非洲防己碱的应用及药物制剂制造技术

本发明专利技术涉及制药领域，具体而言，涉及一种非洲防己碱的应用及药物制剂。该药物制剂包括治疗有效量的非洲防己碱和药学上可接受的载体。非洲防己碱能够有效激活并提升巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力，继而加速凋亡细胞的清除，同时，非洲防己碱还可以有效抑制肠炎过程中增加的MPO的活性和IL‑6的分泌，继而起到治疗结肠炎的作用。

Application of Tetrandrine in Africa and Its Pharmaceutical Preparations

【技术实现步骤摘要】
非洲防己碱的应用及药物制剂
本专利技术涉及制药领域，具体而言，涉及一种非洲防己碱的应用及药物制剂。
技术介绍
目前，在自然界中，任何动植物的生长发育、组织修复等都涉及到细胞的新生、凋亡，而若凋亡的细胞不能及时清除，则容易导致各种疾病的发生。在多种炎症性疾病如炎症性肠病过程中，凋亡细胞清除能力下降会加重病情，因此增强凋亡细胞的清除是治疗炎症性疾病的一个新策略。
技术实现思路
本专利技术提供了一种非洲防己碱的应用，其能激活并提升巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力继而可快速清除凋亡细胞，并可应用于炎症的治疗，扩大了其使用范围。本专利技术还提供了一种药物制剂，旨在改善提升凋亡细胞的清除效果，且可以治疗炎症。本专利技术是这样实现的：本专利技术提供了一种非洲防己碱作为凋亡细胞清除促进剂、在制备预防和/或治疗结肠炎损伤相关疾病的药物中的应用。本专利技术提供了一种药物制剂，其包括治疗有效量的非洲防己碱和药学上可接受的载体。本专利技术的有益效果是：本申请提供通过非洲防己碱能够有效激活并提升巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力，继而加速凋亡细胞的清除，同时，非洲防己碱还可以有效抑制肠炎动物模型中的MPO的活性，减少IL-6的分泌，继而起到治疗结肠炎的作用。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1是本专利技术实验例1提供的利用不同浓度的COL处理BMDM12小时，而后检测剩余凋亡细胞的荧光图；图2是本专利技术实验例1提供的用CMFDA标记的凋亡细胞处理24小时后对比BMDM与COL处理后BMDM的代表性荧光图像；图3是本专利技术实验例1提供的在每组24小时后吞噬不同数量的CMFDA标记的凋亡细胞的巨噬细胞的分布图；图4是本专利技术实验例1提供的CMFDA标记的凋亡细胞通过细胞吞噬进入BMDM或COL处理后BMDM的延时成像的代表性图像；图5是本专利技术实验例1提供的用pHrodo标记的凋亡细胞处理BMDM或COL处理后的BMDM，在不同时间点的代表性荧光图像；图6是本专利技术实验例1提供的不同COL处理的BMDM中不同时间点凋亡细胞的pHrodo强度的比较图；图7是本专利技术实验例2提供的不同组小鼠每日体重记录图；图8是本专利技术实验例2提供的DSS治疗后不同组(n＝8-10)的每日疾病活动指数图；图9是本专利技术实验例2提供的不同组中结肠的代表性图像；图10是本专利技术实验例2提供的不同组的结肠长度示意图；图11是本专利技术实验例2提供的不同组脾脏重量指数的比较图；图12是本专利技术实验例2提供的不同组的结肠裂解物中的髓过氧化物酶(MPO)活性比较图；图13是本专利技术实验例2提供的HE染色的结肠切片结果示意图；图14是本专利技术实验例2提供的根据HE染色结果的组织学评分图；图15是本专利技术实验例2提供的结肠蛋白裂解液中IL-6含量测定检测图；图16是本专利技术实验例2提供的不同组的结肠上TUNEL阳性细胞的代表性图像；图17是本专利技术实验例2提供的每个视野中TUNEL阳性细胞的定量图；图18为本专利技术实验例3提供的小檗碱的检测结果图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例提供一种非洲防己碱的应用及药物制剂具体说明。首先，本专利技术提供的非洲防己碱(Columbamine)，后文记为COL，其结构式如下：非洲防己碱具有异喹啉结构,其可以从小檗科植物-日本小檗、防己科植物-黄藤、罂粟科植物-博克尼木等植物中提取得到。进一步地，本专利技术中非洲防己碱是从黄连中提取得到的化合物。提取方法为现有常规的提取方法，或者直接采用成都曼思特生物科技有限公司所售化合物单体，编号A0935。进一步地，本专利技术实施例还提供一种非洲防己碱作为凋亡细胞清除促进剂的应用，优选地，凋亡细胞清除为巨噬细胞介导的凋亡细胞清除。更优选地，巨噬细胞为BMDM细胞。进一步地，本专利技术实施例还提供一种非洲防己碱在制备预防和/或治疗结肠炎损伤相关疾病的药物中的应用。且肠炎症结肠炎症与髓过氧化物酶活性提升和/或白介素-6分泌增多有关，因此其中重要指标包括髓过氧化物酶活性提升和/或白介素-6分泌增多。进一步地，本专利技术实施例还提供一种用于预防和/或治疗结肠炎损伤相关疾病的药物制剂，其包括治疗有效量的非洲防己碱和药学上可接受的载体。在细胞模型上所述非洲防己碱的治疗有效量为10M～50M，优选为20M。动物模型上所述非洲防己碱的治疗有效量为10-15mg/kg体重，优选为10mg/kg体重，且所述动物模型为小鼠建立的肠炎模型。以下结合具体实施例对本专利技术提供的一种化学激活剂及其应用进行具体说明。实施例本实施例提供一种药物制剂，其活性成分仅为非洲防己碱。该非洲防己碱从黄连中提取得到。实验例1利用实施例1的化学激活剂对巨噬细胞的吞噬作用进行检测(1)将实施例1的化学激活剂配溶于培养基中制成不同浓度的药剂(分别为1μM,5μM,10μM,20μM)，而后上述不同浓度的药剂处理BMDM12小时，而后检测剩余凋亡细胞的荧光(激发：492，发射：519)，得到比较荧光图，其中，n＝6，平均值±S.D，即图1。根据图1可知，用COL(1μM-20μM)处理后增强了BMDM对凋亡细胞的清除，并且成浓度梯度依赖性。(2)将实施例1的化学激活剂配溶于培养基中制成不同浓度的药剂(分别为1μM,5μM,10μM,20μM)，而后上述不同浓度的药剂处理BMDM24小时，而后加入CMFDA标记的凋亡细胞处理24小时，而后检测荧光图像，并检测24小时被吞噬的凋亡细胞(CMFDA标记)在巨噬细胞的分布，参见图2-图3，图2中显色部分为凋亡细胞。根据图2和图3可知，图2-3显示，COL处理后的BMDM吞噬凋亡细胞的能力显著增强，含15个凋亡细胞以上的BMDM数量在COL处理组当中数量明显增加。(3)将CMFDA标记的凋亡细胞加入囊泡正常BMDM或COL(浓度为20μM)处理的BMDM中，并形成延时成像的代表性图像，检测结果参见图4，其中，较小的圆形亮点为CMFDA染色的凋亡细胞，其它发光位置为染完Lysotracker的BMDM，且比例尺，100μm。根据图4可知，由图4可知，通过实时图像的观测显示，COL处理后的BMDM相比对照组BMDM，可以迅速的吞噬大量的凋亡细胞。(4)用浓度为10或者50μM药剂处理BMDM24小时，而后用pHrodo标记的凋亡细胞处理BMDM，并在不同时间点记录其代表性荧光图像，同时，比较不同时间点凋亡细胞的pHrodo强度，检测结果参见图5-图6，图5中比例尺，100μm，图6中平均值±S.D。图5-图6显示，在凋亡细胞处理2小时后，BMDM中的pHrodo强度持续增加。显然，COL处理的BMDM显示出更多的凋亡细胞，具有强烈的pHrodo强度发射。需要说明的是在图1和图6中，通过单向ANOVA分析来分析数据。*P<0.05，**P<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.非洲防己碱作为凋亡细胞清除促进剂的应用。

【技术特征摘要】
1.非洲防己碱作为凋亡细胞清除促进剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凋亡细胞清除为巨噬细胞介导的凋亡细胞清除。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述巨噬细胞为BMDM细胞。4.非洲防己碱在制备预防和/或治疗结肠炎损伤相关疾病的药物中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，结肠炎症是由髓过氧化物酶活性提升和/或白介素-6分泌增多而引起的炎症。6.一种用于预防和/或治疗结肠炎损伤相关疾病的药物制剂，其特征在于，包括治疗有效量的非洲防己碱和药...

【专利技术属性】
技术研发人员：路嘉宏，巫明月，
申请(专利权)人：澳门大学，
类型：发明
国别省市：中国澳门,82