一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达α‑L‑鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程技术与生物医药领域。将编码序列为SEQ ID NO.2所述序列在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达，用0.5μmol/L IPTG进行诱导并获得活力为5.6U/L的重组鼠李糖苷水解酶。该重组酶具有特异性水解芦丁、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷以及朝藿定C鼠李糖苷的活性。重组酶添加量为460U/L时，90min内完全催化水解1g/L的朝藿定C生成唯一产物淫羊藿苷。

A recombinant E.coli expressing a-L-rhamnosidase and its application

【技术实现步骤摘要】
一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用
本专利技术涉及一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程及生物医药

技术介绍
α-L-鼠李糖苷酶(EC3.2.1.40)是一种能够特异性地水解鼠李糖苷键的水解酶，在自然界中分布广泛。该酶能够专一、高效地水解多种存在α-鼠李糖苷键的糖苷类物质，如柚皮苷(naringin)、芦丁(rutin)、橙皮苷(hesperidin)以及朝藿定C(epimedinC)等，释放鼠李糖。α-L-鼠李糖苷酶主要来源于微生物，在细菌(芽胞杆菌属、乳杆菌属、单胞菌属等)以及真菌(曲霉、木酶、青霉等)中均有多种α-L-鼠李糖苷酶被报道过。α-L-鼠李糖苷酶被广泛地运用在食品、医药等领域。食品工业中，α-L-鼠李糖苷酶是柚苷酶和橙皮苷酶的主要活性成分，能够有效地除去柑橘类果汁中存在的苦味，并且能够改善和提升酿酒过程中的香气，α-L-鼠李糖苷酶的应用极大地提升了软硬饮料的品质。医疗与保健领域中，许多黄酮类化合物的生物利用度受到糖苷键的影响，通过利用α-L-鼠李糖苷酶对黄酮芸香糖苷进行水解，增加了黄酮类葡萄糖苷含量，更利于生物活性物质的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，表达了α‑L‑鼠李糖苷酶，所述α‑L‑鼠李糖苷酶含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，表达了α-L-鼠李糖苷酶，所述α-L-鼠李糖苷酶含SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。2.如权利要求1的重组大肠杆菌，其特征在于，以pET系列载体为表达载体。3.如权利要求1或2的重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主。4.如权利要求1-3任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，编码上述α-L-鼠李糖苷酶的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。5.权利要求1-4任一所述的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(...

【专利技术属性】
技术研发人员：周景文，陈坚，吕云斌，曾伟主，堵国成，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32