AZD1480在制备治疗流感病毒感染的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了AZD1480在制备治疗流感病毒感染药物中的应用。申请人在人单核细胞系U937上检测了AZD1480对细胞的毒性，又在无毒性或低毒的浓度范围内测定了AZD1480在U937细胞系中的对IL‑8，IP‑10以及MCP‑1这三个重要炎症因子的分泌抑制作用，结果显示这种小分子化合物具有显著的抗炎活性，且呈剂量依赖效应。在致死性小鼠流感感染模型中，使用AZD1480治疗感染小鼠，可以有效降低感染小鼠肺洗液中的炎症因子浓度、延缓小鼠体重下降速度、并提高小鼠存活率。因此，本发明专利技术披露的AZD1480是一种新型针对流感的抗炎药物，具备安全性好、选择指数高且动物模型实验有效等优点，可以用于开发治疗流感病毒感染的药物，具有广阔的应用前景。

Application of AZD1480 in the Preparation of Drugs for Influenza Virus Infection

【技术实现步骤摘要】
AZD1480在制备治疗流感病毒感染的药物中的应用
本专利技术属于医药
，主要涉及AZD1480在制备治疗流感病毒感染的药物中的应用。
技术介绍
流感病毒属于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)，流感病毒属。根据病毒粒子核蛋白(NP)和基质蛋白(M)的抗原特性及基因特性的不同，流感病毒分为A、B、C三型，也称甲、乙、丙三型。A型流感病毒全基因组由8条大小不等的单股负链RNA组成，分别以节段1至节段8命名。病毒基因组全长约13.6kb，编码10种结构蛋白(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M1、M2、PB1-F2和NS2/NEP)和非结构蛋白(NS1)。根据病毒粒子表面糖蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的不同，A型流感病毒可进一步分为17个H(H1-H17)和10个N(N1-N10)亚型。人流感病毒主要是H1,H2和H3亚型。而目前危害严重的高致病性禽流感多为H5、H7和H9亚型，其中以H5N1亚型致死率最高。B型流感病毒常引起流感局部流行，不引起世界性流感大爆发，仅在人和海豹中发现。C型流感病毒多以散在形式存在，主要侵袭婴幼儿，一般不引起流感流行，可感染人类和猪。流感病毒自20世纪初发现以来已在全球范围内造成五次大流行，十年左右会产生一次暴发流行，在全球范围内造成了巨大的损失。流感流行每年可导25万～50万例死亡，300万～500万重病例，全球约共有5～15％的人被感染。目前治疗流感的药物主要是神经氨酸酶抑制剂，此类药的代表是奥斯他韦和扎拉米韦。此类药物对所有已知的人流感病毒及高致病性禽流感病毒均有效。这些药抗病毒药物(如奥司他韦)需要在症状出现后48小时以内服用才会有较好疗效。超出这个时间窗口，治疗效果会有较大下降。造成这种现象的原因是在感染中后期病毒会引发过度的炎症反应，促发“炎症因子风暴”，仅仅压制病毒不足以控制疾病的进展，因此需要开发出能有效缓解流感炎症的药物。AZD1480,即5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟-2-嘧啶基)乙基]-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-2,4-嘧啶二胺，为治疗多发性骨髓瘤的潜在新型治疗剂,有效的ATP竞争性的JAK1/2激酶小分子抑制剂，可抑制STAT3磷酸化和肿瘤生长，这种抑制存在STAT3依赖性。AZD1480通过影响肿瘤的微环境而抑制肿瘤血管生成和局部转移.然而，目前并未发现任何关于AZD1480抗治疗流感的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于弥补现有技术的不足，提供了一种小分子化合物AZD1480在制备治疗流感病毒感染药物中的应用，从而为临床上流感的治疗提供一种安全有效的小分子化合物。AZD1480在无毒性范围内能够有效地抑制流感病毒的诱导的炎症因子，可进一步开发为治疗流感病毒感染引发炎症的药物，具有广泛的应用前景。AZD1480具有结构式Ⅰ所示的结构：为了实现上述的目的，本专利技术采用的技术方案是：AZD1480在制备治疗流感病毒感染药物中的应用：1在流感病毒感染细胞模型中评价AZD1480的毒性、抗炎活性并计算其选择指数，其步骤如下：(1)将单核细胞系U937以105每孔铺至96孔板中，若要检测抗炎效果，则同时感染0.1MOI(感染复数)流感H1N1病毒。(2)同时加入用培养基稀释成不同浓度梯度的AZD1480，培养48h。(3)检测药物处理组与未处理组的细胞活力，以检测AZD1480的细胞毒性。(4)检测药物处理组与未处理组上清中炎症因子浓度，以评估AZD1480抗流感病毒引发的炎活性。(5)计算AZD1480在两种细胞系上的选择指数。2在致死性动物流感感染模型中评价AZD1480在动物活体内的抗炎效果，其步骤如下(1)建立致死性小鼠流感病毒感染动物模型。(2)在感染病毒后第三天，即小鼠体重发生明显下降时，通过口服给药的方式用AZD1480治疗感染小鼠，连续四天，每天一次。(3)感染后第七天，取对照组与药物处理组小鼠肺灌洗液，检测其中炎症因子水平。(4)每天记录小鼠体重，死亡率，并绘制体重变化曲线和小鼠存活率曲线。(5)以感染后小鼠体重变化、存活率来评价AZD1480效果。所述的流感病毒包括但不限于：甲型流感病毒H1N1亚型(A/PuertoRico/8/1934)、H3N2亚型(A/Human/Hubei/3/2005)。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点和效果：1AZD1480是小分子化合物，其在U937细胞中CC50(半数致死浓度)均大于100.0μM。AZD1480对三种炎症因子IL-8、IP-10和MCP-1都能够剂量依赖的抑制炎症因子分泌，其在U937细胞中对IL-8的EC50(半数抑制浓度)仅为7.4μM，对IP-10的EC50为7.6μM，对MCP-1的EC50为6.3μM。通过计算，AZD1480的选择指数(SI)对三种炎症因子上均大于10，说明其全面的抗流感病毒引发的炎症的活性。2AZD1480在小鼠致死性流感感染模型中有效果，可以显著降低小鼠体重下降程度，降低小鼠肺洗液中的炎症因子水平，提高小鼠的存活时间和最终生存率。同时该药可以在感染三天后给药发挥作用，与现有的抗病毒药互补，这使得AZD1480具有非常大的临床治疗潜力。3AZD1480已经上市，具有大量的临床实验数据，若将其作为流感治疗用药，可显著降低临床试验时间，节省大量成本。附图说明图1AZD1480在U937中的毒性及抗炎效果；图1中A为不同浓度AZD1480处理后U937细胞活力；图1中B为不同浓度AZD1480在U937上对H1N1流感诱导IL-8的抑制率；图1中C为不同浓度AZD1480在U937上对H1N1流感诱导IP-10的抑制率；图1中D为不同浓度AZD1480在U937上对H1N1流感诱导MCP-1的抑制率。图2AZD1480在小鼠致死性流感感染模型中的效果；图2中A为小鼠体重变化曲线；图2中B为小鼠存活率曲线。具体实施方式为了更好地理解本专利技术的内容，下面结合具体实施方法对本
技术实现思路
作进一步说明，但本专利技术的保护内容不局限于以下实施例。本专利技术所述技术方案，如未特别说明，均为常规技术；所用试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。目前，治疗流感药物评价模型主要分为体外模型(invitromodel)和体内模型(invivomodel)。体外模型主要使用各种流感敏感细胞系或流感病理相关细胞系对药物进行评价，其优点在于可提供大量遗传性状相同的细胞为研究对象，操作方便，可消除其它外界因素的影响，并可以检测药物毒性、有效浓度和选择指数指数，为后期机理研究提供更多基础。体内模型一般使用各种模式动物感染模型，通过药物处理后的各种表型指标来衡量药物在活体动物内的整体效果。其优点是可对候选药物在活体内的效果进行真实、系统的评价。本专利技术采用能产生三个重要促炎因子的人单核细胞系U937对AZD1480的体外抗炎效果进行定量分析，并计算其选择指数。随后，采用致死性小鼠流感感染模型，对AZD1480的体内抗流感效果进行真实系统的评价。实验材料：(1)实验所需细胞系、实验动物及病毒U937细胞购自美国菌种保藏中心(ATCC)；SPF级6至8周龄Balb/c小鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。所用毒株：A型流感病毒H1N1亚型(A本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.AZD1480在制备治疗流感病毒感染的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.AZD1480在制备治疗流感病毒感染的药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的流感病毒为甲型流感病毒。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于：AZD1480作为药物活性成分，制成任何一种药学上可接受的剂型。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈绪林，陈思，
申请(专利权)人：武汉威立得生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42