一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用制造技术

本发明专利技术为一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用，提供了一种利用大肠杆菌E.coli BL21表达重组磷脂酶D并利用其产生磷脂酰丝氨酸的方法。该方法包括对重组质粒pET‑28a(+)‑sspld的构建、重组质粒转化至E.coli BL21及利用重组菌催化产生磷脂酰丝氨酸。重组菌株可成功表达磷脂酶D，酶活达到17.07U/mL。通过诱导条件优化，重组菌酶活最高可达38.58U/mL。经HPLC检测，该酶具有良好的转磷脂酰基能力，能以卵磷脂和L‑丝氨酸为底物合成产物磷脂酰丝氨酸，转化率可达28％，产量达到1.34g/L。该重组磷脂酶D发酵周期短，催化性能良好，为其实际应用奠定了基础。

A Coding Gene of Phospholipase D and Its Expression and Application

【技术实现步骤摘要】
一种磷脂酶D的编码基因及其表达和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种磷脂酶D的编码基因及其重组表达和在磷脂酰丝氨酸合成中的应用。
技术介绍
磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)于1942年由JordiFloch首次提取出来，其提取来源为牛脑，随后对其进行了分子结构的定性分析[FOLCHJ.JournalofBiologicalChemistry,1942,146:35-44]。它是磷脂中一种能够调控膜蛋白功能状态的磷脂[冯雷刚等.食品研究与开发,2006,27(9):191-193]，其在细胞膜的磷脂双分子层中占有10％-20％。近年来，磷脂酰丝氨酸广泛应用于医疗、保健行业，主要用于治疗脑衰老和修复脑损伤，且疗效显著，更是作为“脑专一性营养物质”而备受关注[BIRGERB,etal.CellDeath&Differentiation,2016,23(6):962-978]。随着研究的不断深入，除了其营养价值外，许多其他的用途和功能也逐渐被发现。磷脂酰丝氨酸主要具有以下功能：(1)改善记忆力，缓解脑疲劳，治疗老年痴呆；(2)修复大脑损伤，治疗儿童本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷脂酶D，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种磷脂酶D，其特征在于：其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种编码权利要求1所述的磷脂酶D的基因序列，其特征在于：其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.包含SEQIDNO.2所示核苷酸序列的重组表达载体、转基因细胞系统或转基因重组菌。4.一种表达磷脂酶D的重组质粒，其特征在于：包括权利要求2所述的基因序列，所用质粒为pET-28a，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。5.一种表达磷脂酶D的重组菌株，其特征在于：所述重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚劲松，史劲松，许正宏，侯海娟，陈杰鹏，段丽丽，
申请(专利权)人：江南大学，广东双骏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32