用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染的具有活真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythium oligandrum)的制剂、测定微生物寡雄腐霉的细胞活力的方法以及施用该制剂的方法技术

一种含有真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythium oligandrum)的制剂，其用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染，其得自含有0.1至99.9重量％的真菌寄生微生物寡雄腐霉和0.1至99.9％的辅助物质的干燥混合物，所述辅助物质含有至少一种选自吸附剂、缓冲剂、保湿剂、除臭剂和芳香剂的组分。该制剂在施用制剂部位每1ml水性悬浮液含有1至10×10

Preparations for the treatment of dermatomycosis and yeast infections on skin and mucosa with living fungi parasitic microorganism Pythium oligandrum, methods for determining cell viability of microbial oligosperma and methods for applying the preparation

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染的具有活真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythiumoligandrum)的制剂、测定微生物寡雄腐霉的细胞活力的方法以及施用该制剂的方法
本专利技术涉及一种具有真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythiumoligandrum)的制剂，其用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病(dermaphytoses)和酵母感染。该制剂以水性悬浮液的形式存在，所述水性悬浮液由含有0.1至99.9重量％的真菌寄生微生物寡雄腐霉和0.1至99.9％的辅助物质的干燥混合物制备，所述辅助物质含有至少一种选自吸附剂、缓冲剂、保湿剂、除臭剂和芳香剂的组分。此外，本专利技术涉及测定微生物寡雄腐霉的细胞活力的方法。本专利技术还涉及施用该制剂的方法。
技术介绍
皮肤真菌病是由皮肤真菌引起的真菌感染，所述皮肤真菌是特别攻击皮肤、指甲和毛发的喜角质真菌，并且所述喜角质真菌的特征在于长的潜伏期。由于这些喜角质真菌表面的有效掩蔽使其免于免疫分子识别，这主要由宿主免疫系统的最小反应促进。喜角质真菌通过有效的酶促降解和代谢消化的组分的优势，使用存在于人体整个表面的皮肤中的角蛋白作为其重要的营养物质。这些霉菌由毛癣菌属(Trichophyton)、表皮癣菌属(Epidermophyton)和小孢子菌属(Microsporum)物种代表，并且已经鉴定了使这些微生物以其生活方式生存的因子的分子性质(6)。皮肤和粘膜真菌病的特征在于不同的表现，通常包括刺激、发红、剥落片或甚至更大的皮肤区域，皮肤有时是白色的并且在更高敏感性的区域软化。常见的伴随症状包括出汗增加和社交麻烦的气味(臭气)症状，证明在受影响部位的晚期生态失调(dysbiosis)。皮肤真菌病(dermaphytosis)的同义词是癣(tinea)，其中，根据其解剖学定位，最常见的皮肤真菌病(dermatophytosis)形式是脚癣(脚上)、甲癣(指甲下)、体癣(身体上的真菌感染，主要在躯干的无毛部分和下肢的近端部分)、股癣(腹股沟区，最常见于夏季穿着紧身衣出汗后的年轻男性)、头癣(在浓密头发中短碎毛发的圆形病灶，大多数是在与嗜动物皮肤真菌如犬小孢子(Microsporumcanis)接触的儿童之间)。尽管皮肤真菌病通常不是致命疾病，但它们是非常普遍的感染，其影响了相当大百分比的人群，并且其症状使得工作和社交生活对于患有这些疾病的人来说是不愉快的。机会性微生物酵母感染在人类中是相对普遍的现代疾病，其中生活在人的皮肤和粘膜中的通常无害的共生酵母由于在压力、工作超负荷、病毒感染或其他压力情况期间免疫系统的弱化而被活化，并转变为侵略性形式，其特征在于不同形态和代谢。研究主要集中在最常见的致病酵母白色念珠菌(Candidaalbicans)和其相关物种。最近，分子和遗传研究有助于鉴定负责致病酵母这种异常行为的各个因子，这些因子随后是新开发的疗法的重要目标(2)。目前可用于治疗皮肤真菌和酵母感染的疗法主要是来自唑类、烯丙胺类和棘白菌素类的化学抗真菌产品，然而，这些产品因其低效和频繁的副作用而不利于广泛的使用者群体(老年人、糖尿病或肝病患者、免疫力减弱的人)而声名狼藉。使用这些产品的疗法相对非常昂贵，且只产生暂时的效果。他们无法以任何方式处理与此类疾病相关的生态失调(破坏正常的生理微生物群落)。出于这个原因，长期有效的以稳定正常微生物群落的现代治疗是一项主要挑战。迄今为止，使用天然生物制品来治疗皮肤真菌病和酵母感染仅开发了很小的程度。使用寡雄腐霉微生物来保护皮肤的问题在Biopreparátyspolsr.o.的员工、专利技术人等人的技术CZ9883U(优先权日期为1999年11月18日)中有涉及。作者使用一种卵孢子的量为每1g产品不超过2×105个卵孢子悬浮液来处理9组患者的某些皮肤问题。然而，正如CZ9883U的作者错误地认为的那样，这不是消除皮肤真菌病起源的情况，其中在文件中并没有任何证据来证实这种争论。作者展示了寡雄腐霉微生物对Scopulariopsisbreviacaulis效果的实验室结果；然而，这种微生物是腐生土壤微生物(而不是皮肤真菌)。在CZUV9883监测的任何患者中都没有进行微生物检查，因此不可能证明他们实际上是如何受到皮肤真菌的影响。就所宣称的治疗效果而言，文件中没有提及患者受到医学监测，并且在许多情况下，所涉及的描述的效果(指甲颜色的变化、疼痛消失)更多地是他们的主观感受问题。由本专利技术的申请人拥有的专利CZ302297在要求的毒理学测试后首次使用更高浓度的卵孢子(每1g产品超过2×105)，但不涉及更具体的人皮肤真菌病或酵母感染的问题。相反，该解决方案的优点在于它首先阐明了真菌寄生微生物寡雄腐霉在除水性悬浮液之外的环境(例如软膏、油和其它施用形式)中起作用的能力。此外，首次强调了除休眠卵孢子以外的寡雄腐霉微生物的活细胞形式的重要性，特别是被囊的游动孢子和菌丝体的活片段作为直接真菌寄生中最有效的寡雄腐霉微生物的形式。由本专利技术的申请人拥有的技术CZ28816U详细地涉及使用二元微生物制剂的机会性微生物感染的问题；然而，这些二元微生物制剂特征在于使用菌落形成单位(CFU)的经典方式，其使用在寡雄腐霉微生物的情况下并非没有缺陷。因此，现有解决方案的缺点和对开发医药产品的道路的显著限制是缺乏对有效物质寡雄腐霉的性质的充分理解，寡雄腐霉在制剂中的量通常不能精确测定。因此，确定这些制剂的强度和有效性可能很难确定和再现。
技术实现思路
根据本专利技术权利要求1，在治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染中，以上所述的缺点由含有真菌寄生生物体寡雄腐霉的制剂消除或显著限制，其实质是基于以下事实：在施用部位施用的每1ml水性悬浮液制剂含有1至10×106个，优选10至50个微生物寡雄腐霉的活细胞，其中寡雄腐霉微生物的活细胞含有休眠的卵孢子、被囊的游动孢子和活的多核菌丝体。此外，所述专利技术的新主题也是测定微生物寡雄腐霉的细胞活力的方法。所提交的专利技术的真菌寄生微生物寡雄腐霉的细胞活力是指通过制剂的遗传测试、通过测量寡雄腐霉微生物的β-微管蛋白的组成型基因的表达水平来测定的活力(11)，所述微生物在30℃在正常大气中保持在富含营养物的培养基中。所提交的专利技术还涉及施用根据本专利技术的制剂的方法，其实质基于以下事实：所述方法包括以下步骤：a)在确定体积的微温水或生理溶液中机械分散干燥混合物来制备水性悬浮液，以获得在施用部位含量为每1ml水性悬浮液1至10×106个真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞，有利地1至500个真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞，优选10至50个真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞；b)根据所治疗的诊断类型，使用推荐量的真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞，施用以这种方式产生的水性悬浮液；c)根据所治疗的诊断，在施用部位定殖真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞；d)根据所治疗的诊断，在施用部位繁殖真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞以消除皮肤真菌或酵母；e)随后在施用部位进行孢子形成并同时消除制剂，促进正常微生物群落的稳定和发展，以确保长期治疗效果。根据本专利技术的制剂以软膏、油、凝胶、喷雾、保湿膏药或粉末形式的施用以本领域技术人员已知的方式进行，其目的是对应于特定诊断要求使用一定量的活细胞在受影响的施用部位本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含有真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythium oligandrum)的制剂，其用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染，其得自含有0.1至99.9重量％的真菌寄生微生物寡雄腐霉和0.1至99.9％的辅助物质的干燥混合物，所述辅助物质含有至少一种选自吸附剂、缓冲剂、保湿剂、除臭剂和芳香剂的组分，其特征在于，其在施用部位每1ml的水性悬浮液含有1至10×10

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.07.01 CZ PV2016-403;2016.07.08 CZ PV2016-4171.一种含有真菌寄生微生物寡雄腐霉(Pythiumoligandrum)的制剂，其用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染，其得自含有0.1至99.9重量％的真菌寄生微生物寡雄腐霉和0.1至99.9％的辅助物质的干燥混合物，所述辅助物质含有至少一种选自吸附剂、缓冲剂、保湿剂、除臭剂和芳香剂的组分，其特征在于，其在施用部位每1ml的水性悬浮液含有1至10×106个微生物寡雄腐霉的活细胞，其中微生物寡雄腐霉的活细胞包含休眠的卵孢子、被囊的游动孢子和活的多核菌丝体。2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，其每1ml以水性悬浮液施用的制剂含有1至500个微生物寡雄腐霉的活细胞。3.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，其每1ml以水性悬浮液施用的制剂含有10至50个微生物寡雄腐霉的活细胞。4.一种测定微生物寡雄腐霉的细胞活力的方法，所述寡雄腐霉用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染，其得自含有0.1至99.9重量％的真菌寄生微生物寡雄腐霉和0.1至99.9％的辅助物质的干燥混合物，所述辅助物质含有至少一种选自吸附剂、缓冲剂、保湿剂、除臭剂和芳香剂的组分，其特征在于，所述方法通过水性悬浮液形式的制剂的遗传测试进行，并且测量微生物寡雄腐霉的β-微管蛋白的组成型基因的表达水平，所述微生物在30℃在标准大气保持在富含营养物的培养基中。5.一种施用制剂的方法，所述制剂含有根据前述权利要求1-3任一项的真菌寄生微生物寡雄腐霉，其用于治疗皮肤和粘膜上的皮肤真菌病和酵母感染，其特征在于，包含以下步骤：a)在限定体积的微温水或生理溶液中机械分散干燥混合物来制备水性悬浮液，以获得在施用部位含量为每1ml水性悬浮液1至10×106个真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞，有利地1至500个真菌寄生微生物寡雄腐霉的活细胞，并且优选10至50个真菌寄生...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·沙涅克，R·克利麦斯，
申请(专利权)人：生物药物研究和开发巴德有限公司，
类型：发明
国别省市：捷克,CZ