羟基酪醇醋酸酯在改善血管内皮功能障碍疾病中的应用制造技术

本发明专利技术公开了羟基酪醇醋酸酯在改善血管内皮功能障碍疾病中的应用，属于医药卫生技术领域，本发明专利技术以血管内皮SIRT6特异性敲除的纯合型(SIRT6

【技术实现步骤摘要】
羟基酪醇醋酸酯在改善血管内皮功能障碍疾病中的应用
本专利技术属于医药卫生
，涉及羟基酪醇醋酸酯在改善血管内皮功能障碍疾病中的应用。
技术介绍
动脉粥样硬化引起的心脑血管疾病已经成为导致人类死亡的主要原因之一。动脉粥样硬化是一个多因素、多阶段的病理过程，发病机制复杂，至今尚未完全阐明。氧化损伤-炎性反应学说是目前较公认的解释动脉粥样硬化发病机理的重要学说，该学说认为血管内皮细胞氧化应激损伤是动脉粥样硬化发生的始发环节，而炎症反应是促进动脉粥样硬化病理进程的重要因素。内皮细胞通过促进血管舒张、抑制平滑肌增生以及抑制血管内皮炎症等一系列血管保护作用来调控血管内稳态的维持。减轻血管炎症和改善内皮功能紊乱对于对于降低心血管疾病风险极其重要。目前临床上能改善血管内皮功能的药物均会导致患者产生一定的药物不良反应，如他汀类药物长期使用会引起肌痛等不良反应使患者难以长期耐受，双胍类药物会引起胃肠障碍或偶尔引起乳酸性酸中毒，噻唑烷衍生物会引起体液贮留或体重增加、肝功能障碍等严重副作用。因此，寻求安全而有效的血管内皮功能紊乱的治疗药物十分有必要。羟基酪醇醋酸酯(Hydroxytyrosolacetate，HT-AC)化学名乙酸-2-(3,4-二羟基苯基)乙酯，是橄榄油中除羟基酪醇(Hydroxytyrosol，HT)外的另一种天然多酚类化合物。羟基酪醇因其特殊的生物和药理活性，用途十分广泛。目前国外已有含有羟基酪醇的保健产品进入市场。而大量研究报道，与羟基酪醇相比，羟基酪醇醋酸酯有更好的抗血小板聚集和抗氧化活性。此外，羟基酪醇醋酸酯比羟基酪醇有更好的稳定性，且作为一种天然多酚类化合物，毒副作用小。Sirtuins(SIRT1～SIRT7)蛋白家族是一类NAD+依赖的蛋白去乙酰化酶和(或)ADP核糖基转移酶，在细胞分化、衰老、凋亡、生理节律、代谢调控、转录调节、信号转导、氧化应激等多种重要的生物学过程中发挥重要作用。有报道SIRT6可通过增加血管内皮细胞促炎因子IL-1β，IL-6，IL-8和细胞外基质金属蛋白酶(MMP-2，MMP-9)的表达，从而促进动脉粥样硬化发生、发展。越来越多的证据表明，SIRT6通过抑制促炎细胞因子的释放，在调节炎症相关疾病方面起着重要作用。最近有研究表明，通过SIRT6介导的自噬，羟基酪醇抑制骨关节炎中软骨细胞的炎症反应。PKM2是丙酮酸激酶(Pyruvatekinase,PK)的一种亚型，是糖酵解过程中最后一步反应的限速酶，它能使磷酸烯醇式丙酮酸脱羧生成丙酮酸并产生ATP。近年来研究发现，原本定位在细胞质中的PKM2除了在能量代谢中发挥酶催化作用外，还可以通过多种途径进入细胞核，进而广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。已有研究报道，在巨噬细胞中，LPS诱导PKM2进入细胞核中与HIF-1α形成转录复合物，然后直接与IL-1β启动子结合并激活IL-1β的转录。此外，有研究证明，SIRT6可直接去乙酰化PKM2从而抑制PKM2的核定位和致癌作用。虽然现有技术已报道羟基酪醇醋酸酯具有多种生物活性，但至今还未报道过羟基酪醇醋酸酯能够减轻血管内皮炎症或改善血管内皮功能及其作用机制。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供羟基酪醇醋酸酯在改善血管内皮功能障碍疾病中的应用。为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：本专利技术公开了羟基酪醇醋酸酯在制备治疗血管内皮功能障碍疾病的药物中的应用。优选地，所述的药物是通过SIRT6介导的PKM2发挥抗血管内皮炎症作用的药物。进一步优选地，所述的药物为增加主动脉中SIRT6蛋白和mRNA表达、同时减少主动脉中PKM2蛋白表达的药物。优选地，所述的药物为能够降低血脂的药物。优选地，所述的药物为能够降低血清中炎症因子TNF-α和IL-1β浓度的药物。优选地，所述的药物为能够降低主动脉中TNF-α、IL-1β、IL-6和MCP-1的mRNA表达的药物。本专利技术还公开了羟基酪醇醋酸酯在制备改善血管内皮功能的药物中的应用。优选地，所述的药物为具有抗血管内皮细胞氧化应激和炎症作用的药物。优选地，所述的药物为改善血管内皮通透性的药物。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术以血管内皮SIRT6特异性敲除的纯合型(SIRT6endo-/-)小鼠和同窝阴性(SIRT6endo+/+)小鼠为研究对象，通过腹腔注射泊洛沙姆407(0.5g/kg/2day)一个月诱导建立高脂血症炎症小鼠模型，研究发现羟基酪醇醋酸酯具有降低血脂及血管炎症的作用，且是通过SIRT6介导的PKM2发挥抗血管内皮炎症作用的。在细胞水平，以人脐静脉内皮细胞为对象，发现羟基酪醇醋酸酯具有抗血管内皮细胞氧化应激和炎症的作用，并进一步通过TNFR1中和抗体、腺病毒高表达SIRT6或siRNA沉默SIRT6等技术，发现羟基酪醇醋酸酯通过TNFR1-SIRT6-PKM2信号通路发挥抗血管内皮细胞炎症作用。本专利技术经过体内外药理实验证实，羟基酪醇醋酸酯具有以下药理活性：(1)抗血管内皮细胞氧化应激的作用；(2)抗血管内皮细胞炎症的作用；(3)能改善血管内皮细胞的通透性。本专利技术发现羟基酪醇醋酸酯有良好的治疗血管炎症和/或改善血管内皮功能的作用，可用于防治心血管疾病，具有较大的临床应用价值。附图说明图1为羟基酪醇醋酸酯的合成路线图；图2为HT和HT-AC对高脂血症炎症小鼠血清中血脂(TC、TG、LDL-c和HDL-c)的影响；其中，(a)为TC；(b)为TG；(c)为LDL-c；(d)为HDL-c；图3为HT和HT-AC对高脂血症炎症小鼠血清中炎症因子TNF-α和IL-1β的影响；其中，(a)为TNF-α；(b)为IL-1β；图4为HT和HT-AC对高脂血症炎症小鼠主动脉中TNF-α、IL-1β、IL-6和MCP-1mRNA表达的影响；其中，(a)为TNF-αmRNA；(b)为IL-1βmRNA；(c)为IL-6mRNA；(d)为MCP-1mRNA；图5为HT和HT-AC对高脂血症炎症小鼠血管内皮通透性的影响；(a)为影响结果照片；(b)为统计结果图；图6为HT-AC对高脂血症炎症小鼠主动脉中SIRT6和PKM2表达的影响；其中，(a)为SIRT6蛋白水平；(b)为SIRT6mRNA水平；(c)为PKM2蛋白表达水平；图7为HT-AC对SIRT6endo-/-高脂血症炎症小鼠主动脉中SIRT6、PKM2表达的影响；其中，(a)为SIRT6蛋白水平；(b)为SIRT6mRNA水平；(c)为PKM2蛋白表达水平；(d)为PKM2免疫组化图；图8为HT-AC对SIRT6endo-/-高脂血症炎症小鼠主动脉中TNF-α、IL-1β、IL-6和MCP-1mRNA表达的影响；其中，(a)为TNF-α；(b)为IL-1β；(c)为IL-6；(d)为MCP-1；图9为HT-AC对SIRT6endo-/-高脂血症炎症小鼠血管内皮通透性的影响；其中，(a)为影响结果照片；(b)为统计结果图；图10为MTT法检测HT和HT-AC对HUVECs细胞活力的影响；其中，(a)为HT；(b)为HT-AC；图11为HT和HT-AC对TNF-α刺激的HUVECs的炎症反应的影响；其中，(a)为对IL-1βmRNA表达水平影响；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.羟基酪醇醋酸酯在制备治疗血管内皮功能障碍疾病的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.羟基酪醇醋酸酯在制备治疗血管内皮功能障碍疾病的药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物是通过SIRT6介导的PKM2发挥抗血管内皮炎症作用的药物。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的药物为增加主动脉中SIRT6蛋白和mRNA表达、同时减少主动脉中PKM2蛋白表达的药物。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物为能够降低血脂的药物。5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：林蓉，姚凤，王维蓉，杨广德，边晓丽，张继业，商晨旭，靳真，郑子涵，谢允东，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61