纳米磷光探针及其用途制造技术

本发明专利技术涉及酶活检测技术领域，尤其涉及纳米磷光探针及其用途。本发明专利技术的纳米磷光探针探针利用铱金属配位化合物、金纳米颗粒分别作为能量共振转移的荧光供体和受体，通过一段能被目的蛋白酶特异性识别和降解的多肽底物连接，并产生FRET现象。与传统的线性荧光探针分子相比，在纳米金的搭载下，实现了探针分子的高局部浓度富集，快速入胞等特有的检测优势，大大提升该酶活检测探针在活细胞水平进行实时酶活监测的适应性。

Nanometer Phosphorescent Probe and Its Application

【技术实现步骤摘要】
纳米磷光探针及其用途
本专利技术涉及酶活检测
，尤其涉及纳米磷光探针及其用途。
技术介绍
蛋白质是生命活动的主要承担者，在新陈代谢和信号转导的过程中扮演着极其重要的角色。酶，是指具有高效催化功能的有机物，大部分是蛋白质，也有少数是具有生物催化功能的RNA分子。蛋白酶可以水解蛋白质或肽链。在哺乳动物细胞内，运作着复杂的信号通路系统，并以此调控各项生命活动的有序进行。信号通路的激活与抑制，都与处于信号转导过程中关键位点的蛋白酶的产生与活化有着密切的关系。因此，特征蛋白酶的激活可以作为多种疾病的发生和发展进程的关键标志，日益成为病程诊断和药物作用机理研究中的关键检测指标。目前，酶活性检测的方法大多局限于体外实验，须先将待测样本提取后在试管中进行活性测定。对于细胞内部的蛋白酶而言，不但无法对其酶活性进行实时的原位检测，样品的提取过程还有可能会对酶活性造成影响。因此，让酶活性检测突破“试管测试”的限制，让检测探针进入细胞，实现在活细胞水平的酶活性可视化实时检测，是新一代蛋白酶活性检测探针设计与研发的重要课题。在众多酶活性检测方法中，应用的最为广泛的是基于“荧光分子-淬灭剂”组合的酶活性检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.纳米磷光探针，由金纳米球、功能基团、铱金属配合物和末端含有巯基的聚合物组成；所述功能基团由巯基丙酸和含有酶反应底物的复合物组成；所述金纳米球与铱金属配合物通过功能基团连接；其中金纳米球与所述巯基丙酸以金硫键连接；所述巯基丙酸与含有酶反应底物的复合物以酰胺键连接；所述含有酶反应底物的复合物与铱金属配合物配位连接；所述金纳米球与末端含有巯基的聚合物通过金硫键连接。

【技术特征摘要】
1.纳米磷光探针，由金纳米球、功能基团、铱金属配合物和末端含有巯基的聚合物组成；所述功能基团由巯基丙酸和含有酶反应底物的复合物组成；所述金纳米球与铱金属配合物通过功能基团连接；其中金纳米球与所述巯基丙酸以金硫键连接；所述巯基丙酸与含有酶反应底物的复合物以酰胺键连接；所述含有酶反应底物的复合物与铱金属配合物配位连接；所述金纳米球与末端含有巯基的聚合物通过金硫键连接。2.根据权利要求1所述的纳米磷光探针，其特征在于，所述金纳米球的直径为15～25nm；所述铱金属配合物具有520nm吸收峰。3.根据权利要求1或2所述的纳米磷光探针，其特征在于，所述含有酶反应底物的复合物由间隔序列1、酶反应底物、间隔序列2组成；所述间隔序列1和间隔序列2为多肽序列，所述酶反应底物为多肽或核酸。4.根据权利要求1～3任一项所述的纳米磷光探针，其特征在于，所述末端含有巯基的聚合物为巯基聚乙二醇、巯基聚乳酸或巯基聚醚酰亚胺。5.根据权利要求1～4任一项所述的纳米磷光探针，其特征在于，所述功能基团与所述末端含有巯基的聚合物的摩尔比为(1～9):(1～9)；所述金纳米球与功能基团的摩尔比为1：(30～40)。6.权利要求1～5任一项所述纳米磷光探针的制备方法，包括：柠檬酸钠还原法制备金纳米球；以末端含有巯基的聚合物和巯基丙酸修饰金纳米球，制得中间体A；ED...

【专利技术属性】
技术研发人员：马晓川，崇羽，方舸，葛翠翠，肖粲然，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32