抗IL1-RAP抗体制造技术

本文中提供了抗体特异性的IL1‑RAP。

Anti-IL1-RAP antibody

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗IL1-RAP抗体相关申请的交叉引用本申请要求于2016年10月16日递交的美国临时申请第62/408,807号、于2016年11月23日递交的美国临时申请第62/425,970号和于2017年10月10日递交的国际申请第PCT/US2017/055994号的递交日期的权益，所有这些申请均通过引用整体并入本文。
技术介绍
白介素-1(IL1)是免疫系统介导的急性和慢性炎症反应的关键调节因子。白介素-1受体辅助蛋白(IL1-RAP，亦称IL-1R3)是在IL1受体信号传导复合物中发挥功能的IL1的共受体，且在一些情形下对于将细胞膜事件与下游信号传导通路连接是必要的。IL-1诱导感染、组织损伤和压力期间急性期和促炎性蛋白的合成，在哺乳动物免疫中起着重要作用。IL1-RAP也表达于癌细胞和癌症干细胞(“CSC”)上，这些细胞为能够产生额外的癌细胞的细胞。特别地，IL1-RAP在CSC中高度表达，后者在具有不良预后的急性髓细胞性白血病(AML)和骨髓增生异常综合症(MDSs)中普遍存在。因此，IL1-RAP被提议作为有前景的靶标。Barreyroetal.,Blood2012；120(6):1290-1298。化疗的一个主要的局限为抗癌药物普遍不能区分正常细胞和癌细胞。抗肿瘤剂的主要类群的几乎所有成员对正常细胞均具有相当的毒性。特异性靶向癌细胞的组合物可以避免这一问题。然而，现有的癌症治疗并不靶向CSC。由于这一原因，现有的化疗策略即使在特异性递送至癌细胞时，并不有效清除癌症。复发的风险仍然存在，因为存活的CSC能够产生新的癌细胞。通过差异性地靶向患病组织，抗体提供了相当的治疗机会，以改善靶向的患病的和非患病的组织之间的区分。US2015/0315279涉及结合人IL1RAP的细胞外膜-锚定-近侧区的抗ILRAP抗体。专利技术概述在一个方面，本文中提供了分离的抗IL1-RAP抗体，其包含可变的轻链和可变的重链，其中：a)所述可变的轻链包含这样的序列，其与选自以下的鼠抗体轻链序列具有至少90％的序列同一性：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2；和/或b)所述可变的重链包含这样的序列，其与选自以下的鼠抗体重链序列具有至少90％的序列同一性：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2。在一个实施方案中，所述抗体以相比其结合可溶性IL1-RAP更大的亲和力(例如，至少大2倍、5倍、10倍或100倍的亲和力中的任一个)结合受体IL1-RAP。在另一个实施方案中，所述序列同一性为至少95％、96％、97％、98％或99％。在另一个方面，本文中提供了抗IL1-RAP抗体，其包含可变的轻链和可变的重链，其中：a)所述可变的轻链包含这样的序列，其具有与选自以下的抗体的鼠抗体轻链CDRL1、CDRL2和CDRL3序列具有至少95％的序列同一性的CDRL1、CDRL2和CDRL3：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2；和/或b)所述可变的重链包含这样的序列，其具有与选自以下的抗体的鼠抗体重链CDRH1、CDRH2、CDRH3序列具有至少95％的序列同一性的CDRH1、CDRH2、CDRH3：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2，其中所述抗体以相比其结合可溶性IL1-RAP更大的亲和力(例如，至少大2倍、5倍、10倍或100倍的亲和力中的任一个)结合受体IL1-RAP。在一个实施方案中，所述CDRL1、CDRL2、CDRL3、CDRH1、CDRH2和CDRH3具有来自选自以下的抗体的序列：在另一个方面，提供了(任选地分离的)抗IL1-RAP抗体，其包含：(1)包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，和(2)包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区，其中所述CDRL1具有这样的序列，其与RASQSVSTSGYSSMH(SEQIDNO:10)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)，所述CDRL2具有这样的序列，其与YASDLES(SEQIDNO:11)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)，所述CDRL3具有这样的序列，其与HHSWGIPMYT(SEQIDNO:12)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)，所述CDRH1具有这样的序列，其与GYIFITY(SEQIDNO:7)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)，所述CDRH2具有这样的序列，其与FPASGT(SEQIDNO:8)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)，并且所述CDRH3具有这样的序列，其与TDFYRYDGGYALDY(SEQIDNO:9)的序列具有至少90％的序列同一性(例如，相比其具有0、1或2个保守的或非保守的氨基酸取代)。在本方面的一些实施方案中，所述分离的抗体的CDRL1具有RASQSVSTSGYSSMH(SEQIDNO:10)的序列，所述分离的抗体的CDRL2具有YASDLES(SEQIDNO:11)的序列，所述分离的抗体的CDRL3具有HHSWGIPMYT(SEQIDNO:12)的序列，所述分离的抗体的CDRH1具有GYIFITY(SEQIDNO:7)的序列，所述分离的抗体的CDRH2具有FPASGT(SEQIDNO:8)的序列，并且所述分离的抗体CDRH3具有TDFYRYDGGYALDY(SEQIDNO:9)的序列。在本方面的一些实施方案中，所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与DIVLTQSPISLAVFLGQRATISCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKAGQPPKLLIKYASDLESGVPVRFSGSGSGTDFILNIHPVEVEDIATYYCHHSWGIPMYTFGGGTKLEIKR(SEQIDNO:5)的序列具有至少90％(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％或100％)的序列同一性。在本方面的一些实施方案中，所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKPGKAPKLLIYYAS本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的抗IL1‑RAP抗体，其包含可变的轻链和可变的重链，其中：a)所述可变的轻链包含与选自以下的鼠抗体轻链序列具有至少90％的序列同一性的序列：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2；和/或b)所述可变的重链包含与选自以下的鼠抗体重链序列具有至少90％的序列同一性的序列：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.10.16 US 62/408,807;2016.11.23 US 62/425,970;1.分离的抗IL1-RAP抗体，其包含可变的轻链和可变的重链，其中：a)所述可变的轻链包含与选自以下的鼠抗体轻链序列具有至少90％的序列同一性的序列：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2；和/或b)所述可变的重链包含与选自以下的鼠抗体重链序列具有至少90％的序列同一性的序列：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2。2.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体以相比其结合可溶性IL1-RAP更大的亲和力(例如，至少大2倍、5倍、10倍或100倍的亲和力中的任一个)结合受体IL1-RAP。3.如权利要求1所述的抗体，其中所述序列同一性为至少95％、96％、97％、98％或99％。4.抗IL1-RAP抗体，其包含可变的轻链和可变的重链，其中：a)所述可变的轻链包含具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的序列，所述CDRL1、CDRL2和CDRL3与选自以下的抗体的鼠抗体轻链CDRL1、CDRL2和CDRL3序列具有至少95％的序列同一性：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2；和/或b)所述可变的重链包含具有CDRH1、CDRH2、CDRH3的序列，所述CDRH1、CDRH2、CDRH3与选自以下的抗体的鼠抗体重链CDRH1、CDRH2、CDRH3序列具有至少95％的序列同一性：54.9D7、56.12G6、2H8、50.3G7、54.15B5、42.1D3、54.8H8、54.9E9、50.6C12、57.7A9、46.8G1、42.3G6、46.1D2、41.10C2、46.2C2、44.5D2，其中所述抗体以相比其结合可溶性IL1-RAP更大的亲和力(例如，至少大2倍、5倍、10倍或100倍的亲和力中的任一个)结合受体IL1-RAP。5.如权利要求3所述的抗体，其中所述CDRL1、CDRL2、CDRL3、CDRH1、CDRH2和CDRH3具有来自选自以下的抗体的序列：6.分离的抗IL1-RAP抗体，其包含：(1)包含CDRL1、CDRL2和CDRL3的轻链可变区，和(2)包含CDRH1、CDRH2和CDRH3的重链可变区，其中所述CDRL1具有这样的序列，其与RASQSVSTSGYSSMH(SEQIDNO:10)的序列具有至少90％的序列同一性，所述CDRL2具有这样的序列，其与YASDLES(SEQIDNO:11)的序列具有至少90％的序列同一性，所述CDRL3具有这样的序列，其与HHSWGIPMYT(SEQIDNO:12)的序列具有至少90％的序列同一性，所述CDRH1具有这样的序列，其与GYIFITY(SEQIDNO:7)的序列具有至少90％的序列同一性，所述CDRH2具有这样的序列，其与FPASGT(SEQIDNO:8)的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述CDRH3具有这样的序列，其与TDFYRYDGGYALDY(SEQIDNO:9)的序列具有至少90％的序列同一性。7.如权利要求6所述的分离的抗体，其中所述CDRL1具有RASQSVSTSGYSSMH(SEQIDNO:10)的序列，所述CDRL2具有YASDLES(SEQIDNO:11)的序列，所述CDRL3具有HHSWGIPMYT(SEQIDNO:12)的序列，所述CDRH1具有GYIFITY(SEQIDNO:7)的序列，所述CDRH2具有FPASGT(SEQIDNO:8)的序列，并且所述CDRH3具有TDFYRYDGGYALDY(SEQIDNO:9)的序列。8.如权利要求6或7所述的分离的抗体，其中所述轻链可变区具有这样的序列，其与DIVLTQSPISLAVFLGQRATISCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKAGQPPKLLIKYASDLESGVPVRFSGSGSGTDFILNIHPVEVEDIATYYCHHSWGIPMYTFGGGTKLEIKR(SEQIDNO:5)的序列具有至少90％的序列同一性。9.如权利要求6或7所述的分离的抗体，其中所述轻链可变区具有这样的序列，其与DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKPGKAPKLLIYYASDLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCHHSWGIPMYTFGQGTKLEIKR(SEQIDNO:115)的序列具有至少90％的序列同一性。10.如权利要求6或7所述的分离的抗体，其中所述轻链可变区具有这样的序列，其与DIQLTQSPSSLSASVGDRATITCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKPGKAPKLLIYYASDLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSVQPEDFATYYCHHSWGIPMYTFGQGTKLEIKR(SEQIDNO:116)的序列具有至少90％的序列同一性。11.如权利要求6或7所述的分离的抗体，其中所述轻链可变区具有这样的序列，其与DIQLTQSPSSLSASVGDRATITCRASQSVSTSGYSSMHWYQQKPGKAPKLLIKYASDLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSVQPEDFATYYCHHSWGIPMYTFGQGTKLEIKR(SEQIDNO:117)的序列具有至少90％的序列同一性。12.如权利要求6-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述重链可变区具有这样的序列，其与HVQLQQSGPELVRPGASVKLSCKASGYIFITYWMNWVKQRPGQGLEWVGQIFPASGTTYYNELFEGKATLTVDTSSNTAYMHLTSLTSEDSAVYYCARTDFYRYDGGYALDYWGQGTSLTVSS(SEQIDNO:6)的序列具有至少90％的序列同一性。13.如权利要求6-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述重链可变区具有这样的序列，其与QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFITYWMNWVRQAPGQGLEWMGQIFPASGTTYYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARTDFYRYDGGYALDYWGQGTLVTVSS(SEQIDNO:118)的序列具有至少90％的序列同一性。14.如权利要求6-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述重链可变区具有这样的序列，其与QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFITYWMNWVRQAPGQGLEWVGQIFPASGTTYYAQKFQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARTDFYRYDGGYALDYWGQGTLVTVSS(SEQIDNO:119)的序列具有至少90％的序列同一性。15.如权利要求6-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述重链可变区具有这样的序列，其与QVQLVQSGAEVKKPGASVKLSCKASGYIFITYWMNWVRQAPGQGLEWVGQIFPASGTTYYAQKFQGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARTDFYRYDGGYALDYWGQGTLLTVSS(SEQIDNO:120)的序列具有至少90％的序列同一性。16.如权利要求6-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述重链可变区具有这样的序列，其与EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYIFITYWMNWVRQAPGQGLEWVGQIFPASGTTYYAQKFQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARTDFYRYEGGYALDYWGQGTLVTVSS(SEQIDNO:121)的序列具有至少90％的序列同一性。17.分离的抗IL1-RAP抗体，其包含轻链可变区和重链可变区，其中所述轻链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:5和115-117中的任一个的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述重链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:6和118-121中的任一个的序列具有至少90％的序列同一性。18.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:5和115-117中的任一个的序列，并且所述分离的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:6和118-121中的任一个的序列。19.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:5的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述分离的抗体的重链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:6的序列具有至少90％的序列同一性。20.如权利要求19所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:5的序列，并且所述分离的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:6的序列。21.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:117的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述分离的抗体的重链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:118的序列具有至少90％的序列同一性。22.如权利要求21所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:117的序列，并且所述分离的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:118的序列。23.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:117的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述分离的抗体的重链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:119的序列具有至少90％的序列同一性。24.如权利要求23所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:117的序列，并且所述分离的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:119的序列。25.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述分离的抗体的轻链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:117的序列具有至少90％的序列同一性，并且所述分离的抗体的重链可变区具有这样的序列，其与SEQIDNO:120的序列具有至少90％的序列同一性...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋英萍，杰格塔·R·祖奴图拉，伦纳德·G·普雷斯塔，
申请(专利权)人：塞勒兰特治疗公司，
类型：发明
国别省市：美国,US