【技术实现步骤摘要】
一种基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法及探针
本专利技术涉及分子生物
，具体涉及一种基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法及探针。
技术介绍
CRISPR/Cas系统是目前发现存在于大多数细菌与所有的古菌中的一种免疫系统，被用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。在CRISPR/Cas系统中，CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats)的简称，涉及细菌基因组中的独特DNA区域，也是储存病毒DNA片段从而允许细胞能够识别任何试图再次感染它的病毒的地方，CRISPR经转录产生的RNA序列识别入侵性病毒的遗传物质。Cas是CRISPR相关蛋白(CRISPR-associatedproteins,Cas)的简称，Cas蛋白像一把分子剪刀那样切割细菌基因组上的靶DNA。CRISPR-Cas系统是古菌和细菌的抵抗病毒和质粒侵染的重要免疫防御系统。CRISPR-Cas系统划分为两大类，第一大类CRISPR-Cas系统由...
【技术保护点】
1.一种基于CRISPR‑Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，该方法用于非诊断目的的检测，该方法的检测体系中含有：crRNA、Cas13a、探针；所述的crRNA包含针对目的基因的靶点设计的向导序列；所述的Cas13a通过所述的crRNA识别目的基因上的靶点后，能够激活Cas13a的RNA酶活性，并对所述的探针进行切割，从而获得检测信号；该方法的特征在于：所述的探针包含1段RNA序列，该RNA序列的两端分别连接1段DNA序列；所述探针上的核苷酸均进行硫代磷酸骨架的修饰，以在相邻核苷酸之间形成硫代磷酸酯键；所述RNA序列上的若干个核苷酸还进行了二甲氧基修饰，并且，所述的R...
【技术特征摘要】
1.一种基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，该方法用于非诊断目的的检测，该方法的检测体系中含有：crRNA、Cas13a、探针；所述的crRNA包含针对目的基因的靶点设计的向导序列；所述的Cas13a通过所述的crRNA识别目的基因上的靶点后，能够激活Cas13a的RNA酶活性，并对所述的探针进行切割，从而获得检测信号；该方法的特征在于：所述的探针包含1段RNA序列，该RNA序列的两端分别连接1段DNA序列；所述探针上的核苷酸均进行硫代磷酸骨架的修饰，以在相邻核苷酸之间形成硫代磷酸酯键；所述RNA序列上的若干个核苷酸还进行了二甲氧基修饰，并且，所述的RNA序列上至少含有两个连续的未进行二甲氧基修饰的核苷酸。2.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，其特征在于，所述的DNA序列含有6个脱氧核糖核苷酸。3.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，其特征在于，所述的RNA序列含有为8-12个核糖核苷酸。4.根据权利要求3所述的基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，其特征在于，所述的RNA序列中，进行了二甲氧基修饰的核苷酸的个数为4个。5.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas13a的特异性核酸片段的检测方法，其特征在于，所述探针的序列为：ATCTTCGUCGCCCUGGCAT...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡微菁，孙子豪，
申请(专利权)人：常州桐树生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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