一种筛选miRNA调控剂的细胞模型及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种筛选miRNA调控剂的细胞模型，该细胞模型以HEK293细胞为宿主，转染入含有anti‑miR‑138‑5p序列与报告基因的重组质粒。另外，本发明专利技术还公开了该细胞模型的建立方法以及在筛选miRNA调控剂中的应用。本发明专利技术首次建立了基于pEGFP‑C2质粒的miR‑138‑5p调控剂的活细胞筛选体系，使得调控剂对细胞内miR‑138‑5p的调控情况可方便地通过细胞荧光信号的变化观察到；为筛选预防、治疗或改善miR‑138‑5p表达异常相关疾病的经典调控剂提供了有力的筛选工具。

A Cell Model for Screening MicroRNA Regulators and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种筛选miRNA调控剂的细胞模型及应用
本专利技术属于生物医学
，具体涉及一种筛选miRNA调控剂的细胞模型及应用。
技术介绍
MicroRNA(miRNA)是真核生物体内一类长度为18～25个核苷酸序列的内源性非编码小RNA，通过结合靶基因的3’UTR区，抑制靶基因翻译或降解靶mRNA，在转录和转录后水平调控靶基因的表达。研究表明，miRNAs在细胞生长、分化、增殖、生物发育过程中发挥巨大作用，能够调控大量的靶基因，从而具有重要的生物学效应。异常表达的miRNAs与包括癌症在内的多种疾病的发生发展相关，miRNAs表达特征可作为某些疾病的分子标签，现已成为治疗各种疾病的潜在靶点。近些年来，随着对miRNA调控作用研究的不断深入，寻找靶向miRNA的药物，如对miRNA具有调控作用的化学小分子和化学合成的核酸引起了很多科学家的重视。利用在转录/转录后水平调控miRNA的调控剂，可直接或间接改变细胞内的miRNA水平或功能。miRNAs模拟物、抑制物或调控剂作为新型治疗剂为疾病的分子水平靶向治疗提供了思路，因此具有广阔的研究前景。miR-138-5p作为miR-138家族成员之本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种筛选miRNA调控剂的细胞模型，其特征在于，该细胞模型以HEK293细胞为宿主，转染入含有anti‑miR‑138‑5p序列与报告基因的重组质粒。

【技术特征摘要】
1.一种筛选miRNA调控剂的细胞模型，其特征在于，该细胞模型以HEK293细胞为宿主，转染入含有anti-miR-138-5p序列与报告基因的重组质粒。2.根据权利要求1所述的一种筛选miRNA调控剂的细胞模型，其特征在于，所述anti-miR-138-5p的序列为：5’-CGGCCTGATTCACAACACCAGCT-3’。3.根据权利要求2所述的一种筛选miRNA调控剂的细胞模型，其特征在于，所述报告基因为增强型绿色荧光蛋白EGFP。4.一种建立如权利要求3中所述细胞模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、用AATT的连接序列连接两个重复的anti-miR-138-5p序列，选择pEGFP-C2质粒多克隆位点中XhoI和PstI作为双酶切位点，设计靶序列引物，序列为：正义引物：5’-AGTCCGGACTCAGATCTCGAGCGGCCTGATTCACAACACCAGCTAATTCGGC...

【专利技术属性】
技术研发人员：骞爱荣，王雪，田野，高永光，李瑞云，裴佳伟，杨超飞，苏佩红，赵欣，罗晓庆，
申请(专利权)人：西北工业大学，西安九清生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61