利用氨基酰-tRNA合成酶相关蛋白表达水平的甲状腺滤泡癌诊断标志物的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种用氨基酰‑tRNA合成酶相关蛋白表达水平诊断甲状腺滤泡癌的标志物检测方法，更具体地说，为了提供诊断疑似甲状腺滤泡癌患者所需的信息，包括步骤：(a)提供源自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰‑tRNA合成酶(aminoacyl‑tRNA synthetase,ARS)或氨基酰‑tRNA合成酶复合物‑结合多功能蛋白(aminoacyl‑tRNA synthetase complex‑interacting multifunctional protein,AIMP)的蛋白表达水平；以及(c)一种检测甲状腺滤泡癌标志物的方法，包括将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确定蛋白表达水平变化的被检体确诊为甲状腺滤泡癌。具体而言，本发明专利技术公开的蛋白质种类可简单准确地诊断甲状腺滤泡癌，并不需通过手术提取组织，其诊断灵敏度高且特异性强。

Detection of Diagnostic Markers of Thyroid Follicular Carcinoma by Aminoyl-tRNA Synthase Related Protein Level

The present invention relates to a method for detecting the markers of thyroid follicular cancer with the expression level of aminoacyl tRNA synthase-related protein. More specifically, in order to provide the information needed for the diagnosis of suspected thyroid follicular cancer patients, the steps include: (a) providing a sample of a subject from suspected thyroid follicular cancer; (b) detecting aminoacyl tRNA synthase (aminoacyl tRNA) in the above samples. Synthetase, ARS) or aminoacyl tRNA synthetase complex binding to the protein expression level of multifunctional protein (AIMP); and (c) a method for detecting thyroid follicular cancer markers, including comparing the protein levels detected above with those of control group, to determine the changes of protein expression level. Thyroid follicular carcinoma was confirmed by examination. Specifically, the proteins disclosed in the present invention can diagnose thyroid follicular carcinoma simply and accurately, and do not need to extract tissues by surgery, and have high diagnostic sensitivity and specificity.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用氨基酰-tRNA合成酶相关蛋白表达水平的甲状腺滤泡癌诊断标志物的检测方法
本专利技术涉及一种利用氨基酰-tRNA合成酶相关蛋白表达水平的甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma)诊断标志物的检测方法，具体而言有关一种检测甲状腺滤泡癌标志物的方法，为了提供诊断疑似甲状腺滤泡癌患者甲状腺滤泡癌所需的信息，包括步骤：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetas的e)或氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白(aminoacyl-tRNAsynthetasecomplex-interactingmultifunctionalprotein)的蛋白表达水平；以及(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，判断蛋白表达水平变化的被检体患有甲状腺滤泡癌。
技术介绍
本申请主张2016年7月1日申请的大韩民国专利申请第10-2016-00883361号的优先权，上述说明书全文作为本专利申请的参考文献。在所有甲状腺癌中约20％的甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma,FTC)多发生在女性身上，属于预后良好分化的甲状腺癌。和占甲状腺癌多数的甲状腺乳头状癌(papillarythyroidcarcinoma)相比不同的是，甲状腺滤泡癌主要出现在年龄较大的人群中，甲状腺乳头状癌主要通过淋巴结发生转移，而甲状腺滤泡癌却是通过血管发生转移。另一方面，甲状腺乳头状癌可以在观察特异核的形态之后比较容易地通过微针吸入检查进行诊断，但甲状腺滤泡癌并没有确立明确的标准，因此很难准确诊断。特别是甲状腺良性肿瘤-滤泡性腺瘤(follicularadenoma)的20％～30％无法通过细针吸入检查与甲状腺滤泡癌识别，所以有时会发生将甲状腺滤泡癌归类为滤泡性腺瘤的情况。目前，为了确诊甲状腺滤泡癌，几乎唯一的方法是通过手术提取甲状腺组织以确认组织内病理。诸如此类包括手术在内的病理检查首先通过手术切除一半被发现了结节的甲状腺，然后进行组织检查，之后诊断为甲状腺滤泡癌，除了预后良好的早期癌症以外，还要再次通过手术切除剩下的另一半，所以这是一种非常繁琐的方法。因此，有必要研发一种生物标志物，能从细针吸取检查时获得的甲状腺组织或血液中区分甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤，确诊甲状腺滤泡癌。尤其是一旦开发出以蛋白质为基础的生物标志物，就可以利用抗体等检测相应标志物的表达水平，从而可以迅速获得诊断所需的信息，不需要通过手术进行病理检查。被提议作为甲状腺滤泡癌生物标志物的BRAF、RET/PTC、RAS、Pax8/PPAgamma、P53等基因的突变发生率不高，事实上无法在诊断中实际应用。此外，与滤泡性腺瘤组织相比，确认ELMO1、EMCN、ITIH5、KCNAB1、SLCO2A1等5种基因的表达水平在甲状腺滤泡癌组织中下降的研究虽然公开了可能研发出区分甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤的标志物，但是这必须经过从组织中提取mRNA这一过程才能用作标志物，所以存在很大限制(Pfeiferetal.BMCMedicalGenomics,2013,6:380)。判断甲状腺癌的各种蛋白质标志物等虽被用于免疫组化法(immunohistochemistry)(怀斯曼SM等人,AnnalsofSurgicalOncology,2008,15:2811-2826)，但是特异性低，几乎没有用于区分甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤的可能。鉴此，迫切需要开发一种可以明确区分甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤等良性肿瘤的生物标志物。
技术实现思路
【技术课题】本专利技术的专利技术者们从确认了甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤的患者中提取病理组织后通过质谱分析来分析广泛蛋白水平，结果确认大多数氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)相关蛋白水平在甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤组织中显现出差异，从而完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的是为了提供诊断甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma)所需的信息，提供一种检测甲状腺滤泡癌的标志物的方法，包括：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase，ARS)或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白(aminoacyl-tRNAsynthetasecomplex-interactingmultifunctionalprotein，AIMP)的蛋白表达水平；和(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确认了蛋白表达水平变化的被检体被判断为甲状腺滤泡癌的步骤。【技术解决方式】为了达到上述目的，本专利技术为了提供诊断甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma)所需的信息，提供一种检测甲状腺滤泡癌的标志物的方法，包括：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase，ARS)或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白(aminoacyl-tRNAsynthetasecomplex-interactingmultifunctionalprotein，AIMP)的蛋白表达水平；和(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确认了蛋白表达水平变化的被检体被判断为甲状腺滤泡癌的步骤。以下将对本专利技术进行详细说明。本专利技术为了提供诊断甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcarcinoma)所需的信息，提供一种检测甲状腺滤泡癌的标志物的方法，包括的步骤：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase，ARS)或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白(aminoacyl-tRNAsynthetasecomplex-interactingmultifunctionalprotein，AIMP)的蛋白表达水平；和(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确认了蛋白表达水平变化的被检体被判断为甲状腺滤泡癌。上述(a)步骤是根据本专利技术的方法提供被检体样本，以提供诊断甲状腺滤泡癌所需的信息。在本专利技术中，“诊断”是指确认病理状态的存在或特征。本专利技术中的诊断是指通过检测氨基酰-tRNA(ARS)或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白(AIMP)的表达水平来判断甲状腺滤泡癌的发生，尤其是与滤泡腺瘤等良性肿瘤区分开来确诊为甲状腺滤泡癌。“甲状腺滤泡癌(follicularthyroidcancer,FTC)”是在甲状腺上产生恶性肿瘤，主要发生在与甲状腺激素的产生有关的腺组织中，是甲状腺分化癌的一种，具有通过血液转移到其他组织的特征。甲状腺滤泡癌主要通过体检时的超声波检查或触诊等发现，在无疼痛的情况下偶然被发现为甲状腺结节。甲状腺癌通过甲状腺超声检查确定甲状腺肿瘤的大小、位置、形状等，通过超声波进行诊断，一边观察甲状腺，一边通过细针刺入甲状腺取出甲状腺细胞来确定细胞形状，从而确定细胞形状(细针吸取细胞检查，finen本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测甲状腺滤泡癌标志物的方法，为了提供诊断甲状腺滤泡癌所需要的信息，包括：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰‑tRNA合成酶或氨酰‑tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白的蛋白表达水平；和(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确认了蛋白表达水平变化的被检体被判断为甲状腺滤泡癌的步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.07.01 KR 10-2016-00833611.一种检测甲状腺滤泡癌标志物的方法，为了提供诊断甲状腺滤泡癌所需要的信息，包括：(a)提供来自疑似甲状腺滤泡癌的被检体样本；(b)检测上述样本中氨基酰-tRNA合成酶或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白的蛋白表达水平；和(c)将上述检测的蛋白表达水平与比对组进行比较，确认了蛋白表达水平变化的被检体被判断为甲状腺滤泡癌的步骤。2.根据权利请求项1所述的方法，其特征是，所述样本选自甲状腺组织、血液、血浆、血清、淋巴液和尿液组成的群。3.根据权利请求项1所述的方法，其特征是，所述比对组是确诊了甲状腺滤泡性腺瘤的患者。4.根据权利请求项1所述的方法，其特征是，所述蛋白表达水平的变化是选自氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1、IRAS线粒体、SARS线粒体、赖氨酰-tRNA合成酶、缬氨酰-tRNA合成酶和α亚基苯丙氨酸-tRNA合成酶组成的群中一个以上蛋白质的表达水平增加。5.根据权利请求项1所述的方法，其特征是，所述蛋白表达水平的变化是选自丙氨酰-tRNA合成酶、天冬氨酸-tRNA合成酶、双功能谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶、色氨酰-tRNA合成酶、甘氨酰-tRNA合成酶、异亮氨酸tRNA合成酶胞质、酪氨酰-tRNA合成酶、门冬酰-tRNA合成酶、谷氨酰胺-tRNA合成酶、精氨酰-tRNA合成酶、丝氨酸-tRNA合成酶胞质及苏氨酰-tRNA合成酶组成的群中一个以上的蛋白质表达水平减少。6.根据权利请求项1所述的方法，其特征是，所述检测蛋白表达水平包括选自蛋白质印迹法、斑点杂交、酶联免疫吸附测定、放射免疫分析法、放射免疫扩散法、奥克特洛尼双向免疫扩散法、火箭免疫电泳、免疫组织化学染色、免疫沉淀法、补体固定分析法、流式细胞荧光分选技术、蛋白质芯片、质谱分析组成的群中的任何一种方法。7.一种用于诊断甲状腺滤泡癌的组成物，包括检测氨基酰-tRNA合成酶或氨酰-tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白的表达水平的制剂。8.根据权利请求项7所述的组成物，其特征是，所述氨基酰-tRNA合成酶选自异亮氨酸-tRNA合成酶线粒体、丝氨酰-tRNA合成酶线粒体、赖氨酰-tRNA合成酶、缬氨酸-tRNA合成酶、α亚基苯丙氨酸-tRNA合成酶、丙氨酰tRNA合成酶、天冬氨酰tRNA合成酶、双功能谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶、色氨酸tRNA合成酶、甘氨酰tRNA合成酶、异亮氨酸tRNA合成酶胞质、酪氨酰-tRNA合成酶、门冬酰-tRNA合成酶、谷氨酰胺-tRNA合成酶、精氨酰-tRNA合成酶、丝氨酸-tRNA合...

【专利技术属性】
技术研发人员：金圣勋，梁元硕，金敬坤，金元九，
申请(专利权)人：医药生命融合研究团，财团法人峨山社会福祉财团，蔚山大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国,KR