抗PD-L1/VEGF双功能抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了一种抗PD‑L1/VEGF双特异性抗体及其用途，具体地，本发明专利技术提供一种双功能抗体，包括：(a)抗PD‑L1的抗体或元件；和(b)与所述抗PD‑L1的抗体或元件相连接的抗VEGF的抗体或元件。本发明专利技术的双功能抗体可同时与VEGF及PD‑L1结合，从而发挥对VEGF和PD‑L1阳性的肿瘤细胞(尤其是恶性肿瘤细胞)的治疗作用。

【技术实现步骤摘要】
抗PD-L1/VEGF双功能抗体及其用途
本专利技术属于肿瘤免疫学领域，具体地，涉及抗PD-L1/VEGF双功能抗体及其用途。
技术介绍
肿瘤(tumour)根据新生物的细胞特性及对机体的危害性程度，可分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类；其中恶性肿瘤疾病是当今社会上危害人类健康的重大疾病，致死程度高居第二，常见肿瘤有肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌等。据报道，2018年全球有大约1810万癌症新发病例和960万癌症死亡病例(剔除非黑色素瘤皮肤癌后分别为1700万和950万)，其中新增1810万癌症病例中，亚洲占据近一半，960万癌症死亡患者中，亚洲占近七成。恶性肿瘤由于其个体差异，一般会对大部分患者进行综合治疗，即综合采用手术、化疗、放疗、免疫治疗、中医中药治疗、介入治疗、微波治疗等手段，以期较大幅度地提高治愈率，并改善患者的生活质量。其中免疫治疗(immunotherapy)是指针对机体低下或亢进的免疫状态，人为地增强或抑制机体的免疫功能以达到治疗疾病目的的治疗方法。免疫治疗的方法有很多，适用于多种疾病的治疗。肿瘤的免疫治疗旨在激活人体免疫系统，依靠自身免疫机能杀灭癌细胞和肿瘤组织，从而控制与清除肿瘤的一种治疗方法。与以往的手术、化疗、放疗和靶向治疗不同的是，免疫治疗针对的靶标不是肿瘤细胞和组织，而是人体自身的免疫系统。包括单克隆抗体类免疫检查点抑制剂、治疗性抗体、癌症疫苗、细胞治疗和小分子抑制剂等。近几年，肿瘤免疫治疗的好消息不断，目前已在多种肿瘤如黑色素瘤，非小细胞肺癌、肾癌和前列腺癌等实体瘤的治疗中展示出了强大的抗肿瘤活性，多个肿瘤免疫治疗药物已经获得美国FDA(FoodandDrugAdministration,FDA)批准临床应用。目前上市在售的抗体药物多为单克隆抗体，治疗性单克隆抗体已被用于治疗癌症、自身免疫病、炎症和其他疾病，多数是针对一个靶标的特异性。然而，病人接受单克隆抗体治疗可能产生耐药性或无应答。并且有些疾病在体内的影响因素是多方面的，包括不同的信号通路、不同的细胞因子和受体的调节机制等，单一靶点的免疫疗法似乎并不足以摧毁癌细胞。因此，需要通过组合不同的药物，或是使用多特异性抗体的多重靶向策略来实现。双功能抗体虽然是抗体药物研发的方向，但面临诸多挑战，比如临床前评价模型、表达量低、稳定性差、工艺复杂、质控差异性大等问题，因此一直以来双功能抗体的研发困难重重。因此，本领域迫切开发一种特异性佳、疗效好且易于制备的抗肿瘤双抗。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种结构稳定、特异性佳且易于制备的抗肿瘤双抗。本专利技术的第一方面，提供了一种双功能抗体，所述双功能抗体包括：(a)抗PD-L1的抗体或元件；和(b)与所述抗PD-L1的抗体或元件相连接的抗VEGF的抗体或元件。在另一优选例中，所述抗PD-L1的抗体或元件和所述抗VEGF的抗体或元件通过连接肽相连。在另一优选例中，所述连接肽包括抗体恒定区序列。在另一优选例中，所述抗VEGF的抗体或元件连接到所述抗PD-L1的抗体的选自下组的区域：重链可变区、重链恒定区、轻链可变区、或其组合。在另一优选例中，所述抗VEGF的抗体或元件连接到所述抗PD-L1的抗体的重链可变区的起始端。在另一优选例中，所述抗VEGF的抗体或元件连接到所述抗PD-L1的抗体的重链恒定区的末端。在另一优选例中，所述抗PD-L1的抗体或元件连接到所述抗VEGF的抗体的选自下组的区域：重链可变区、重链恒定区、轻链可变区、或其组合。在另一优选例中，所述抗PD-L1的抗体或元件连接到所述抗VEGF的抗体的重链可变区的起始端。在另一优选例中，所述抗PD-L1的抗体或元件连接到所述抗VEGF的抗体的重链恒定区的末端。在另一优选例中，所述的元件包括配体、受体或蛋白的胞外区。在另一优选例中，所述的抗PD-L1的抗体选自下组：纳米抗体、单链抗体、双链抗体。在另一优选例中，所述的抗PD-L1的抗体选自下组：动物源抗体(如鼠源抗体)、嵌合抗体、人源化抗体。在另一优选例中，所述的人源化抗体包括全人源化抗体。在另一优选例中，所述的抗PD-L1的元件包括PD-L1的受体(如PD-1)或蛋白的胞外区。在另一优选例中，所述的抗VEGF的抗体选自下组：纳米抗体、单链抗体、双链抗体。在另一优选例中，所述的抗VEGF的抗体选自下组：动物源抗体(如鼠源抗体)、嵌合抗体、人源化抗体。在另一优选例中，所述的抗VEGF的元件包括VEGF的受体(如VEGFR)或蛋白的胞外区。在另一优选例中，所述的抗VEGF的抗体或元件是单价形式的或多价形式的(如二价形式)。在另一优选例中，所述双功能抗体中，所述的抗VEGF的抗体或元件的数量为1-6，较佳地，1-4。在另一优选例中，所述双功能抗体为同源二聚体。在另一优选例中，所述双功能抗体从N端到C端具有式I所示的结构：其中，D各自独立地为无或抗VEGF的抗体或元件，且至少一个D为抗VEGF的抗体或元件；L1、L2、L3、L4、L5、L6各自独立地为键或接头元件；VL代表抗PD-L1抗体的轻链可变区；CL代表抗PD-L1抗体的轻链恒定区；VH代表抗PD-L1抗体的重链可变区；CH代表抗PD-L1抗体的重链恒定区；“～”代表二硫键或共价键；“-”代表肽键；其中，所述双功能抗体具有同时结合PD-L1以及结合VEGF的活性。在另一优选例中，式I中的D均各自独立地为无或抗VEGF的元件，且至少一个D为抗VEGF的元件。在另一优选例中，所述接头元件可以相同或不相同。在另一优选例中，所述L1、L2、L3、L4、L5或L6各自独立地选自GS、GGGGS(SEQIDNO.:14)、GGGGSGGGS(SEQIDNO.:15)、GGSGGSGGSGGSGGS(SEQIDNO.:16)。在另一优选例中，所述的抗PD-L1抗体的重链可变区(VH)包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:3所示的CDR1，SEQIDNO.:4所示的CDR2，和SEQIDNO.:5所示的CDR3；和/或所述的抗PD-L1抗体的轻链可变区(VL)包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:6所示的CDR1’，氨基酸序列为GIS的CDR2’，和SEQIDNO.:7所示的CDR3’。在另一优选例中，所述的抗PD-L1抗体的重链可变区(VH)具有如SEQIDNO.:1或8所示的氨基酸序列。在另一优选例中，所述的抗PD-L1抗体的轻链可变区(VL)具有如SEQIDNO.:2或9所示的氨基酸序列。在另一优选例中，所述的抗VEGF的元件包括血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1)的第二膜外区D2(VEGFR1D2)。在另一优选例中，所述的抗VEGF的元件具有如SEQIDNO.:10所示的氨基酸序列。在另一优选例中，所述的双功能抗体为双链抗体。在另一优选例中，所述的双功能抗体具有重链(H链)和轻链(L链)。在另一优选例中，所述双功能抗体的H链具有如SEQIDNO.:11或SEQIDNO.:12所示的氨基酸序列。在另一优选例中，所述双功能抗体的L链具有如SEQIDNO.:13所示的氨基酸序列。在另一优选例中，所述的抗体为药物偶联物形式。在另一优选例中，所述双功能抗体还含有(优选偶联有)可检测标记物、靶向标记、药物、毒素、细胞因子、放本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双功能抗体，其特征在于，所述双功能抗体包括：(a)抗PD‑L1的抗体或元件；和(b)与所述抗PD‑L1的抗体或元件相连接的抗VEGF的抗体或元件。

【技术特征摘要】
1.一种双功能抗体，其特征在于，所述双功能抗体包括：(a)抗PD-L1的抗体或元件；和(b)与所述抗PD-L1的抗体或元件相连接的抗VEGF的抗体或元件。2.如权利要求1所述的双功能抗体，其特征在于，所述双功能抗体从N端到C端具有式I所示的结构：其中，D各自独立地为无或抗VEGF的抗体或元件，且至少一个D为抗VEGF的抗体或元件；L1、L2、L3、L4、L5、L6各自独立地为键或接头元件；VL代表抗PD-L1抗体的轻链可变区；CL代表抗PD-L1抗体的轻链恒定区；VH代表抗PD-L1抗体的重链可变区；CH代表抗PD-L1抗体的重链恒定区；“～”代表二硫键或共价键；“-”代表肽键；其中，所述双功能抗体具有同时结合PD-L1以及结合VEGF的活性。3.如权利要求1所述的双功能抗体，其特征在于，所述的抗PD-L1抗体的重链可变区(VH)包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:3所示的CDR1，SEQIDNO.:4所示的CDR2，和SEQIDNO.:5所示的CDR3；和/或所述的抗PD-L1抗体的轻链可变区(VL)包括以下三个互补决定区CDR：SEQIDNO.:6所示的CDR1’，氨基酸序列为GIS的CDR...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱向阳，张凤雪，蔡明清，张雷，陈时，俞玲，
申请(专利权)人：华博生物医药技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31