一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测及鉴别方法组成比例

本发明专利技术提供了一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒质量检测及鉴别方法。本发明专利技术的王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测方法，建立了王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒HPLC指纹图谱，明确了王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的化学成分差异，阐明了炮制对王不留行化学成分的影响，且本法相较于已有报道的单一成分的HPLC法，稳定性更好，准确度更高。为王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒鉴别提供了新方法。

【技术实现步骤摘要】
一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测及鉴别方法
本专利技术具体涉及一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测及鉴别方法。
技术介绍
王不留行为石竹科植物麦蓝菜Vaccarriaseetalis(Neck.)Garcke的干燥成熟种子。夏季果实成热、果皮尚未开裂时采割植株，晒干，打下种子，除去杂质，再晒干用，为临床常用中药。有活血通经，下乳消肿，利尿通淋之功，可治经闭，痛经，乳汁不下，乳痈肿痛，淋症涩痛等病症，且疗效显著。王不留行中主要含有三萜皂苷、环肽、黄酮、生物碱、酚酸、类固醇和挥发油等成分。临床研究表明，王不留行能治疗乳汁分泌不足，慢性前列腺炎，乳腺增生症，急性腰扭伤，突发性耳聋，外用治疗带状疱症，桡骨茎突下载性腱鞘炎等症。炒王不留行为王不留行的主要炮制加工品，相对于其生品，有效成分更易煎出，走散力更强，长于活血通经、下乳和通淋。由于王不留行和小巢菜及同属植物的干燥种子外观性状相似，炒后更难单纯从外形特征上区分。目前市场上有用同属植物的干燥种子作王不留行入药。中药指纹图谱是一种多指标的质量控制模式，虽然它不能代替含量测定，但它比测定任何单一成分所提供的信息却丰富得多，可以比较全面地反映所含化学成分的种类和数量，能够更加有效地体现出中药成分的整体性和综合作用。HPLC法具有高效、快速、灵敏、重现性好、应用范围广等特点，在中药的质量控制及中药有效成分研究等方面都是重要的分析手段。目前有部分文献研究报道建立了炒王不留行饮片及其炮制前后的成分及含量变化，局限于炮制对单一成分的影响，如周国洪.炒王不留行化学成分及炮制对其影响研究[D].中国中医科学院，2016，5.。但是未能明确王不留行和炒王不留行饮片的整体化学成分，不能说明炮制对王不留行各有效成分的影响。且目前尚没有对炒王不留行标准汤剂和配方颗粒的指纹图谱研究。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取王不留行黄酮苷、原儿茶酸、刺桐碱、肥皂草苷、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷、5-羟甲基糠醛为对照品，加70～100％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入60～70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B梯度洗脱；波长为240-270nm；梯度洗脱程序如下：进一步地，步骤1)所述王不留行黄酮苷、刺桐碱、肥皂草苷、原儿茶酸、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷的浓度为每1ml分别含0.1mg、60μg、50μg、60μg、60μg、60μg、30μg。进一步地，步骤2)所述王不留行/炒王不留行饮片待测样品与70％甲醇的质量体积比为1g：10mL，所述甲醇浓度为60％；或王不留行/炒王不留行标准汤剂粉末待测样品与水的质量体积比为1μ：100mL，所述水浓度为100％；或王不留行/炒王不留行配方颗粒研细后粉末待测样品与水的质量体积比为1g：50mL，所述水浓度为100％。进一步地，步骤2)所述提取为超声提取，提取功率为600W，提取频率为40kHz，提取时间30min。进一步地，步骤3)所述的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样量为10μL。本专利技术还提供了一种王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的鉴别方法，其特征在于：它包括如下步骤：(1)取待检王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒粉末制备供试品溶液；(2)按权利要求1-5项所述的高效液相色谱法检测；(3)分析检测结果。进一步地，所述的高效液相色谱法检测的王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒指纹图谱中应呈现11个特征峰。所述的峰4S为王不留行黄酮苷；峰2：原儿茶酸；峰3：刺桐碱；峰5：肥皂草苷；峰7：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰10：王不留行环肽B；峰11：王不留行环肽A。进一步地，所述的高效液相色谱法检测的炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒指纹图谱中应呈现13个特征峰。其中与王不留行黄酮苷参照物相应的峰为S峰，与5-羟甲基糖醛参照物相应的峰为峰2；除峰4、峰5、峰12、峰13以外，计算其余各特征峰与S峰的相对保留时间，其中峰1～3的相对保留时间应在规定值的±10％之内，峰6～11的相对保留时间应在规定值的±5％之内。规定值为：0.217(峰1)、0.304(峰2)、0.320(峰3)、1.000(峰6S)、1.051(峰7)、1.142(峰8)、1.206(峰9)、1.429(峰10)、1.501(峰11)。本专利技术的一种王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测方法，明确了王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的化学成分差异，阐明了炮制对王不留行化学成分的影响，且方法简单，稳定性好，精密度高，为王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒鉴别提供了新方法。防止临床上将王不留行和炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒混用，保证了用药安全。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1王不留行饮片特征图谱，峰2：原儿茶酸；峰3：刺桐碱；峰4(S)：王不留行黄酮苷；峰5：肥皂草苷；峰7：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰10：王不留行环肽B；峰11：王不留行环肽A；S1-S22依次为：WBLX180701、WBLX180702、WBLX180703、WBLX180704、WBLX180705、WBLX180706、WBLX180707、WBLX180708、WBLX180709、WBLX180710、WBLX180711、WBLX180712、WBLX180713、WBLX180714、WBLX180715、WBLX180716、WBLX180717、WBLX180718、WBLX180719、WBLX180720、WBLX180721、WBLX180722。图2炒王不留行饮片特征图谱，峰2：5-羟甲基糠醛；峰4：原儿茶酸；峰5：刺桐碱；峰6(S)：王不留行黄酮苷；峰7：肥皂草苷；峰9：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰12：王不留行环肽B；峰13：王不留行环肽A；S1-S22依次为：CWBLX180601、CWBLX180602、CWBLX180603、CWBLX180604、CWBLX180606、CWBLX180607、CWBLX180615、CWBLX180616、CWBLX180617、CWBLX180618、CWBLX180619、CWBLX180620、CWBLX18062本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取王不留行黄酮苷、原儿茶酸、刺桐碱、肥皂草苷、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素‑2”‑O‑阿拉伯糖苷、5‑羟甲基糠醛为对照品，加70～100％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入0‑70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B梯度洗脱；波长为240‑270nm；梯度洗脱程序如下：

【技术特征摘要】
1.一种王不留行与炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取王不留行黄酮苷、原儿茶酸、刺桐碱、肥皂草苷、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷、5-羟甲基糠醛为对照品，加70～100％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入0-70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B梯度洗脱；波长为240-270nm；梯度洗脱程序如下：2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述王不留行黄酮苷、刺桐碱、肥皂草苷的浓度为每1ml分别含0.1mg、60μg、50μg，所述甲醇浓度为70％；原儿茶酸对照品、王不留行环肽A对照品、王不留行环肽B对照品、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷的浓度为每1ml分别含60μg、60μg、60μg、30μg，所述甲醇浓度为100％。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述王不留行/炒王不留行饮片待测样品与70％甲醇的质量体积比为1g∶10m...

【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，钟磊，李文兵，冯健，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51