一种SLFN11截断肽及其应用和药物组合物制造技术

本发明专利技术公开了一种SLFN11截断肽及其应用，和药物组合物，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。该截断肽通过对SLFN11亲水区第707‑734位肽段，利用Tat穿透肽进行修饰获得。本发明专利技术SLFN11截断肽能够穿过细胞膜进入细胞内部，提高肿瘤细胞的SLFN11的水平，增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性，从而能够作为化疗增敏剂用于肿瘤的治疗。

A SLFN11 truncated peptide and its application and pharmaceutical composition

【技术实现步骤摘要】
一种SLFN11截断肽及其应用和药物组合物
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种SLFN11截断肽，本专利技术还涉及上述SLFN11截断肽的应用和药物组合物。
技术介绍
癌症的发病率和死亡率仅次于心血管疾病，给社会和家庭带来了沉重的经济和精神负担。在全球范围内，每年大约有1410万新的癌症病例。随着全球老龄化的加速，癌症将成为人类一个主要的健康问题，一种严重威胁人类生命的世界疾病。化疗是是目前治疗癌症最有效的手段之一。然而，长期或大量使用化疗药物癌细胞可能产生耐药，化疗甚至可增强残癌细胞的侵袭和转移的能力。同时大剂量化疗给机体带来很大的副作用，因此增加化疗的敏感性同时降低化疗的剂量十分必要。睡眠基因蛋白(Schlafenfamily，SLFN)家族在发育，免疫反应和细胞增殖中起着关键作用。SLFN11蛋白定位在细胞核中，是仅在哺乳动物中表达的SLFN蛋白家族成员之一。SLFN11的表达水平与肿瘤细胞对DNA损伤剂的敏感性呈正相关。DNA发生损伤后，复制蛋白A1(replicationproteinA1，RPA1)和损伤DNA结合促进DNA重组修复。在SLFN11高表达的肿瘤细胞中，而SLFN11可与RPA1结合形成异二聚体，致使RPA1从DNA上解离，抑制损伤DNA重组修复，进而促进细胞凋亡和死亡。高水平SLFN11不仅会提升肿瘤细胞对I/II型拓扑异构酶抑制剂，DNA合成抑制剂和烷化剂的敏感程度，还会让细胞对IR和UV这两种损伤处理也呈现出更加敏感的表型。因此，外源SLFN11可以提高肿瘤细胞的SLFN11的水平，增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性，从而作为化疗增敏剂用于肿瘤的治疗。由于蛋白发挥作用一般表现在一些特定的功能关键区，将这些特定的功能区肽段切割出来形成功能截断肽，能表现出较其母蛋白更强的生物活性。这些截断肽具有以下特点：分子量小，表达量高，活性结构域能充分展现等特点，同时，由于某些氨基酸从原本的内部结构中暴露出来，而使截断肽段发挥出新的作用。然而，外源性的截断肽难以细胞膜进入细胞内部。研究证实一种来源于人类I型免疫缺陷病毒(HIV-I)的转录反式激活因子(trans-activatoroftranscription，TAT)的蛋白转导域(proteintransductiondomain，PTD)，能够将分子量在15-120kD的不同生物大分子(如核酸、多肤、蛋白质等)高效、快速、安全地导入细胞，且导入后仍具有生物活性，并对宿主细胞几乎没有毒性。TAT蛋白转导域的发现为蛋白质治疗带来了新的曙光，显示出巨大的应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种SLFN11截断肽，解决了现有外源SLFN11难以细胞膜进入细胞内部的问题。本专利技术的另一目的是提供上述SLFN11截断肽的应用。本专利技术的第三个目的是提供一种药物组合物。本专利技术所采用的技术方案是，一种SLFN11截断肽，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。本专利技术的特点还在于，SLFN11截断肽的通过对SLFN11亲水区肽段，利用Tat穿透肽进行修饰获得。SLFN11亲水区肽段为SLFN11的第707-734位序列。本专利技术所采用另一的技术方案是，一种SLFN11截断肽的应用，SLFN11截断肽在对细胞抗增殖活性药物中的应用。本专利技术的特点还在于，SLFN11截断肽在肿瘤放化疗药物中的应用。本专利技术所采用的第三个技术方案是，一种药物组合物，其中含有SLFN11截断肽及药学上可接受的载体。本专利技术的有益效果为：本专利技术一种SLFN11截断肽通过对SLFN11的氨基酸亲水区段第707-734位序列，利用Tat穿透肽进行修饰获得，使其能够穿过细胞膜进入细胞内部，提高肿瘤细胞的SLFN11的水平，增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性，从而能够作为化疗增敏剂用于肿瘤的治疗。附图说明图1为MTT法检测截断肽对CPT抗增殖活性的增敏作用；图2为RTCA法检测Tat-SLFN11t-4对CPT抗增殖活性的增敏作用。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对本专利技术进行详细说明。本专利技术一种SLFN11截断肽，其序列如SEQ.ID.NO.1所示，是选取SLFN11第707-734位氨基酸的亲水区段，设计合成的具有穿膜活性的多肽，该多肽可以与RPA1直接相互作用。一、多肽的设计研究表明，SLFN11通过其第580-901位氨基酸形成的肽段与RPA1发生作用。因此，选取580-901的亲水区段，设计合成具有穿膜活性的肽段，它可以与RPA1直接相互作用，起到抗肿瘤增敏的作用。利用在线分析软件ProtScale的KyteandDoolitte算法分析SLFN11蛋白的亲水性和疏水性，输入SLFN11的580-901序列，选取＜0.5的8个亲水区肽段，其序列如表1所示，为了促进截断肽在后期实验中穿透细胞膜，在选出的8个截断肽的N端加上Tat穿透肽(Trans-ActivatorofTranscription)进行修饰，分别得到的8个截断肽SLFN11t，其序列如表2所示。本专利技术所采用Tat穿透肽是人类I型免疫缺陷病毒(HIV-I)的转录反式激活因子(trans-activatoroftranscription，TAT)的蛋白转导域(proteintransductiondomain，PTD)，其序列为：YGRKKRRQRRR。表1亲水区肽段序列编码序列585-600FSRSLRKNRELFVHGL634-661QPLRNFISDRNICRAETRKTFLRENFEH669-694EAQNFRTEDGDWYGKAKSITRRAKGG707-734TSHLDCSGLPPLSDQYPREELTRIVRNA735-754DPIAKYLQKEMQVIRSNPSF764-783FPEAEWSQGVQGTLRIKKYL795-805TCRRFFDRGYS816-840AKEVEHYKYELLKAMRKKRVVQLSD表2Tat穿透肽修饰后的肽段序列编号序列(N→C)TAT-S11-1YGRKKRRQRRR-GG-FSRSLRKNRELFVHGLTAT-S11-2YGRKKRRQRRR-GG-QPLRNFISDRNICRAETRKTFLRENFEHTAT-S11-3YGRKKRRQRRR-GG-EAQNFRTEDGDWYGKAKSITRRAKGGTAT-S11-4YGRKKRRQRRR-GG-TSHLDCSGLPPLSDQYPREELTRIVRNATAT-S11-5YGRKKRRQRRR-GG-DPIAKYLQKEMQVIRSNPSFTAT-S11-6YGRKKRRQRRR-GG-FPEAEWSQGVQGTLRIKKYLTAT-S11-7YGRKKRRQRRR-GG-TCRRFFDRGYSTAT-S11-8YGRKKRRQRRR-GG-AKEVEHYKYELLKAMRKKRVVQLSD二、多肽的活性测定文献报道人乳腺癌细胞(MCF-7)为SLFN11低表达细胞株。因此，通过在MCF-7细胞中分别测试得到的8个截断肽SLFN11t对喜树碱(Camptothecin,CPT)抗增殖活性的增敏作用，采用MTT法检测各个截断肽的增敏作用，其结果如图1所示，图中模型组为加入5μMCPT，给药组为同时加入5μM本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种SLFN11截断肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种SLFN11截断肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。2.根据权利要求1所述的一种SLFN11截断肽，其特征在于，所述SLFN11截断肽的通过对SLFN11亲水区肽段，利用Tat穿透肽进行修饰获得。3.根据权利要求2所述的一种SLFN11截断肽，其特征在于，所述SLFN11亲水区肽段为SLFN11的第707-734位序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：苟兴春，劳可静，栾晶，张瑞三，郭慧芳，
申请(专利权)人：西安医学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61