一种抗PD-L1抗体或其功能性片段及其用途制造技术

本申请属于生物医药领域，公开了以下几方面：一种抗PD‑L1抗体或其功能性片段；编码本申请所述抗PD‑L1抗体或其功能性片段的核酸分子，用于表达所述抗PD‑L1抗体或其功能性片段的表达载体和宿主细胞；所述抗PD‑L1抗体或其功能性片段的制备方法；包含所述抗PD‑L1抗体或其功能性片段的免疫缀合物以及其药物组合物；以及所述抗PD‑L1抗体或其功能性片段在制备用于治疗T细胞功能失调性疾病的药物的用途。

An Anti-PD-L1 Antibody or Its Functional Fragment and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种抗PD-L1抗体或其功能性片段及其用途
本申请属于生物医药领域，涉及抗PD-L1抗体的以下方面：一种抗PD-L1抗体或其功能性片段；编码本申请所述抗体或其功能性片段的核酸分子，用于表达所述抗体或其功能性片段的表达载体和宿主细胞；本申请所述抗PD-L1抗体或其功能性片段的制备方法；包含本申请所述抗PD-L1抗体或其功能性片段的免疫缀合物以及其药物组合物；以及本申请所述抗PD-L1抗体或其功能性片段在制备用于治疗T细胞功能失调性疾病的药物的用途。
技术介绍
程序性死亡配体1(Programmeddeath-ligand1，PD-L1)，也称为分化簇274(clusterofdifferentiation274，CD274)或者B7同源蛋白1(B7homolog1，B7-H1)，属于肿瘤坏死因子超家族，是由290个氨基酸残基组成的I型跨膜糖蛋白，包含一个IgV样区、一个IgC样区、一个跨膜疏水区和一个30个氨基酸的胞内尾部,完整分子量为40kDa。几乎所有组织中，PD-L1mRNA都有表达，但PD-L1蛋白只在少部分组织中持续表达，例如，肝脏、肺脏、扁桃体以及免疫特赦组织诸如眼、胎盘等。PD-L1也表达于活化的T细胞、B细胞、单核细胞、树突状细胞、巨噬细胞等。PD-L1的受体为程序性死亡受体1（Programmeddeath1，PD-1）。PD-1主要表达于CD4+T细胞、CD8+T细胞、NKT细胞、B细胞和活化的单核细胞等免疫细胞表面。PD-L1与PD-1结合可以启动PD-1胞浆区免疫受体酪氨酸抑制基序(Immunoreceptortyrosine-basedinhibitorymotif，ITIM)，酪氨酸残基的磷酸化，促使酪氨酸磷脂酶与SHP2结合，活化SHP2，使下游Syk和PI3K发生去磷酸化从而传递终止信号，限制抗原呈递细胞或者树突状细胞与T细胞的相互作用。这种结合还可以进一步抑制T细胞的代谢，抑制抗凋亡蛋白Bcl-X2的分泌，减少效应细胞因子人白细胞介素-2（Interleukin-2,IL-2）以及r-干扰素(Interferon-r,IFN-r)的分泌，诱导T细胞耗竭和凋亡，从而降低免疫T细胞参与的免疫应答，行使负性免疫调节功能。PD-L1在肿瘤组织高表达，例如，胃癌、肺癌、肝癌、肝内胆管癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、子宫颈癌、头颈鳞状细胞癌、鼻咽癌、食管癌、膀胱癌、肾细胞癌、皮肤癌、口腔鳞状细胞癌等。肿瘤部位PD-L1的表达可以通过多种途径保护肿瘤细胞免受伤害，PD-L1的负性免疫调节功能在肿瘤免疫中发挥着重要作用。因此，以PD-1/PD-L1为靶点的免疫调节对抗肿瘤有重要的意义，而且多种慢性和急性病毒也利用PD-L1信号逃避人体免疫检测。近年来，越来越多的临床前和临床研究结果表明，靶向免疫检查点正在成为最有希望的治疗癌症患者的方法。PD-1是免疫检查点蛋白之一，通过在活化的T细胞上表达的PD-1与在肿瘤细胞上表达的PD-L1的相互作用对免疫应答起负性调节并减弱抗肿瘤免疫力PD-L1在肿瘤上的表达，其与食管癌、胰腺癌和其它多种类型的癌症的生存率下降相关，该通路已作为新的有前途的肿瘤免疫治疗靶点。有制药公司已经开发了多种针对PD-1/PD-L1通路的药物，且临床试验的数据表明这类药物在多种肿瘤类型的患者中持久的临床活性和良好的安全性。然而，现有的治疗方法不都是尽如人意，仍然需要新的抗PD-L1的人源抗体。
技术实现思路
鉴于现有技术的上述不足和抗PD-L1抗体的临床应用需求，本申请的专利技术者一个方面旨在提供一种抗人PD-L1的抗体和其功能性片段；另一方面，旨在提供所述抗体或其功能性片段在治疗T细胞功能失调性疾病方面的用途；再一方面，旨在提供所述抗体的制备方法及检测方法。为了达到上述目的，第一方面，本申请提供了一种抗PD-L1全人源抗体，所述抗PD-L1抗体为单克隆抗体，所述抗PD-L1抗体至少包括重链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种，和/或轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种；其中：所述轻链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQIDNo.3所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.3所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述轻链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQIDNo.4所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.4所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述轻链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQIDNo.5所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.5所示的序列具有同等功能的氨基酸序列；以及所述重链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQIDNo.6所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.6所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述重链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQIDNo.7所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.7所示序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述重链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQIDNo.8所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.8所示的序列具有同等功能的氨基酸序列。其中：所述经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与序列表中SEQIDNo.3-8中任一所示序列具有同等功能的氨基酸序列中是指与本申请所述抗PD-L1抗体的氨基酸序列相比，有至多10个，较佳地至多8个，更佳地至多5个，最佳地至多3个氨基酸被性质相似或相近的氨基酸替换而形成的多肽。这种变体的序列与其来源序列有至少有95％、96％、97％、98％或99％的一致性。进一步地，所述抗PD-L1抗体的轻链可变区的氨基酸序列至少包括SEQIDNo.1所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.1所示序列具有同等功能的氨基酸序列，重链可变区的氨基酸序列至少包括SEQIDNo.2所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.2所示序列具有同等功能的氨基酸序列。进一步地，所述抗PD-L1抗体的轻链框架区（Frameworkregion，FR）包括FR1、FR2和FR3中的一种或多种，其中，所述轻链FR1的氨基酸序列为SEQIDNo.9所示的序列或该序列经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.9所示序列具有同等功能的氨基酸序列，所述轻链FR2的氨基酸序列为SEQIDNo.10所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.10所示序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述轻链FR3的氨基酸序列为SEQIDNo.11所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.11所示序列具有同等功能的氨基酸序列；进一步地，所述重链框架区包括FR1、FR2和FR3中的一种或多种，其中，所述重链FR1的氨基酸序列为SEQIDNo.12所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.12所示序列具有同等功能的氨基酸序列，所述重链FR2的氨基酸序列为SEQIDNo.13所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗PD‑L1全人源抗体，所述抗PD‑L1抗体为单克隆抗体，其特征在于，所述抗PD‑L1抗体至少包括重链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种，和/或轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种；其中：所述轻链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQ ID No.3所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ ID No.3所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述轻链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQ ID No.4所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ ID No.4所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述轻链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQ ID No.5所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ ID No.5所示的序列具有同等功能的氨基酸序列；以及所述重链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQ IDNo.6所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ IDNo.6所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述重链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQ ID No.7所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ ID No.7所示序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述重链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQ ID No.8所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQ ID No.8所示的序列具有同等功能的氨基酸序列。...

【技术特征摘要】
1.一种抗PD-L1全人源抗体，所述抗PD-L1抗体为单克隆抗体，其特征在于，所述抗PD-L1抗体至少包括重链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种，和/或轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3中的一种或多种；其中：所述轻链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQIDNo.3所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.3所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述轻链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQIDNo.4所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.4所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述轻链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQIDNo.5所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.5所示的序列具有同等功能的氨基酸序列；以及所述重链高变区CDR1的氨基酸序列为SEQIDNo.6所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.6所示的序列具有同等功能的氨基酸序列，所述重链高变区CDR2的氨基酸序列为SEQIDNo.7所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.7所示序列具有同等功能的氨基酸序列，和所述重链高变区CDR3的氨基酸序列为SEQIDNo.8所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.8所示的序列具有同等功能的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗PD-L1抗体，其特征在于，所述抗PD-L1抗体包括轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3以及重链高变区CDR1、CDR2和CDR3，其中：所述抗体的轻链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5所示的序列；所述抗体的重链高变区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQIDNo.6、SEQIDNo.7、SEQIDNo.8所示的序列。3.根据权利要求1所述的抗PD-L1抗体，其特征在于，所述抗PD-L1抗体还包括轻链可变区和重链可变区，其中：所述抗PD-L1抗体的轻链可变区的氨基酸序列至少包括SEQIDNo.1所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.1所示序列具有同等功能的氨基酸序列，所述抗PD-L1抗体的重链可变区的氨基酸序列至少包括SEQIDNo.2所示的序列或经替换、缺失或添加一个或多个氨基酸形成的与SEQIDNo.2所示序列具有同等功能的氨基酸序列。4.根据权利要求1所述的抗PD-L1抗体，其特征在于，所述抗PD-L1抗体还包括轻链框架区（Frameworkregion，FR）和重链框架区，其中；所述抗PD-L1抗体的轻链框架区包括轻链FR1、FR2和FR3中...

【专利技术属性】
技术研发人员：张明，原野，
申请(专利权)人：上海甲贝生物医药技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31