The invention discloses a multiple gene detection kit for guiding the use of antiepileptic drugs and a method for its use. The present invention adopts multiplex PCR combined with fragment length/mass analysis method to simultaneously and rapidly detect eight single nucleotide polymorphism (SNP) loci in four genes related to antiepileptic drug metabolism, transport and target action, such as CYP2C9, CYP2C19, POLG and UGT1A4. Detection steps: (1) Oral exfoliated cells were collected and stored on cell acquisition card or blood samples were collected and nucleic acid was extracted; (2) multiplex PCR amplification was performed using cell acquisition card or nucleic acid as template described in step 1; (3) 8 SNP loci, 3 human genomic DNA internal reference (huDNA) genes and 1 PCR internal reference product were separated synchronously according to the length/quality of the product fragments; (4) result analysis and interpretation. The invention has the advantages of fast speed, high sensitivity, good repeatability, strong specificity, high flux and low cost.
【技术实现步骤摘要】
一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法
本专利技术涉及一种多重基因检测试剂盒,具体涉及一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法。
技术介绍
癫痫(epilepsy)是一种反复发作、病程迁延、突发性大脑功能失调的慢性疾病,临床表现为运动、感觉、意识和植物神经功能紊乱。癫痫作为神经内科仅次于脑血管病的第二大疾病,严重威胁着人类的健康。据世界卫生组织(WHO)统计的数据显示,目前全球共有约5000万人正遭受癫痫的侵袭,其中80%的患者在发展中国家,其中约有四分之三的患者得不到所需治疗。我国的癫痫患病率为7‰,与WHO报告的发展中国家7.2‰的发病率接近。服用抗癫痫药物是治疗癫痫症的主要手段。目前临床上常用的药物有丙戊酸钠、苯妥英、拉莫三嗪和苯巴比妥等。根据作用机制,抗癫痫药物可分为膜稳定剂、减少神经递质释放的药物、γ-氨基丁酸调节剂和其他药物。大部分抗癫痫药物都会引发不良反应,如中枢神经系统抑制反应、行为障碍、血液系统紊乱、和皮肤病变。除了引发严重不良反应,抗癫痫药物治疗的疗效存在显著的个体差异。研究表明,抗癫痫药物疗效个体差异和不良反应与患者基因多态性有关。人类基因组80%以上基因多态性都是单核苷酸多态性(SingleNucleotidepolymorphism,SNP)。SNP指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,包括碱基转换、颠换、缺失和插入。与药物相关的基因SNP位点发生突变可使对应的酶活性发生变化,从而影响药物代谢、转运或靶点结合,导致药物疗效不佳,甚至发生严重毒副反应。例如:相关研究报道,苯 ...
【技术保护点】
1.一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒,其特征在于,包括如下表所示的同步快速定性检测与抗癫痫药物用药相关的8个SNP位点和4个内参基因的引物组合物:SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.32、PCR反应液、阳性对照品和超纯水;所述8个SNP位点为:CYP2C19基因的*2、*3和*17位点,CYP2C9基因的*2和*3位点,UGT1A4基因的rs2011425位点,POLG基因的A467T和W748S位点;
【技术特征摘要】
1.一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒,其特征在于,包括如下表所示的同步快速定性检测与抗癫痫药物用药相关的8个SNP位点和4个内参基因的引物组合物:SEQIDNO.1~SEQIDNO.32、PCR反应液、阳性对照品和超纯水;所述8个SNP位点为:CYP2C19基因的*2、*3和*17位点,CYP2C9基因的*2和*3位点,UGT1A4基因的rs2011425位点,POLG基因的A467T和W748S位点;2.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒,其特征在于,针对每一个SNP位点设计了3条引物,其中2条引物分别与野生型基因和突变型基因互补结合,1条共用的引物分别与野生型和突变型引物形成引物对扩增出片段长短有2~10个碱基差异的PCR产物。3.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒,其特征在于,在多重PCR反应中加入3个人基因组DNA内参和一个PCR反应内参。4.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒,其特征在于,所述阳...
【专利技术属性】
技术研发人员:吕军英,王凡,吴勇,余丁,
申请(专利权)人:宁波海尔施基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。