酮还原酶突变体及其在制备度洛西汀手性醇中间体及其类似物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种酮还原酶突变体及其应用；编码此突变体的核苷酸序列、包含此核苷酸序列的重组载体及重组菌株。还提供了所述的酮还原酶突变体作为催化剂在制备S‑构型度洛西汀手性醇中间体及其类似物的应用。本发明专利技术的酮还原酶突变体，可作为催化剂，与辅酶再生体系共同用于制备S‑构型的度洛西汀手性醇中间体及其类似物，反应转化率可达90%、95%或99%以上，产物的手性纯度值可达90%、95%或99%以上。反应条件温和，几乎无副产物，辅酶循环体系稳定，具有较大的工业化应用前景。

Ketone reductase mutant and its application in preparation of chiral alcohol intermediates and analogues of duloxetine

【技术实现步骤摘要】
酮还原酶突变体及其在制备度洛西汀手性醇中间体及其类似物中的应用
本专利技术涉及一种酮还原酶突变体及其在制备度洛西汀手性醇中间体及其类似物中的应用，属于生物酶工程和微生物应用领域。
技术介绍
盐酸度洛西汀【Duloxetinehydrochloride，(S)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩基)-1-丙胺盐酸盐】是由美国礼来公司研发的新型抗抑郁药，能有效地抑制5-羟色氨和去甲肾上腺素的再摄取，高效、安全、副作用小，对其他症状如全身疼痛和胃肠道紊乱也有疗效，该药还被批准用于糖尿病引起的神经疼痛以及女性尿失禁的治疗。2012年全球20个最畅销的处方药榜单中度洛西汀以49.94亿美元的年销售额排名第9。研究发现(S)-构型的盐酸度洛西汀药效是(R)型两倍，并且相对于(R)-盐酸度洛西汀来说，(S)型对映体是更强的5-羟色胺再摄取抑制剂，因而(S)-构型手性醇中间体的制备是盐酸度洛西汀合成的关键步骤。目前S-手性醇中间体的合成主要有化学合成和酶法合成两种途径。化学合成采用化学拆分和化学不对称合成来制备手性中间体，这两种方法均存在诸多问题，如化学拆分需要使用大量的拆分剂，反应步骤长本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酮还原酶突变体，其特征在于，所述的酮还原酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
1.酮还原酶突变体，其特征在于，所述的酮还原酶突变体的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。2.编码如权利要求1所述的酮还原酶突变体的基因，其特征在于，所述的基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。3.包含如权利要求2所述基因的重组载体。4.包含如权利要求2所述基因的重组菌株。5.如权利要求1所述的酮还原酶突变体作为催化剂在制备度洛西汀手性醇中间体及其类似物中的应用，其特征在于，所述的制备方法如下：在辅酶再生体系的存在下，酮还原酶突变体催化剂催化度洛西汀手性酮基中间体及其类似物与度洛西汀手性醇基中间体及其类似物之间发生立体特异性平衡反应，反应式如下：6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，其特征在于，所述的制备度洛西汀手性醇中间体及其他类似物的方法，包括下列方法的任意一种：(a...

【专利技术属性】
技术研发人员：林涛，徐明文，蒋丽丽，于丽珺，
申请(专利权)人：南京趣酶生物科技有限公司，上海仁酶生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32