羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用制造技术

羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用，能够对饱和脂肪酸造成的主动脉内皮细胞炎症反应有抑制作用；能够降低主动脉内皮细胞内的基质金属蛋白酶‑1(MMP‑1)、细胞间黏附分子‑1(ICAM1)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂‑1(PAI‑1)的mRNA水平含量，能够对饱和脂肪酸造成的主动脉内皮细胞炎症反应所损伤的线粒体起保护作用，通过抗炎和保护线粒体功能来预防动脉粥样硬化的发生和发展。

Application of Hydroxytyrosol Acetate in the Preparation of Drugs for Improving the Function of Aortic Endothelial Cells

【技术实现步骤摘要】
羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用
本专利技术属于医药学
，特别涉及羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用。
技术介绍
据2011年世界卫生组织发布的关于心血管疾病的预防与控制的全球数据显示，心血管疾病导致的死亡占全球死亡人数的31％，仅次于其它非传染性疾病的总数。且预计2008年到2030年心血管疾病导致的死亡率明显高于其它疾病，处于领先地位。心血管疾病主要包括心脑血管疾病，如心肌梗死和脑梗死等。而动脉粥样硬化是心血管疾病的病理基础。动脉粥样硬化的发病机制非常复杂，发生于血管壁中，是一种慢性炎症反应、形成斑块、且伴随有血管内皮细胞损伤。导致动脉粥样硬化的因素主要有高盐、高脂、高能量、吸烟等不健康饮食以及代谢型危险因素，包括三高及肥胖等疾病。目前动脉粥样硬化有药物和手术等治疗方式，但该类型疾病隐匿性高、致死和致残率都较高，因此提早预防显得尤为重要，有研究报道，天然活性成分如绿原酸、芎芍及木酚素等具有抗动脉粥样硬化的功能，且以此为原料的功能性食品相继问世。挖掘更多效能更好的抗动脉粥样硬化等心血管疾病的天然物质具有重要的意义和前景。羟基酪醇酯在1999年被发现是一种存在西班牙橄榄油的天然产品，而西班牙橄榄油的羟基酪醇酯含量是布兰卡橄榄油羟基酪醇酯含量的7倍。羟基酪醇酯不仅可以从大部分的橄榄品种生产出来，而且也可以从黑橄榄自然发酵的方式产生。羟基酪醇酯不但可以应用在化妆品上，也可以预防脑缺血性中风、肝、肾疾病，以及肌肉损伤的身体负荷所导致的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用，羟基酪醇醋酸酯可明显抑制饱和脂肪酸造成的人主动脉内皮细胞炎症反应及增加血管内皮细胞线粒体膜融合蛋白的产生，通过抗炎和保护线粒体功能来预防动脉粥样硬化的发生和发展。本专利技术是通过以下技术方案来实现：羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用。所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够对饱和脂肪酸造成的主动脉内皮细胞炎症反应有抑制作用。所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够降低主动脉内皮细胞内的基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的mRNA水平含量。所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够降低主动脉内皮细胞内的白介素6(IL-6)。所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够对饱和脂肪酸造成的主动脉内皮细胞炎症反应所损伤的线粒体起保护作用。所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够降低细胞过量活性氧簇的产生以及增加线粒体膜融合相关蛋白Mfn2。所述的羟基酪醇醋酸酯能够应用在制备防治心血管疾病的药物中的。所述的药物是治疗动脉粥样硬化的药物。所述的羟基酪醇醋酸酯能够应用在制备预防动脉粥样硬化发生的药物或保健品中。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：羟基酪醇醋酸酯对人主动脉内皮细胞无毒副作用，本专利技术首次公开指出羟基酪醇醋酸酯在血管内皮损伤和炎症反应的动脉粥样硬化等血管疾病发生的过程中，羟基酪醇醋酸酯可明显抑制饱和脂肪酸造成的人主动脉内皮细胞炎症反应及增加血管内皮细胞线粒体膜融合相关蛋白的产生，通过抗炎和保护线粒体功能来预防动脉粥样硬化的发生和发展。羟基酪醇醋酸酯能够有效降低饱和脂肪酸造成的人主动脉内皮炎性反应，如白介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的mRNA水平含量；羟基酪醇醋酸酯能够有效保护饱和脂肪酸对人主动脉内皮线粒体功能的损伤，如可降低细胞过量活性氧簇的产生以及增加线粒体膜融合相关蛋白Mfn2的表达等；其对于预防血管疾病发生和进展中具有很好的应用前景。附图说明图1是羟基酪醇醋酸酯对人主动脉内皮细胞无毒副作用的坐标图，其中：横坐标为羟基酪醇醋酸酯的作用浓度，纵坐标为细胞活性。图2是羟基酪醇醋酸酯对棕榈酸诱导人主动脉内皮细胞炎症反应的抑制作用坐标图，其中：横坐标为羟基酪醇醋酸酯的作用浓度，纵坐标为IL-6、MMP-1、ICAM1和PAI-1的mRNA水平含量。图3A～图3B是羟基酪醇醋酸酯可降低棕榈酸诱导人主动脉内皮细胞过量活性氧簇的产生结果图，其中：图3A为显微镜结果图；图3B为酶标仪结果图。图4A～图4B是羟基酪醇醋酸酯可上调棕榈酸诱导人主动脉内皮细胞线粒体膜融合相关蛋白Mfn2表达的降低表达图，其中：图4A为Westernblot结果图；图4B为Westernblot统计图，横坐标为蛋白名称，纵坐标为相对蛋白表达水平含量。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。1.实验材料羟基酪醇醋酸酯从上海源叶生物科技有限公司购买，货号为#69039-02-7，HPLC纯度≥98％；TRIzol试剂从Invitrogen公司购买；RNA逆转录试剂盒，SYBR荧光染料从大连宝生物公司购买。RNA引物序列从西安擎科泽西生物有限公司订购合成。2.实验细胞培养及模型建立人主动脉内皮细胞(Humanaorticendothelialcells,HAEC)从上海拜力生物科技有限公司购买，棕榈酸购买于sigma公司。细胞培养于含有95％空气和5％CO2的37℃恒温、湿润、无菌培养箱中。实验分为三组，分别为：(1)control组；(2)500μM棕榈酸处理组；(3)羟基酪醇醋酸酯保护组。3.实验方法(1)MTT检测用不同浓度的羟基酪醇醋酸酯作用于HAEC，细胞培养箱培养24h，后用500μM的棕榈酸作用24h后，用PBS清洗细胞一遍，加入0.5mg/ml的MTT，在含有95％空气和CO2的37℃培养箱中孵育4h后，用PBS清洗三遍，再加入DMSO溶解，并在490nm的波长下检测其吸光值。(2)白介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的mRNA含量检测采用逆转录RNA-实时荧光定量PCR的方法进行检测。具体方法如下：1)RNA提取12孔细胞培养板，每孔加入500μL的TRIzol试剂，室温，摇床5min，加入200μl氯仿(1/5总体积)抽提蛋白，剧烈混匀15s，室温放置15min后，12,000g,4℃,离心10分钟。将上层水相转移至另一EP管中，加入等体积异丙醇，混匀后-20℃放置1h后，12,000g,4℃,离心10min，弃上清。加入1mL预冷的75％乙醇，颠倒混匀，12,000g,4℃，离心10min。弃上清，超净工作台放置30min，使乙醇挥发完全挥发掉，溶于10μlDEPC水中。用紫外分光光度计检测测定其浓度，用于反转录。2)RNA反转录转录体积为20μl，取出2μgRNA，加入随机引物0.5μg。加入4μl的5XMasterMix，用DEPC水补充至20μl体积，37℃孵育60min，80℃作用15s。置于-20℃备用。3)实时荧光定量PCR(Real-timePCR)用SYBRGreen法进行，反应体系包本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够对饱和脂肪酸造成的主动脉内皮细胞炎症反应有抑制作用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够降低主动脉内皮细胞内的基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM1)和血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的mRNA水平含量。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的羟基酪醇醋酸酯在制备改善主动脉内皮细胞功能的药物中，能够降低主动脉内皮细胞内的白介素6(IL-6)。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘健康，柳絮云，王潇婕，熊跃，赵琳，朱才悦，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61