠被随机分配到三组：1组(Saline)(n＝10)：在孕14天，每只大鼠通过尾静脉接受生理盐水(1mg/kg)；2组(PE)大鼠在孕14天通过尾静脉注射LPS(1μg/kg)(SigmaAldrich,USA)；3组(LPS+Cys-peptide本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，其特征在于：所述的多肽序列为Ac‑RFAACAA‑COOH。

【技术特征摘要】
1.一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，其特征在于：所述的多肽序列为Ac-RFAACAA-COOH。2.根据权利要求1所述的一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，其特征在于：所述的多肽在改善子痫前期胎盘功能障碍的药物或药剂中的应用。3.根据权利要求1所述的一种改善子痫前期胎盘功能障碍的新型多肽，其特征在于：所述的多肽在降低子痫前期孕鼠尿蛋白/肌酐水平上的应用。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁虹娟，贾瑞喆，崔县伟，沈嵘，凌钟慧，季小红，薛路，
申请(专利权)人：南京市妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：江苏,32