用于细胞捕获的系统、装置和方法，以及其制造方法制造方法及图纸

本公开内容的实施方案涉及用于评价单个细胞分泌特性谱的系统、方法和设备。在一些实施方案中，所述设备可以被配置成用于分析由生物细胞所表达的物质，并且可以包含第一可压缩基底和被配置成用于与所述第一基底可移除式密封连接的第二基底。在一些实施方案中，在所述第二基底与所述第一基底相连接后，形成组装件，从而使得所述多个腔室的开放侧被所述第二基底覆盖，并且所述多个捕获区域中的每一个的一部分暴露在所述腔室中的每一个之中。

Systems, devices and methods for cell capture and their manufacturing methods

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于细胞捕获的系统、装置和方法，以及其制造方法相关申请的交叉引用本申请要求2016年11月22日提交的名称为“Systems,DevicesandMethodsforPositioning,Sealing,andIsolationofSingleCellsandWashingofCaptureSubstratesforAnalysis,andMethodsofManufactureThereof”的美国临时专利申请号62/425,502；2017年7月14日提交的名称相同的美国临时专利申请号62/532,852；和2017年10月6日提交的名称为“Apparatus,MethodsandSystemsforMicroarrayImagingofSamples”的美国临时专利申请号62/569,408的优先权。上述申请中的每一个的公开内容通过提及而以其整体合并入本文。本公开内容的领域本公开内容的实施方案涉及用于评价单个细胞分泌特性谱的系统、方法和设备，和更特别地涉及用于安置、密封和隔开单个细胞以及洗涤用于分析的捕获基底的系统、装置和方法，以及其制备方法。背景对于用于批量分析免疫应答的方法的依赖已成为开发有效的治疗性治疗的主要障碍，因为这些技术不能评价在细胞群体内在单个细胞水平上的至关重要的细胞相互作用，其支配药物应答和药物抗性。最近的使用单个细胞分析的调查研究已显示，免疫细胞和癌细胞展示出高度异质的细胞因子特性谱，甚至在具有相似表型的细胞中，这进一步证明了仅聚焦于在大容量群体水平上的细胞应答(基于细胞因子和细胞内信号传导蛋白质两者)的重大限制。在群体内的这些异质的细胞亚组可以支配在代表了关于疾病免疫疗法评价的重要的检查和平衡的细胞之间的复杂的信号传导相互影响。当细胞群体的应答可以由在罕见的细胞亚组中的细胞-细胞相互作用来决定时，这是特别值得注意的。因此，将会意识到，理解这些相互作用可能对于开发未来的更有效的治疗性治疗来说起着至关重要的作用。最近，已做出努力去开发经改善的单个细胞分析技术，以便更好地理解免疫应答。用于单个细胞分子特性谱分析的方法已揭示了动态的和双峰的基因表达。单个细胞多色流式细胞术和质谱细胞计量术也已经应用于定量表型多样性和差别药物应答。存在的限制在于这些装置不能以高度多重的方式直接测量蛋白质分泌或者在单个细胞水平上分析细胞-细胞相互作用。一些实施方案的概述本公开内容的一些实施方案呈献了被配置成用于以高度多重的方式评价单个细胞分泌特性谱的系统、方法和装置，以及用于构建和制造此类系统和装置的方法。还公开了用于正确地分析样品图像、用于在样品上产生均质的光源照明和用于减少或去除来自施加在样品上的光源的眩光的设备、方法和系统。在本公开内容的一些实施方案中，提供了被配置成用于分析由生物细胞所表达的物质的设备，并且所述设备包含第一可压缩基底，其包含在第一方向上延伸的长度，被所述长度分开的第一末端和第二末端，和在第二方向上延伸的宽度；多个具有开放侧并且被配置成用于接纳包含生物细胞的样品的微腔室，每个微腔室具有在所述第二方向上延伸的宽度，在所述第一方向上延伸的长度，和深度。所述设备进一步包含被配置成用于与所述第一基底可移除式密封连接的第二基底，所述第二基底包含在所述第二方向上延伸的、大致线性和/或平行的、隔开的捕获区域(CA)的阵列，每个CA具有预先确定的宽度，其中每个CA包含特异性的捕获抗体。在所述第二基底与所述第一基底相连接后，形成组装件，从而使得所述多个腔室的开放侧被所述第二基底覆盖，并且所述多个CA中的每一个的一部分暴露在所述腔室中的每一个之中。此类实施方案可以包括下列另外的特征、功能性和/或澄清中的一个和/或另一个(从而产生更进一步的实施方案)：-用于容纳所述组装件的挤压隔室(compartment)，其中所述挤压隔室可以包含被配置成用于挤压所述组装件的挤压用具；-将所述第一基底固紧、联结或连接至所述第二基底；-通过活化每个基底的相应的配对表面来在所述第二基底和所述第一基底之间建立所述联结，其中配对表面的活化可以包括等离子体处理；-所述隔室的底座配置有一个或多个允许容易地插入和移除所述设备的特征，其中所述一个或多个特征包括切口(cutout)；-所述挤压用具(参见上面)包括弹簧和/或夹具；-所述底座可以配置有至少一个柱杆(shaft)，所述至少一个柱杆被配置成用于将所述隔室的顶盖精确地引导至所述底座上。-被配置成用于由使用者进行手工操作的带肩螺钉；-所述挤压环可以包括一个或多个挤压弹簧，其中在完全接合所述带肩螺钉后，所述一个或多个挤压弹簧在所述第二基底和所述第一基底之间提供均一的和/或大小程度特定的挤压力，其中所述大小程度特定的挤压力被配置成是可重复的和/或不在所述第二基底上施放过度的应力；-一个或多个被配置成用于提供光通路的开口；-被配置成使得能够查看所述第二基底的一个或多个CA的在所述隔室的底座上的特征；和-所述第二基底包含玻璃基底。本公开内容的一些实施方案可以包括被配置成用于制造捕获基底的流动式芯片(flowchip)。所述流动式芯片可以包含：包含可压缩材料的基底；多个入口；多个出口；和多个流动通道，其中所述基底被配置成用于抵靠着捕获基底的可逆式密封接合。本公开内容的一些实施方案可以包括用于制造捕获基底的方法，其包括下列步骤：提供包含可压缩基底的流动式芯片，所述基底包含多个流动通道，每个流动通道包含相应的入口和出口；布置基底以覆盖和可移除地连接至至少所述可压缩基底的所述多个流动通道，所述基底经由负压而可移除地连接至所述可压缩基底；在邻近每个入口处提供样品；和向所述多个入口中的每一个施加负压，从而使得将所述样品分配在每个流动通道内，以至于每个样品沉积在相应于各自流动通道的所述基底的一部分上。在一些实施方案中，在预先确定的所施加压力的时间段之后，在每个部分上形成捕获区域(CA)。在一些实施方案中，施加负压包括向与包围所述多个出口的压力室相连接的单个管线施加真空，从而使得将所述样品牵拉、抽吸和/或分配通过所述通道。所述负压可以被配置成用于帮助将所述压力室固紧和/或密封至所述流动式芯片的至少一部分，其中所述固紧和/或密封可以至少部分地归因于所述可压缩基底的弹性体特性。在一些实施方案中，所施加压力被施加经过预先确定的时间段，其可以为大约1-4小时。本公开内容的一些实施方案可以包括用于制造捕获基底的方法。在一些实施方案中，所述方法包括下列步骤：提供流动式芯片基底，所述基底包含多个流动通道，每个流动通道包含相应的入口和出口；在邻近每个入口处提供样品；和布置基底以覆盖和可移除地连接至至少所述基底的所述多个流动通道。在一些实施方案中，所述基底的各自部分相应于并且暴露于每个流动通道，并且所述样品可以被分配在每个流动通道内并沉积在所述基底的各自部分上，而无需将所述基底热粘合至所述流动式芯片基底。本公开内容的一些实施方案可以包括产生具有多个微腔室的可压缩基底的方法。在一些实施方案中，所述方法包括下列步骤：抵靠着模具放置外壳(housing)，所述模具被配置成用于产生具有多个微腔室的可压缩基底；将弹性体倾倒入所述模具中；使所述模具固化；和使所述基底从所述模具中脱模，其中在所述模具内的支持特征允许所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.被配置成用于分析由生物细胞所表达的物质的设备，所述设备包含：第一可压缩基底，其包含：在第一方向上延伸的长度，被所述长度分开的第一末端和第二末端，和在第二方向上延伸的宽度；多个具有开放侧并且被配置成用于接纳包含生物细胞的样品的微腔室，每个微腔室具有在所述第二方向上延伸的宽度，在所述第一方向上延伸的长度，和深度；和被配置成用于与所述第一基底可移除式密封连接的第二基底，所述第二基底包含在所述第二方向上延伸的、大致线性和平行的、隔开的捕获区域(CA)的阵列，每个CA具有预先确定的宽度，其中每个CA包含特异性的捕获抗体；其中在所述第二基底与所述第一基底相连接后：形成组装件，从而使得所述多个腔室的开放侧被所述第二基底覆盖，并且所述多个CA中的每一个的一部分暴露在所述腔室中的每一个之中。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.11.22 US 62/425,502;2017.07.14 US 62/532,852;1.被配置成用于分析由生物细胞所表达的物质的设备，所述设备包含：第一可压缩基底，其包含：在第一方向上延伸的长度，被所述长度分开的第一末端和第二末端，和在第二方向上延伸的宽度；多个具有开放侧并且被配置成用于接纳包含生物细胞的样品的微腔室，每个微腔室具有在所述第二方向上延伸的宽度，在所述第一方向上延伸的长度，和深度；和被配置成用于与所述第一基底可移除式密封连接的第二基底，所述第二基底包含在所述第二方向上延伸的、大致线性和平行的、隔开的捕获区域(CA)的阵列，每个CA具有预先确定的宽度，其中每个CA包含特异性的捕获抗体；其中在所述第二基底与所述第一基底相连接后：形成组装件，从而使得所述多个腔室的开放侧被所述第二基底覆盖，并且所述多个CA中的每一个的一部分暴露在所述腔室中的每一个之中。2.权利要求1的设备，其进一步包含用于容纳所述组装件的挤压隔室。3.权利要求2的设备，其中所述挤压隔室包含被配置成用于挤压所述组装件的挤压用具。4.权利要求1的设备，其中将所述第一基底固紧、联结或连接至所述第二基底。5.权利要求4的设备，其中通过活化每个基底的相应的配对表面来在所述第二基底和所述第一基底之间建立所述联结。6.权利要求5的设备，其中配对表面的活化包括等离子体处理。7.权利要求2的设备，其中所述隔室的底座配置有一个或多个允许容易地插入和移除所述设备的特征。8.权利要求7的设备，其中所述一个或多个特征包括切口。9.权利要求2的设备，其中所述挤压用具包括弹簧。10.权利要求7的设备，其中所述底座配置有至少一个柱杆，...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·齐奥姆普利卡斯，J·塞奇威克，J·怀纳尔，S·麦凯，C·额，P·帕茨科夫斯基，S·麦卡斯克，I·尼科诺罗夫，A·凯泽，
申请(专利权)人：伊索普莱克西斯公司，
类型：发明
国别省市：美国,US