血小板聚集功能检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提出了血小板聚集功能检测试剂盒，包含：纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂。利用本发明专利技术的试剂盒可以准确地确定被抗血小板药物抑制的血小板比例，从而评估抗血小板药物的作用效果，具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
血小板聚集功能检测试剂盒
本专利技术涉及体外诊断试剂
，具体涉及血小板聚集功能检测及其应用，尤其涉及血小板聚集功能检测试剂盒及确定抗血小板药物有效性的方法。
技术介绍
血小板聚集是血小板参与生理止血的重要环节，在许多病理性血栓形成过程中血小板聚集发挥着先导而关键的作用。因此，血小板聚集功能的检测对临床出血与血栓性疾病的诊断及疗效监测有指导意义，已广泛应用于抗血小板聚集药物的治疗监测中。目前光学比浊法(以下简称传统方法)因其操作简便、快速，易于掌握且经济实用，作为“金标准”试验用于临床血小板聚集功能的检测中。该方法的操作参见《全国临床检验操作规程》(第三版)。但是，其操作复杂，影响结果的因素众多，即使在同一实验室因实际操作不同，结果也会不同，稳定性较差，可比性不强。而且，血液经过反复离心会严重破坏血小板的聚集功能，因此重复测定结果准确性差。因此，目前血小板聚集功能检测方法仍有待研究。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。本专利技术提出了一种血小板聚集功能检测试剂盒。根据本专利技术的实施例，所述试剂盒包含：纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂。内源性凝血激活试剂可以启动凝血通路，在纤维蛋白原和血小板聚集两者共同的作用下实现凝血效果。纤维蛋白原激活试剂可以使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，后者经聚合形成互相交织的纤维蛋白网，使红细胞、白细胞和血小板包罗其中而形成血块。血小板激活剂会激活未被抗血小板药物抑制的血小板，并与纤维蛋白联结形成血凝块，此时检测血凝块强度反映纤维蛋白和活化的血小板共同作用效果。由此，利用纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂可以准确地确定出被抗血小板药物抑制的血小板比例，从而评估抗血小板药物的作用效果，具有临床意义，应用前景广泛。根据本专利技术的实施例，所述血小板聚集功能检测试剂盒还可以具有下列附加技术特征：根据本专利技术的实施例，所述纤维蛋白原激活剂包括巴曲酶和XIIIa因子。根据本专利技术的实施例，所述巴曲酶的浓度为10～100BU/mL、XIIIa因子的浓度为0.1～10mg/mL。根据本专利技术的实施例，所述纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂各自独立地进一步包括缓冲盐、保护剂和防腐剂。根据本专利技术的实施例，所述保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、人血清白蛋白中的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述保护剂的浓度为1～20mg/mL。根据本专利技术的实施例，所述缓冲盐中包括缓冲液和盐分；所述缓冲液选自Tris、HEPES、PBS、甘氨酸和MOPS中的至少之一；所述盐分选自氯化钠、氯化钾和氯化钙中的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述缓冲液的浓度为10～100mmol/L，所述盐分的含量为0.1～1质量％。根据本专利技术的实施例，所述缓冲液的浓度为10～100mmol/L。根据本专利技术的实施例，所述防腐剂选自Proclin300、山梨酸钾和对羟基苯甲酸甲酯的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述防腐剂的浓度为0.01～0.1质量％。根据本专利技术的实施例，所述内源性凝血激活试剂包括高岭土、鞣花酸、白陶土和硅藻土中的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述内源性凝血激活剂浓度为0.5～10mg/mL。根据本专利技术的实施例，所述血小板诱导剂包括二磷酸腺苷、二磷酸腺苷钠盐、二磷酸腺苷钾盐、花生四烯酸、花生四烯酸钠盐和花生四烯酸钾盐的至少之一。根据本专利技术的实施例，所述血小板诱导剂的浓度为0.01～10mg/mL。根据本专利技术的实施例，所述试剂盒进一步包括氯化钙溶液。根据本专利技术的实施例，所述氯化钙溶液的浓度为0.1～1mol/L。根据本专利技术的实施例，所述试剂盒进一步包括样品杯。根据本专利技术的实施例，所述试剂盒用于血栓弹力图仪凝血检测。根据本专利技术的实施例，所述的试剂盒中所有试剂均以冻干形式密闭保存于样品杯中。在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种利用前面所述血小板聚集功能检测试剂盒确定抗血小板药物有效性的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：将血液样品与所述内源性凝血激活试剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作A值；将血液样品与纤维蛋白原激活试剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作B值；将血液样品、待测药物与血小板诱导剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作C值；当(A-C)/(A-B)>50％时，是所述待测药物有效的指示。根据本专利技术的实施例，所述抗血小板药物选自阿司匹林、氯吡格雷或者替罗非班。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1为根据本专利技术的一个实施例提供的试剂盒检测流程示意图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本专利技术的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。本专利技术提出了血小板聚集功能检测试剂盒及确定抗血小板药物有效性的方法，下面将分别对其进行详细描述。血小板聚集功能检测试剂盒在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种血小板聚集功能检测试剂盒。根据本专利技术的实施例，该试剂盒包含：纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂。内源性凝血激活试剂可以启动凝血通路，在纤维蛋白原和血小板聚集两者共同的作用下实现凝血效果。纤维蛋白原激活试剂可以使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，后者经聚合形成互相交织的纤维蛋白网，使红细胞、白细胞和血小板包罗其中而形成血块。血小板激活剂花生四烯酸(AA)或二磷酸腺苷(ADP)后，会激活未被抗血小板药物抑制的血小板，并与纤维蛋白联结形成血凝块，此时检测血凝块强度反映纤维蛋白和活化的血小板共同作用效果。由此，利用纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂可以准确地确定出被抗血小板药物抑制的血小板比例(即被抑制的血小板量占总血小板量的比例)，从而评估抗血小板药物的作用效果，具有临床意义，应用前景广泛。为了方便理解，下面简要说明采用血栓弹力图测定被抗血小板药物抑制的血小板比例的过程：将血液样品与内源性凝血激活试剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作A值；将血液样品与纤维蛋白原激活试剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作B值；将血液样品、待测药物与血小板诱导剂接触，测定形成的第一块血块的血块强度，记作C值；被抗血小板药物抑制的血小板比例(％)＝(A-C)/(A-B)。根据本专利技术的实施例，纤维蛋白原激活剂包括巴曲酶和XIIIa因子。目前已被发现可以分解纤维蛋白原的物质很多，但是，专利技术人发现，相比于其他物质，巴曲酶能够特异性识别纤维蛋白原，促使难溶性的纤维蛋白交联成网状，从而增强血块强度，使出血部位的血栓形成和止血。并且，反应迅速，效率高。根据本专利技术的实施例，巴曲酶的浓度为10～100BU/mL。由此，能够进一步充分分解纤维蛋白原，进而交联聚合成难本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，包含：纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂。

【技术特征摘要】
1.一种血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，包含：纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂。2.根据权利要求1所述的血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，所述纤维蛋白原激活剂包括巴曲酶和XIIIa因子；任选地，所述巴曲酶的浓度为10～100BU/mL、XIIIa因子的浓度为0.1～10mg/mL。3.根据权利要求2所述的血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，所述纤维蛋白原激活试剂、内源性凝血激活试剂和血小板诱导剂各自独立地进一步包括缓冲盐、保护剂和防腐剂。4.根据权利要求3所述的血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，所述保护剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、人血清白蛋白中的至少之一；任选地，所述保护剂的浓度为1～20mg/mL；任选地，所述缓冲盐中包括缓冲液和盐分；所述缓冲液选自Tris、HEPES、PBS、甘氨酸和MOPS中的至少之一；所述盐分选自氯化钠、氯化钾和氯化钙中的至少之一；任选地，所述缓冲液的浓度为10～100mmol/L，所述盐分的含量为0.1～1质量％。5.根据权利要求3所述的血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂选自Proclin300、山梨酸钾和对羟基苯甲酸甲酯的至少之一；任选地，所述防腐剂的浓度为0.01～0.1质量％。6.根据权利要求1所述的血小板聚集功能检测试剂盒，其特征在于，所述内源性凝血激...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾峰，冯琼，
申请(专利权)人：深圳优迪生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44