一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条制造技术

本发明专利技术提供了一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，属于医学检测技术领域，所述试纸条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述单克隆抗体混合液中包括第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线和一条质控线；所述4条检测线上分别包被第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体。所述荧光免疫试纸条操作简单、误差低；检测结果可靠，精确度高。

A fluorescent immunoassay strip for combined quantitative detection of multiple indicators of ovarian reserve function

The invention provides a fluorescent immunoassay strip for joint quantitative detection of multiple indicators of ovarian reserve function, which belongs to the technical field of medical detection. The strip comprises a sample pad, a binding pad, a cellulose nitrate film and a water absorbent paper which are successively connected to the PVC floor; a monoclonal antibody mixture liquid marked with fluorescent microspheres is sprayed on the binding pad; and the monoclonal antibody mixture liquid is packed. Including the first follicle stimulating hormone monoclonal antibody, the first luteinizing hormone monoclonal antibody, the first anti-Mullerian hormone monoclonal antibody and the first serum inhibin B monoclonal antibody; the cellulose nitrate membrane is sequentially parallel to four detection lines and a quality control line; the four detection lines are coated with the second follicle stimulating hormone monoclonal antibody and the second luteinizing hormone monoclonal antibody, respectively. Antibody, second anti-Mullerian hormone monoclonal antibody and second serum inhibin B monoclonal antibody. The fluorescence immunoassay strip has the advantages of simple operation, low error, reliable detection result and high accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条
本专利技术属于生物医药
，尤其涉及一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条。
技术介绍
卵巢储备功能是指卵巢皮质区卵泡生长、发育、并形成可受精的卵母细胞的能力，即卵巢内存留卵子的数量和质量。随着年龄的增长或者其他因素，引起卵子数量的减少和质量的下降，即卵巢储备功能的衰退。影响卵巢储备功能的因素众多，有年龄、遗传因素、自身免疫因素、卵巢及周围组织手术、社会心理因素等。卵巢储备功能的衰退是一个渐进性的过程，早期发现及诊断、及时进行治疗干预，能够有效改善女性的卵巢功能，提高受孕能力及妊娠结局。目前临床采用的女性卵巢储备功能的参考指标或方法有：年龄、激素水平、超声检查、刺激试验、细胞因子检测等。尽管如此，尚未存在一项指标可以满足检测要求，建立一种操作简单、对人体伤害少、经济适用且有良好预测价值的检测方法，来综合检测多项卵巢储备功能生物学指标至关重要。卵泡刺激素(FSH)是由腺垂体促卵泡激素细胞分泌的，与黄体生成素(LH)统称为促性腺激素。基础FSH是指月经第2～5d(即卵泡早期)的血清FSH水平，它能反映卵巢的储备功能。一般认为，血清基础FSH<10U/L表明卵巢储备功能正常，若FSH>10-15U/L则预示着卵巢储备功能下降。垂体分泌的FSH和LH在生理状态下随着卵巢储备功能的降低均升高，在卵巢储备功能下降的初期，FSH比LH上升更显著，所以他们的比值首先出现改变，表现为比值的升高。多数学者认为基础FSH/LH>2时，患者往往对超促排卵反应不良，FSH/LH>3.6被视作评估卵巢功能下降的标志点。抗缪勒氏管激素(AMH)又称为苗勒管抑制物质，属于转化生长因子-β(TGF-β)家族。AMH主要由卵巢早期生长卵泡的颗粒细胞分泌，其浓度受始基卵泡的募集速度及卵泡储备的影响；故AMH能反映原始卵泡及窦前卵泡的数量，而不受下丘脑分泌的促性腺激素的影响。研究表明AMH不随女性月经周期而变化，其对卵巢储备功能的评估价值优于基础内分泌激素。有研究发现，基础AMH水平在女性35岁前变化不大，＞30岁时开始下降，35岁后呈直线下降；当血清AMH水平≤1.3ng/ml时，其获卵数明显减少。低AMH值与卵巢低反应、胚胎质量低及妊娠结局差等结果相关。与周期第三天的FSH、LH、抑制素B相比，AMH值与早期窦卵泡数相关性更密切，目前认为AMH是预测卵巢储备和生殖潜能较为可靠的指标。血清抑制素B(INHB)是一种糖蛋白激素，同样属于转化生长因子-β家族；它能反映生长卵泡的数量及质量，可作为评估卵泡发育情况及卵子数量的标志物。INHB由中小窦状卵泡的颗粒细胞分泌，在卵泡早期开始上升，卵泡中期达到最大值，排卵后在FSH、LH峰出现后1～2d开始下降，整个黄体期均处于低水平。INHB会随年龄增长呈降低的趋势，INHB的水平要先于FSH发生变化，又能够避免因为FSH脉冲式分泌带来的误差，优于其他预测指标，INHB用于卵巢储备功能下降和卵巢早衰的诊断现在已被普遍认可。目前，检测上述生物学指标的方法主要有放射免疫法(RIA)、高灵敏度的免疫放射法(IRMA)、酶免疫法(EIA)、微粒子酶免疫法(MEIA)、胶体金法等。RIA法有放射性污染，而IRMA法费时费力，自动化程度不高。而上述方法均无法简单快速的检测与卵巢储备功能相关的多个指标。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，所述试纸条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述荧光微球标记的单克隆抗体混合液中包括荧光微球标记的第一卵泡刺激素单克隆抗体、荧光微球标记的第一黄体生成素单克隆抗体、荧光微球标记的第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和荧光微球标记的第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线和一条质控线；所述4条检测线上分别包被第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体；所述检测线上包被的第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体分别与对应所述第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体识别不同的抗原表位。优选的，所述第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体与荧光微球的质量比独立为(0.2～0.5)：1。优选的，所述荧光微球标记的单克隆抗体混合液在结合垫上的喷涂浓度为2～6μL/cm。优选的，所述样品垫为全血样品垫。优选的，所述检测线和质控线的宽度独立为1～2mm。优选的，相邻检测线之间的间距独立为5～8mm；靠近质控线的检测线与质控线之间的间距为5～8mm。优选的，所述质控线上喷涂羊抗鼠IgG多克隆抗体。优选的，所述试纸条还包括外壳；所述外壳包括底部卡槽和卡壳。优选的，所述外壳设置加样孔和结果检测窗口。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述单克隆抗体混合液中包括第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线，可以同时检测样本中FSH、LH、AMH、INHB的浓度，通过免疫荧光分析仪即可读取结果，具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点，适用于临床诊断和POCT检测。本专利技术提供的荧光免疫试纸条将FSH、LH、AMH、INHB检测集合于同一检测试纸中，不仅降低了多次检测各项指标造成的误差，简化了多项指标检测的复杂操作步骤，也减少了检测费用。并且根据实施例记载本专利技术所述的免疫试纸条的检测结果与临床化学发光法检测结果的相关性非常高，在0.9698～0.9957之间；因此检测结果可靠，精确度高。综上，本专利技术提供的荧光免疫试纸条在卵巢储备功能衰退的早期诊断和治疗干预，提高女性受孕能力及妊娠结局的应用上有显著临床意义。附图说明图1为联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸内部侧面示意图；图2为联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸俯视示意图。具体实施方式本专利技术提供了一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，所述试纸条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述单克隆抗体混合液中包括第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线和一条质控线；所述4条检测线上分别包被第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体；所述检测线上包被的第二卵泡刺激素单本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，所述试纸条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述荧光微球标记的单克隆抗体混合液中包括荧光微球标记的第一卵泡刺激素单克隆抗体、荧光微球标记的第一黄体生成素单克隆抗体、荧光微球标记的第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和荧光微球标记的第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线和一条质控线；所述4条检测线上分别包被第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体；所述检测线上包被的第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体分别与对应所述第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体识别不同的抗原表位。

【技术特征摘要】
1.一种联合定量检测卵巢储备功能多项指标的荧光免疫试纸条，所述试纸条包括顺次衔接于PVC底板的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；所述结合垫上喷涂有荧光微球标记的单克隆抗体混合液；所述荧光微球标记的单克隆抗体混合液中包括荧光微球标记的第一卵泡刺激素单克隆抗体、荧光微球标记的第一黄体生成素单克隆抗体、荧光微球标记的第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和荧光微球标记的第一血清抑制素B单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次平行设置4条检测线和一条质控线；所述4条检测线上分别包被第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体；所述检测线上包被的第二卵泡刺激素单克隆抗体、第二黄体生成素单克隆抗体、第二抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第二血清抑制素B单克隆抗体分别与对应所述第一卵泡刺激素单克隆抗体、第一黄体生成素单克隆抗体、第一抗缪勒氏管激素单克隆抗体和第一血清抑制素B单克隆抗体识别不同的抗原表位。2.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸条，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓春，张少丹，
申请(专利权)人：石家庄洹众生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13