一种测定血浆中头孢克洛的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定血浆中头孢克洛的方法，包括以下步骤：储备液的配制、工作液的配制、标准曲线和质控样本的配制、内标工作液的配制、样品预处理方法和LC‑MS/MS分析；该方法可用于头孢克洛制剂生物等效性的研究，可用于EDTA‑K2抗凝人血浆中头孢克洛浓度定量分析，与HPLC法相比，本法更为灵敏，头孢克洛的定量下限从0.1mg/mL降低到了0.050mg/mL，本法采用蛋白沉淀法处理样本，操作方便，无基质效应，持续进样240针不影响测定分析的准确度，同时分析时间大为缩短。

A method for determination of cefaclor in plasma

【技术实现步骤摘要】
一种测定血浆中头孢克洛的方法
本专利技术涉及生物医药
，具体为一种测定血浆中头孢克洛的方法。
技术介绍
头孢克洛（商品名：新达罗）为广谱半合成头孢菌素类抗生素，其抗菌作用机制与其他头孢菌素类药相似，主要通过与细菌细胞内的青霉素结合蛋白（PBPs）结合，抑制细菌细胞壁的生物合成而起杀菌作用。目前，药物药代动力学以及生物等效性的研究均通过测定药物的药动学参数来评价，因此，血浆中头孢克洛的浓度测定对于头孢克洛新药开发显得极为重要，头孢克洛在健康人血浆中极不稳定，因此很难准确测定其浓度，目前，能准确测定人血浆中头孢克洛血药浓度的定量分析方法主要以HPLC和LC-MS/MS法为主。HPLC法和LC-MS/MS法测定人血浆中头孢克洛的浓度均有报道，但这些方法要么灵敏度低、分析时间长、要么用样量多、线性范围窄、存在基质效应，无法满足大批量样本生物分析的需要，LC-MS/MS法由于具有特异性好和灵敏度高等诸多优点，是小分子药物生物分析的首选方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种测定血浆中头孢克洛的方法，以解决
技术介绍
提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种测定血浆中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定血浆中头孢克洛的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：储备液的配制：用乙酸：水（5：95，v：v）作为稀释液溶解头孢克洛对照品，得浓度为400μg/mL的头孢克洛标准曲线储备液（STD Stock‑TBKL）和头孢克洛质控储备液（QC Stock‑TBKL）；S2：工作液的配制：标准曲线工作液以STD Stock‑TBKL为起始溶液，以乙酸：水（5：95，v：v）溶液为稀释溶剂逐级稀释得到头孢克洛的各级标准曲线工作液；质控工作液以QC Stock‑TBKL为起始溶液，以乙酸：水（5：95，v：v）溶液为稀释溶剂逐级稀释得到头孢克洛的各级质控工作液；S3：标准曲线和质控样本的配制：吸...

【技术特征摘要】
1.一种测定血浆中头孢克洛的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：储备液的配制：用乙酸：水（5：95，v：v）作为稀释液溶解头孢克洛对照品，得浓度为400μg/mL的头孢克洛标准曲线储备液（STDStock-TBKL）和头孢克洛质控储备液（QCStock-TBKL）；S2：工作液的配制：标准曲线工作液以STDStock-TBKL为起始溶液，以乙酸：水（5：95，v：v）溶液为稀释溶剂逐级稀释得到头孢克洛的各级标准曲线工作液；质控工作液以QCStock-TBKL为起始溶液，以乙酸：水（5：95，v：v）溶液为稀释溶剂逐级稀释得到头孢克洛的各级质控工作液；S3：标准曲线和质控样本的配制：吸取95%体积的EDTA-K2抗凝人空白血浆，加入5%体积上述各浓度的工作液，再加入10%体积的乙酸：水（10：90，v：v）酸化含药血浆，得到酸化的曲线样本和质控样本；S4：内标工作液的配制：用乙酸：水（5：95，v：v）作为稀释液头孢克洛-d5对照品，的到浓度为2mg/mL头孢克洛-d5内标工作液；S5：样品预处理方法：取酸化血样（每200mL含药血浆加入乙酸：水（7.5：92.5，v：v）20mL）50mL于96孔板中，加入30mL内标工作液，加入含0.1%甲酸的甲醇450mL，涡旋10min，高速离心15分钟，取上清50mL于另一96深孔板中，再加入450mL的0.1%甲酸水稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文伟，
申请(专利权)人：武汉伯瑞恒医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42