一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法技术

本发明专利技术属于微生物工程技术领域，尤其涉及一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法，包括以下步骤：以大豆或豆粕为原料制备大豆浆液；大豆浆液经蛋白酶适度酶解使大豆蛋白的水解度控制在10～35％；将大豆蛋白酶解物中固形物质量百分浓度调整为1～6％，添加葡萄糖或蔗糖，谷氨酸钠，用作培养枯草芽孢杆菌的培养基；将枯草芽孢杆菌种子液按1～8％的接种量接种于大豆蛋白酶解物培养基，摇床培养或发酵罐通气培养36～54h后终止发酵，收获γ‑聚谷氨酸。本发明专利技术提供的利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法能显著提高γ‑聚谷氨酸产量，且原料价廉易得，能有效降低成本，因而具有良好的应用前景。

A Method for Production of Gamma-Polyglutamic Acid by Fermentation of Soybean Protease Hydrolysate

【技术实现步骤摘要】
一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法
本专利技术属于微生物工程
，尤其涉及一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法。
技术介绍
γ-聚谷氨酸(简称γ-PGA)，一种由微生物合成的高分子氨基酸聚合物，分子质量一般都在5万到200万道尔顿之间。γ-聚谷氨酸作为一种新型天然高分子材料，配合其无毒无害的特性，被广泛应用于化妆品、环境保护、食品、医药、农业、沙漠治理等多个领域。γ-聚谷氨酸的工业生产方法一般采用微生物发酵合成法。在过去的几十年中，产业界和学术界对γ-聚谷氨酸的生产工艺进行了大量探索，虽然取得了重大进展，但γ-聚谷氨酸产品的价格依然昂贵，这在很大程度上限制了γ-聚谷氨酸的广泛应用。究其原因，是γ-聚谷氨酸生产效率低、生产成本高所致。因此，改进发酵工艺是提高γ-聚谷氨酸生产水平的重要途径。对于发酵工艺而言，优化培养基是获得高产的必要环节。优良的菌种必须与其相适应的培养基及培养条件结合，才能充分发挥其生产潜力。如中国专利申请第02151746号公开了枯草芽孢杆菌NX-2及利用其来制备γ-聚谷氨酸的方法；中国专利申请第200410010509号公开了枯草芽孢杆本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ‑聚谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：清洗大豆或豆粕，加入8～15倍质量的去离子水，在20～30℃浸泡4～10h，用豆浆机打浆过滤去渣，得大豆浆液；步骤二：调节步骤一得到的大豆浆液至pH值为8～11，加入碱性蛋白酶20～200万u/L，40～65℃保温酶解1～8h，控制蛋白质水解度为10～35％，然后加热灭酶活，冷却，5000r/min离心分离20min，取上清液，得大豆蛋白酶解物；步骤三：调节步骤二得到的大豆蛋白酶解物浓度，加入碳源及聚谷氨酸合成前体物质，调节pH6～8，于110～121℃灭菌20～30min后冷却至室温备用，得大豆蛋白酶解物...

【技术特征摘要】
1.一种利用大豆蛋白酶解物发酵生产γ-聚谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：清洗大豆或豆粕，加入8～15倍质量的去离子水，在20～30℃浸泡4～10h，用豆浆机打浆过滤去渣，得大豆浆液；步骤二：调节步骤一得到的大豆浆液至pH值为8～11，加入碱性蛋白酶20～200万u/L，40～65℃保温酶解1～8h，控制蛋白质水解度为10～35％，然后加热灭酶活，冷却，5000r/min离心分离20min，取上清液，得大豆蛋白酶解物；步骤三：调节步骤二得到的大豆蛋白酶解物浓度，加入碳源及聚谷氨酸合成前体物质，调节pH6～8，于110～121℃灭菌20～30min后冷却至室温备用，得大豆蛋白酶解物培养基；步骤四：取枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)接种到种子液培养基，37℃摇床培养或通气培养16～24h，得枯草芽孢杆菌种子液；步骤五：将步骤四得到的枯草芽孢杆菌种子液按1～8％的接种量接种于步骤三得到的大豆蛋白酶解物培养基，33～39℃恒温摇床培养或通气培养36～54h后，终止发酵，得发酵液；步骤六：将步骤五得到的发酵液离心分离、去菌体，测定发酵液中γ-聚谷氨酸含量。...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹水洋，张乐，叶植湘，陈旭，张书艳，苏沛，
申请(专利权)人：东莞理工学院，中储粮油脂工业东莞有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44