【技术实现步骤摘要】
系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法
本专利技术涉及代谢组学领域，具体涉及一种系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法。
技术介绍
系统性硬化症(Systemicsclerosis,SSc)，也被称为硬皮病(scleroderma)，是一种以局限性或弥漫性皮肤增厚和纤维化为主要特征，可引起多系统损害的结缔组织病。在亚洲，SSc的发病率为7.2/1000000-10.9/1000000人，患病率为38/1000000-56.3/1000000人，女性发病明显多于男性。根据皮肤受累程度，临床上常将SSc分为局限型SSc(lcSSc)，皮肤增厚局限于手肘或膝盖的远端，内脏器官受累较少；弥散型SSc(dcSSc)，皮肤受累范围广泛，在早期即可有严重的内脏受累等并发症。纤维化作为系统性硬化症患者主要的死亡原因，每年可造成巨大的社会经济影响。根据相关文献报道，SSc患者的死亡率明显高于一般人群，其五年生存率为74.9％，10年生存率为62.5％。该病发生后，既会对患者的皮肤、关节肌肉造成侵犯，包括皮肤硬化、指端溃疡、甲褶微循环异常、食管功能障碍等，更为重要的是，还会对...
【技术保护点】
1.一种系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法，其特征在于：样品预处理后，采用超高效液相色谱UHPLC进行分离，色谱条件为：柱温25℃；流速0.3mL/min；进样量2μL；流动相组成A：水+25mM乙酸铵+25mM氨水，B：乙腈；梯度洗脱程序如下：0‑1min，95％B；1‑14min，B从95％线性变化至65％；14‑16min，B从65％线性变化至40％；16‑18min，B维持在40％；18‑18.1min，B从40％线性变化至95％；18.1‑23min，B维持在95％；自动进样器4℃；为避免仪器检测信号波动而造成的影响，采用随机顺序进行样本的连续分析，样本队...
【技术特征摘要】
1.一种系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法，其特征在于：样品预处理后，采用超高效液相色谱UHPLC进行分离，色谱条件为：柱温25℃；流速0.3mL/min；进样量2μL；流动相组成A：水+25mM乙酸铵+25mM氨水，B：乙腈；梯度洗脱程序如下：0-1min，95％B；1-14min，B从95％线性变化至65％；14-16min，B从65％线性变化至40％；16-18min，B维持在40％；18-18.1min，B从40％线性变化至95％；18.1-23min，B维持在95％；自动进样器4℃；为避免仪器检测信号波动而造成的影响，采用随机顺序进行样本的连续分析，样本队列中插入质控QC样品，用于监测和评价系统的稳定性及实验数据的可靠性；样品经超高效液相色谱UHPLC分离后用质谱仪Q-TOF进行质谱分析，Q-TOF质谱条件为：分别采用电喷雾电离ESI正离子和负离子模式进行检测。2.根据权利要求1所述的系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法，其特征在于：样品预处理步骤为：-80℃取样本，在4℃环境下缓慢解冻后，分别取各组样本100ul后加入400ul预冷甲醇/乙腈溶液涡旋混合，其中甲醇：乙腈＝1:1(v/v)，-20℃静置60min，14000g4℃离心20min，取上清真空干燥。3.根据权利要求1所述的系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法，其特征在于：所述的色谱柱为Agilent1290InfinityLC超高效液相色谱系统HILIC色谱柱；质谱仪为TripleTOF5600质谱仪。4.根据权利要求1所述的系统性硬化症诊断的脂肪酸代谢物分析检测方法，其特征在于：质谱分析时，样品加入100μL乙腈水溶液复溶，其中乙腈：水＝1:1(v/v)，涡旋，14000g4℃离心15mi...
【专利技术属性】
技术研发人员：王丹丹，孙凌云，冯学兵，张华勇，孙宸，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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