基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用，所述化学发光试剂包括过氧化物、荧光试剂、增强试剂、及金属离子或金属盐。本发明专利技术中通过在化学发光试剂中添加金属离子或金属盐，具有发光强度高、发光时间长的优点，有效提高了检测灵敏度，降低了检测成本。

Chemiluminescence Reagent Based on Metal Ion Enhancement and Its Application

【技术实现步骤摘要】
基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用
本专利技术涉及生化检测
，特别是涉及一种基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用。
技术介绍
化学发光方法是生化检测时常用的一种检测方法，在蛋白印迹检测、核酸印迹检测、蛋白、核酸或特定抗原的酶联免疫检测等方面有着非常广泛的应用，也可以用于荧光棒等具有化学发光的玩具或装饰物。该方法在过氧化物酶、碱性磷酸酶等酶的催化下，催化荧光底物如鲁米诺等发出可以检测的化学发光。鲁米诺及其类似物如异鲁米诺等，在碱性条件下，与过氧化氢等过氧化物，在过氧化物酶，如辣根过氧化物酶的催化下，会发生反应产生化学发光。该发光反应在对碘苯酚等增强剂存在的情况下会被增强，而检测到更强的发光。现有的化学发光试剂主要存在如下的不足。1、发光相对较弱，检测灵敏度相对不高，对于较低量的过氧化物酶不易被检测到，或者难以精确定量；2、发光时间相对较短，导致检测时有有效检测时间短，对蛋白印迹、酶联免疫检测、核酸印迹等生化检测带来很大的不便。因此，针对上述技术问题，有必要提供一种基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种基于金属离子增强的化学发光试剂及其应用。为了实现上述目的，本专利技术一实施例提供的技术方案如下：一种基于金属离子增强的化学发光试剂，所述化学发光试剂包括过氧化物、荧光试剂、增强试剂、及金属离子或金属盐。作为本专利技术的进一步改进，所述金属离子包括铜离子、镍中的一种或多种，金属盐包括硫酸铜、氯化铜、醋酸铜、氯化镍中的一种或多种。作为本专利技术的进一步改进，所述金属离子或金属盐的浓度范围为1nmol/L～0.5mol/L。作为本专利技术的进一步改进，所述金属离子或金属盐的浓度范围为10nmol/L-50mmol/L。作为本专利技术的进一步改进，所述金属离子或金属盐的浓度范围为100nmol/L-10mmol/L。作为本专利技术的进一步改进，所述过氧化物包括过氧化氢、尿素过氧化氢、过硼酸钠中的一种或多种。作为本专利技术的进一步改进，所述荧光试剂包括鲁米诺、异鲁米诺及鲁米诺衍生物、异鲁米诺衍生物中的一种或多种。作为本专利技术的进一步改进，所述增强试剂包括对碘苯酚、对苯基苯酚、对溴苯酚中的一种或多种。本专利技术一实施例提供的技术方案如下：一种基于金属离子增强的化学发光试剂的应用，所述化学发光试剂用于进行检测过氧化物酶。作为本专利技术的进一步改进，所述过氧化物酶包括辣根过氧化物酶、和抗体偶联的辣根过氧化物酶、和蛋白或核酸偶联的辣根过氧化物酶、和生物小分子偶联的辣根过氧化物酶、和生物大分子偶联的过氧化物酶、具有过氧化物酶活性的天然或合成的分子或混合物中的一种或多种。本专利技术的有益效果是：本专利技术中通过在化学发光试剂中添加金属离子或金属盐，具有发光强度高、发光时间长的优点，有效提高了检测灵敏度，降低了检测成本；化学发光试剂可用于生物医学等领域内蛋白印迹、核酸印迹、酶联免疫检测等生化检测过程中过氧化物酶检测，也可以用于检测荧光棒等具有化学发光的玩具或装饰品。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1中A0+B、A1+B溶液发光反应刚开始时相对发光强度的对比示意图；图2为本专利技术实施例1中A0+B、A1+B溶液发光反应1小时后相对发光强度的对比示意图；图3为本专利技术实施例2中A0+B、A1+B溶液发光反应刚开始时相对发光强度的对比示意图；图4为本专利技术实施例2中A0+B、A1+B溶液发光反应1小时后相对发光强度的对比示意图。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。本专利技术公开了一种基于金属离子增强的化学发光试剂，该化学发光试剂包括过氧化物、荧光试剂、增强试剂、及金属离子或金属盐。其中，金属离子包括铜离子、镍中的一种或多种，金属盐包括硫酸铜、氯化铜、醋酸铜、氯化镍中的一种或多种。优选地，金属离子或金属盐的浓度范围为1nmol/L～0.5mol/L，较佳的浓度范围为10nmol/L-50mmol/L，最优的浓度范围为100nmol/L-10mmol/L。另外，本专利技术的化学发光试剂中，过氧化物包括过氧化氢、尿素过氧化氢、过硼酸钠等中的一种或多种；荧光试剂包括鲁米诺、异鲁米诺及鲁米诺衍生物、异鲁米诺衍生物等中的一种或多种；增强试剂包括对碘苯酚、对苯基苯酚、对溴苯酚等中的一种或多种。本专利技术还公开了一种基于金属离子增强的化学发光试剂的应用，用于进行检测过氧化物酶，其中，过氧化物酶包括辣根过氧化物酶、和抗体偶联的辣根过氧化物酶、和蛋白或核酸偶联的辣根过氧化物酶、和生物小分子偶联的辣根过氧化物酶、和生物大分子偶联的过氧化物酶、具有过氧化物酶活性的天然或合成的分子或混合物中的一种或多种。以下结合具体实施例和对比例对本专利技术作进一步说明。实施例1：配置溶液A0鲁米诺钠盐，质量分数浓度为0.01％；对碘苯酚，质量分数浓度为0.05％；用纯水配置。配置溶液A1鲁米诺钠盐，质量分数浓度为0.01％；对碘苯酚，质量分数浓度为0.05％；硫酸铜，浓度为0.3mmol/L；用纯水配置。配置溶液B过氧化氢，质量分数浓度为0.03％；缓冲试剂三羟甲基氨基甲烷Tris，浓度为50mM，pH8.5。溶液A0和B、A1和B分别等体积混合后，分别取200微升混合液，然后加入1微升经过1:1000稀释的辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG，混合后用可以检测96孔板的化学发光仪进行检测。参图1所示，在添加了硫酸铜后化学发光显著增强，参图2所示，在发光1小时后，添加了硫酸铜的发光体系仍有较强的发光，而未添加硫酸铜的发光体系发光已经相对非常微弱。实施例2：配置溶液A0异鲁米诺钠盐，质量分数浓度为0.02％；对碘苯酚，质量分数浓度为0.03％；用纯水配置。配置溶液A1异鲁米诺钠盐，质量分数浓度为0.02％；对碘苯酚，质量分数浓度为0.03％；氯化镍，浓度为0.1mmol/L；用纯水配置。配置溶液B过硼酸钠，质量分数浓度为0.02％；缓冲试剂三羟甲基氨基甲烷Tris，浓度为20mM，pH8.2。溶液A0和B、A1和B分别等体积混合后，分别取200微升混合液，然后加入1微升经过1:1000稀释的辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG，混合后用可以检测96孔板的化学发光仪进行检测。参图3所示，在添加了氯化镍后化学发光显著增强，参图4所示，在发光1小时后，添加了氯化镍的发光体系仍有较强的发光，而未添加氯化镍的发光体系发光已经相对非常微弱。由以上技术方案可以看出，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术中通过在化学发光试剂中添加金属离子或金属盐，具有发光强度高、发光时间长的优点，有效提高了检测灵敏度，降低了检测成本；化学发光试剂可用于生物医学等领域内蛋白印迹、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述化学发光试剂包括过氧化物、荧光试剂、增强试剂、及金属离子或金属盐。

【技术特征摘要】
1.一种基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述化学发光试剂包括过氧化物、荧光试剂、增强试剂、及金属离子或金属盐。2.根据权利要求1所述的基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述金属离子包括铜离子、镍中的一种或多种，金属盐包括硫酸铜、氯化铜、醋酸铜、氯化镍中的一种或多种。3.根据权利要求2所述的基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述金属离子或金属盐的浓度范围为1nmol/L～0.5mol/L。4.根据权利要求2所述的基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述金属离子或金属盐的浓度范围为10nmol/L-50mmol/L。5.根据权利要求2所述的基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，所述金属离子或金属盐的浓度范围为100nmol/L-10mmol/L。6.根据权利要求1所述的基于金属离子增强的化学发光试剂，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈幸苗，葛新建，
申请(专利权)人：上海碧云天生物技术有限公司，海门碧云天生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31