利用地沟油生物法制备法尼烯的方法技术

本发明专利技术公开了利用地沟油生物法制备法尼烯的方法，该方法过程包括：(1)地沟油与烷基醇在脂肪酶催化作用下发生酶法酯交换反应生成粗甘油和脂肪酸烷基酯，粗甘油浓度95％(w/w)左右，脂肪酸烷基酯的产率达到96％；(2)制备以粗甘油为底物发酵制备法尼烯的大肠杆菌宿主菌种子液；(3)在含有上述所述粗甘油的液态发酵液中，接种大肠杆菌宿主菌种子液，发酵培养获得法尼烯，浓度达到5.2g/L。本发明专利技术所述的方法绿色环保、反应条件温和、产率高、选择性好、能耗低，实现了地沟油资源的高效利用。

Biosynthesis of Farnenes from Ditch Oil

【技术实现步骤摘要】
利用地沟油生物法制备法尼烯的方法
本专利技术属于生物化工领域，具体地，涉及一种利用地沟油生物法制备法尼烯的方法。
技术介绍
我国地沟油(各类劣质油的通称)资源丰富，据估算，地沟油的量约占食用油总消费量的20％～30％，以我国年均消费食用油2100万吨计，则每年产生地沟油400～800万吨，易于收集作为资源利用的地沟油有400万吨左右。因含有毒素，若食用会破坏白血球和消化道黏膜，容易引起食物中毒，甚至致癌；因富含营养物质，若流向江河会造成水体营养化。地沟油若能被有效分离和收集，通过地沟油的资源化利用，不仅可以生产出可生物降解、环境友好、成本低廉的化工产品，同时也可解决对环境的危害问题。目前地沟油已在破乳剂、乳化剂、日用洗涤用品、有机肥料、涂料及润滑脂等多个领域实现资源化利用，但地沟油有效利用率仅为30％。因此，合理利用地沟油转化具有高附加值的多样化产品是提高其有效利用率和解决环境危害问题的重要途径。地沟油主要成分为甘油三酯，故利用地沟油与烷基醇进行酯交换反应来制备粗甘油和副产物脂肪酸烷基酯的方法是实现地沟油高效利用的有效途径之一。酯交换反应主要为化学法和生物酶法。化学法有能耗大、要求设本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用地沟油生物法制备法尼烯的方法；其特征是包括如下步骤：1)利用地沟油酶法制备粗甘油和副产物脂肪酸烷基酯；2)制备大肠杆菌宿主菌种子液；3)以粗甘油为底物接种大肠杆菌宿主菌种子液发酵制备法尼烯。

【技术特征摘要】
1.利用地沟油生物法制备法尼烯的方法；其特征是包括如下步骤：1)利用地沟油酶法制备粗甘油和副产物脂肪酸烷基酯；2)制备大肠杆菌宿主菌种子液；3)以粗甘油为底物接种大肠杆菌宿主菌种子液发酵制备法尼烯。2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤1)利用地沟油酶法制备粗甘油和副产物脂肪酸烷基酯方法是：在无溶剂体系或有机溶剂体系中，加入醇油摩尔比为1:1～10:1的烷基醇和地沟油，并在反应体系中加入酶含量为1％～30％wt的脂肪酶，在20～45℃、50～260rpm/min条件下，酶法酯交换反应12～48h后，静置分离获得浓度为20％～99％(w/w)的粗甘油和产率为20％～98％的副产物脂肪酸烷基酯。3.如权利要求2所述的方法，其特征是所述的地沟油是废弃动物油脂、泔水油、多次反复加热使用及从餐饮单位或者食品加工厂产生的废油脚或煎炸油的各种垃圾油的总称；所述脂肪酶包括游离脂肪酶、全细胞脂肪酶和固定化脂肪酶的多种形式。4.如权利要求1所述的方法，其特征是步骤2)制备大肠杆菌宿主菌种子液的方法是：将大肠杆菌宿主菌接种至液态种子培养液，在37℃和220rpm条件下发酵培养12h，获得大肠杆菌宿主菌种子液。5.如权利要求4所述的方法，其特征是液态种子培养液是浓度为5g/L的酵母粉、浓度为10g/L的蛋白胨、浓度为10g/L的NaCl、浓度为50mg/L的氯霉素、浓度为50mg/L的氨苄霉素和浓度为50mg/L的卡那霉素。6.如权利要求4所述的方法，其特征是所述大肠杆菌宿主菌的制备方法是往大肠杆菌通过CaCl2转化法转入质粒pTJU-1、pTJU-2和pTJU-3，并通过染色体整合敲入ackA-paraC-FG-yfcC基因片段；质粒pTJU-1以pACYCDuet-1为骨架载体、复制子为p15A复制子、启动子为T5启动子、包含乙酰乙酰基CoA硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐崴，尤生萍，吕佳佳，苏荣欣，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12