一种用于快速鉴别细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于快速鉴别细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP试剂盒和检测方法。本发明专利技术设计了五对外引物、五对内引物和五对环引物，可以在一个反应中准确鉴定耐药基因mcr的具体分型，同时可以通过Multi‑LAMP反应快速区分耐药基因mcr的具体分型，而且还具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、检测简便、适合现场检测等优点，临床上具有极高的应用价值。

A Multiple LAMP Kit and Detection Method for Rapid Identification of Specific Typing of Bacterial Polymyxin Resistance Gene MCR

The invention discloses a multiple LAMP kit and a detection method for rapid identification of specific typing of bacterial polymyxin resistance gene mcr. The invention designs five external primers, five internal primers and five ring primers, which can accurately identify the specific typing of drug resistance gene MCR in one reaction, and can quickly distinguish the specific typing of drug resistance gene MCR through multi_LAMP reaction. It also has the advantages of fast, high efficiency, simple operation, high specificity, high sensitivity, simple detection, suitable for field detection, etc. It has very high application value.

【技术实现步骤摘要】
一种用于快速鉴别细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP试剂盒和检测方法
本专利技术属于核酸检验领域，关于一种用于快速鉴别细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP试剂盒和检测方法。
技术介绍
多粘菌素为阳离子多肽抗生素家族，对革兰阴性杆菌有广谱抗菌活性，其杀菌机制依赖于多粘菌素带正电荷的残基与附着在细菌壁外膜带负电荷的脂质A之间存在静电相互作用，细胞壁的通透性改变导致细菌死亡，从而发挥杀菌作用，通常被认为是对抗耐多药革兰氏阴性细菌感染的最后一道防线。报道发现了质粒介导的多粘菌素耐药新基因mcr-1，可以在不同菌种之间发生水平传播，这引起全球的广泛关注。生活中，携带耐药基因mcr的菌种包含大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、阴沟杆菌、沙门氏菌、宋内志贺菌、柠檬酸杆菌属、解鸟氨酸拉乌尔菌、阪崎肠杆菌、克吕沃尔菌属，宿主来源也十分复杂。耐药基因mcr的携带率也因样本与地区不同而不同。国际上一共报道了八个mcr基因家族(mcr-1、mcr-2、mcr-3、mcr-4、mcr-5、mcr-6、mcr-7、mcr-8)。MCR家族中mcr-1和mcr-3存在于不同地区的肠杆菌科本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鉴定细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP引物组，其特征在于，引物组的核苷酸序列如下所示：mcr‑1外引物mcr‑1‑F：5'‑TGATGCAGCATACTTCTGTG‑3'(SEQ ID No.1)；mcr‑1‑R：5'‑GACCGTGCCATAAGTGTC‑3'(SEQ ID No.2)；mcr‑1内引物mcr‑1‑FIP：5'‑GCGATGGGATAGGTTTGGCTAAGCTTGTGTTGCCGTTTTCTTGAC‑3'(SEQ ID No.3)；mcr‑1‑BIP：5'‑TGCTGACGATCGCTGTCGAAGCTTGCACATAGCGATACGATGAT‑3'(...

【技术特征摘要】
1.一种鉴定细菌多粘菌素耐药基因mcr具体分型的多重LAMP引物组，其特征在于，引物组的核苷酸序列如下所示：mcr-1外引物mcr-1-F：5'-TGATGCAGCATACTTCTGTG-3'(SEQIDNo.1)；mcr-1-R：5'-GACCGTGCCATAAGTGTC-3'(SEQIDNo.2)；mcr-1内引物mcr-1-FIP：5'-GCGATGGGATAGGTTTGGCTAAGCTTGTGTTGCCGTTTTCTTGAC-3'(SEQIDNo.3)；mcr-1-BIP：5'-TGCTGACGATCGCTGTCGAAGCTTGCACATAGCGATACGATGAT-3'(SEQIDNo.4)；mcr-1环引物mcr-1-LF：5'-AAGGTAAGATTGGCGGTCG-3'(SEQIDNo.5)；mcr-1-LB：5'-CTACTGATCACCACGCTGTT-3'(SEQIDNo.6)；mcr-2外引物mcr-2-F：5'-CAAAGACGCCGTGCAGAC-3'(SEQIDNo.7)；mcr-2-R：5'-CAGAATACGCCGTCGATGT-3'(SEQIDNo.8)；mcr-2内引物mcr-2-FIP：5'-ACTGCACATGGTCAGCACGCAAGCTTGAGCGTAAGCCACGCCTA-3'(SEQIDNo.9)；mcr-2-BIP：5'-GGCTATGGCCGTGAGACTTTCCAAGCTTGCCACACGATGTCACTTGG-3'(SEQIDNo.10)；mcr-2环引物mcr-2-LF：5'-ACCGACGACGAACACCAC-3'(SEQIDNo.11)；mcr-2-LB：5'-CTTGCCAAAGTTGATGGCTTG-3'(SEQIDNo.12)；mcr-3外引物mcr-3-F：5'-CATTACCAATATTGCTTGTTGC-3'(SEQIDNo.13)；mcr-3-R：5'-TTGGCTGGAACAATCTCAC-3'(SEQIDNo.14)；mcr-3内引物mcr-3-FIP：5'-GCTAACGCCTCATTTTGATTGGAAGCTTGCACTTCTTATCGCACTTAG-3'(SEQIDNo.15)；mcr-3-BIP：5'-TCAAAGGGATTCTAACTCGTGCAAGCTTGCAATAACCGCAATCACTAT-3'(SEQIDNo.16)；mcr-3环引物mcr-3-LF：5'-TCATTGTGTAACTAACGATTGC-3'(SEQIDNo.17)；mcr-3-LR：5'-CCTATCGATGTTTGCATCACTT-3'(SEQIDNo.18)；mcr-4外引物mcr-4-F：5'-TGAGTTAAGGCGTTACATTGT-3'(SEQIDNo.19)；mcr-4-R：5'-CGCATGAGCTAGTATCGTTAA-3'(SEQIDNo.20)；mcr-4内引物mcr-4-FIP：5'-TTACGACTGGCATTCTTCGCAAAGCTTCTATTTGCAGACGCCCAT-3'(SEQIDNo.21)；mcr-4-BIP：5'-AGTGGTTGTTGTGGGTGAAACTAAGCTTAGCATTGGTTGGCTTGTTA-3'(SEQIDNo.22)；mcr-4环引物mcr-4-LF：5'-TCTAGGCCAAGTTGTTGGTATT-3'(SEQIDNo.23)；mcr-4-LB：5'-CGCGCTCAATGAGCTATCA-3'(SEQIDNo.24)；mcr-5外引物mcr-5-F：5'-CAATGGAGAATGCTGCCCTA-3'(SEQIDNo.25)；mcr-5-R：5'-GCGTGGGTATCAGCACATC-3'(SEQIDNo.26)；mcr-5内引物mcr-5-FIP：5'-AGCCCGTTCGTAAAACCCTGACAAGCTTCTTGTTGGTTGCAGCCGT-3'(SEQIDNo.27)；mcr-5-BIP：5'-AGCGGTAATGATGCGCAGCGAAGCTTCATGACTGGCCACAGACC-3'(SEQIDNo.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：田国宝，钟兰兰，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44