【技术实现步骤摘要】
一种地肤花粉变应原浸提物、其浸提液及其制备方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种地肤花粉变应原浸提物、其浸提液及其制备方法。
技术介绍
人们对变态反应疾病的认识始于“花粉热”，花粉热又称过敏性鼻炎。1911年Noon和Freeman首次利用花粉提取液来治疗花粉热，变态原疾病治疗的历史从此开始。目前，变态反应性疾病是全球性重大卫生问题之一。工业化国家超过25％的人口被变应性哮喘、变应性鼻结膜炎及变应性皮炎困扰，其中以变应性哮喘最为常见。吸入致敏花粉是引发变应性哮喘及其他呼吸道变态反应性疾病的最重要因素。VRTA—L.A等调查发现近50％的变态反应性疾病患者对草类花粉过敏。叶筱燕的《130例慢性荨麻疹点刺试验结果分析》指出130例慢性荨麻疹对吸入物抗原测试反应结果中，地肤花粉阳性率为17.69％；郝玉琴的《皮肤点刺试验检测慢性荨麻疹、湿疹变应原的临床意义》指出186例慢性荨麻疹、湿疹病人吸入物变应原检测阳性结果，地肤占7.5％；潘武林的《63例慢性荨麻疹变应原皮肤检测分析》得出63例慢性荨麻疹患者吸入变应原检测阳性结果，地肤花粉占7.1％。以上地肤花粉流行病学...
【技术保护点】
1.一种地肤花粉变应原浸物，其含有致敏蛋白Koc S1’；所述Koc S1’含有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种地肤花粉变应原浸物，其含有致敏蛋白KocS1’；所述KocS1’含有如SEQIDNO.4所示的氨基酸序列。2.一种地肤花粉变应原浸液，其特征在于，所述变应原浸液中含有治疗有效量或诊断有效量的地肤花粉变应原、体积比为0.2～0.4％的苯酚、体积比为45～55％的甘油和4.5～5.5g/L的NaCl，其pH值为6.0～8.0。3.根据权利要求2所述的地肤花粉变应原浸液，其特征在于，所述地肤花粉变应原的活性浓度为50000～200000BAU/ml。4.根据权利要求2所述的地肤花粉变应原浸液，其特征在于，所述地肤花粉变应原浸液的总蛋白浓度0.28～1.12mg/ml。5.根据权利要求2所述的地肤花粉变应原浸液，其特征在于，通过SDS-PAGE和WesternBlotting检测，所述地肤花粉变应原的蛋白分布主要在11kDa、14.5kDa、18kDa、28kDa、42kDa、68kDa、72kDa、85kDa和115kDa。6.根据权利要求2所述的地肤花粉变应原浸液，其特征在于，通过全蛋白质谱或经SDS-PAGE分离后将对应分子量胶条分别取样进行质谱检测，所述地肤花粉变应原浸提物主要含且不限于如SEQIDNO.6-SEQIDNO.17所示的特征性肽段。7.一种根据权利要求2-6中任一项所述地肤花粉变应原浸液的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：S1、采集地肤花粉，常温干燥真空干燥或流化床干燥；S2、对干燥后的花粉脱脂、干燥；S3、将脱脂干燥后的地肤花粉按重量g体积ml比1:50～1:10加入pH为7.9～8.2磷酸盐—盐水缓冲液，2-8℃搅拌22～26h进行浸提；S4、取步骤S3后的浸提液，离心取上清液；将上清液过滤及除菌过滤；S5、将过滤后的上清液进行超滤浓缩，获得超滤浓缩液；S6、将所述超滤浓缩液经过二次过滤和除菌过滤后，真空冻干获得地肤花粉变应原冻干品；S7、将所述地肤花粉变应原冻干品用pH6.5～7.5磷酸盐—盐水缓冲液复溶配置为地肤花粉变应原原液，2～8℃放置，与等体积灭菌的甘油混匀，调节溶液pH值至6.0～8.0。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤S2中，所述花粉脱脂采用花粉与丙酮以1：5～1:1的重量g体积ml比进行脱脂处理，重复脱脂至上层液体澄清。9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤S4中，所述离心的条件为8000～12000g，离心温度2～8℃，时间为15～20min；所述过滤及除菌过滤为先用4000目滤布过滤后，再通过纸板过滤、0.45μm和0.22μm滤膜依次过滤。10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述超滤浓缩用3KD超滤膜超滤，当超滤透过液总蛋白含量≤0.02mg/ml，停止超滤；当超滤透...
【专利技术属性】
技术研发人员：周俊雄，尹佳，王良录，王瑞琦，顾建青，支玉香，李宏，汤蕊，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京,11
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