与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物及其应用，本发明专利技术人发现KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因在胰腺神经内分泌肿瘤组织或细胞中的表达上调。本发明专利技术还公开了用于胰腺神经内分泌肿瘤检测或预后的试剂盒，所述试剂盒包括特异性扩增KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因的引物序列。利用本发明专利技术的试剂盒进行胰腺神经内分泌肿瘤的辅助诊断和预后评估，对后续临床治疗具有指导意义。另外，还可将KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1抑制剂用来制备预防或治疗胰腺神经内分泌肿瘤的药物组合物以用于胰腺神经内分泌肿瘤的基因治疗、药物治疗等临床应用。

Molecular markers associated with pancreatic neuroendocrine tumors and their applications

The present invention discloses molecular markers related to pancreatic neuroendocrine tumors and their applications. It is found that KLKB1, IL13RA2, ABCC8 and PART1 genes are up-regulated in pancreatic neuroendocrine tumors. The invention also discloses a kit for detection or prognosis of pancreatic neuroendocrine tumors, which includes primer sequences specifically amplifying KLKB1, IL13RA2, ABCC8 and PARTT1 genes. The kit of the invention can be used for assistant diagnosis and prognosis evaluation of pancreatic neuroendocrine tumors, and has guiding significance for subsequent clinical treatment. In addition, KLKB1, IL13RA2, ABCC8 and PART1 inhibitors can also be used to prepare pharmaceutical compositions for the prevention or treatment of pancreatic neuroendocrine tumors for clinical applications such as gene therapy and drug therapy of pancreatic neuroendocrine tumors.

【技术实现步骤摘要】
与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物及其应用
本专利技术涉及肿瘤分子生物学
，具体涉及与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物及其应用，具体地所述分子标记物为人源KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因。
技术介绍
神经内分泌肿瘤(neuroendocrineneoplasms，NEN)起源于多潜能神经内分泌干细胞，其具有神经内分泌标记物、能够产生生物活性胺和/或多肽激素，并具有显著异质性。过去30年间，NEN患病率从1.09/10万上升至5.25/10万。相比其他肿瘤，NEN的增加更为迅速，这可能与诊断技术进步、肿瘤筛查更加频繁，以及环境因素等有关。胰腺神经内分泌肿瘤(pancreaticneuroendocrinetumors，PNET)约占所有神经内分泌肿瘤的1/3，在胰腺肿瘤中所占百分率约为2％～5％。PNET尽管少见，但往往因有激素分泌而作用于全身多系统，严重影响病人的健康和生活质量，且较易发生肝转移，常因肝功能衰竭而死亡。随着影像学技术的进步，检出率亦呈现升高趋势。由于临床表现、病理特征、恶性程度及预后差异较大，目前临床上对PNET的认识尚不充分，易误诊和漏诊。对于各种PNET，2017版内分泌肿瘤WHO分类分为：①分化型PNET(胰腺神经内分泌肿瘤)，又分为G1、G2和G3三个级别；②未分化型PNEC(胰腺神经内分泌癌)，又分为小细胞型和大细胞型，属于高度恶性；③混合型神经内分泌-非神经内分泌肿瘤。从临床表现方面看，PNET可分为功能性和非功能性两类，功能性可产生典型的临床症状，最常见的有胰岛素瘤和胃泌素瘤。非功能性近年明显升高，它们仅分泌多肽片段，较少或不分泌激素，不产生临床内分泌异常征象。功能性PNET因早期即可产生症状而获得及时治疗；非功能性者则常延误诊断，肿瘤常生长很大，产生局部侵袭或远处转移。目前PNET的治疗以外科手术为主，适用于肿瘤比较局限的患者，但预后差异较大。药物治疗可应用生长抑素类似物如奥曲肽和善的定，能部分缓解症状。分子靶向药物舒尼替尼已被批准用于PNET的治疗，但临床观察显示，舒尼替尼治疗PNET，在短暂获益后，肿瘤侵袭能力显著增强，更易发生转移。抗血管生成及抗生长因子的靶向药物治疗是新近尝试的治疗方法，但疗效有待确定。通过寻找PNET相关基因并研究它们在PNET组织或细胞中的表现，是探索进行基因治疗及相关药物治疗的方向。人KLKB1(激肽释放酶B1)基因具有NCBI(GenBank)基因ID3818，其位于染色体4的NC_000004.12位置，KLKB1的参考包括NCBI(GenBank)参考序列转录变体1(NM_000892.5)及其编码的较长蛋白同种型1(NP_000883.2)；NCBI(GenBank)参考序列转录变体2(NM_001318394.1)及其编码的较短蛋白同种型2(NP_001305323.1)；以及NCBI(GenBank)参考序列转录变体3(NM_001318396.1)及其编码的较短蛋白同种型2(NP_001305325.1)，与变体1相比，该变体3在5'UTR中不同，其缺少5'编码区的一部分并在交替的起始密码子处启动翻译，其编码的同种型3更短并且相比同种型1具有不同的N-末端。KLKB1基因编码参与血液凝固、纤维蛋白溶解、激肽产生和炎症的表面依赖性激活的糖蛋白。该编码的前原蛋白作为与高分子量激肽原的非共价复合物而存在于血浆中，经历由活化的凝血因子XII介导的蛋白水解加工，以产生由重链和轻链组成的经二硫键连接的异二聚体丝氨酸蛋白酶。该基因的某些突变导致前激肽释放酶缺乏。其选择性剪接导致编码不同同种型的多种转录物变体。人IL13RA2(白细胞介素13受体亚基α2)基因具有NCBI(GenBank)基因ID3598，其位于X染色体的NC_000023.11位置，IL13RA2的参考包括NCBI(GenBank)参考序列转录体(NM_000640.3)及其编码的白细胞介素13受体亚基α2前体(NP_000631.1)。由该基因编码的蛋白与IL13RA1密切相关，Il13RA1是白细胞介素13受体复合物的一个亚基。该蛋白质以高亲和力结合IL13，但缺乏细胞质结构域，并且似乎不起信号介质的作用。据报道，它在IL13的内化中发挥作用。人ABCC8(ATP结合盒亚家族C成员8)基因具有NCBI(GenBank)基因ID6833，其位于染色体11的NC_000011.10位置，ABCC8的参考包括NCBI(GenBank)参考序列转录变体1(NM_001287174.1)及其编码的较短蛋白同种型1(NP_001274103.1)；NCBI(GenBank)参考序列转录变体2(NM_000352.4)及其编码的较短蛋白同种型2(NP_000343.2)；NCBI(GenBank)参考序列转录变体3(NM_001351295.1)及其编码的最长蛋白同种型3(NP_0013338224.1)；NCBI(GenBank)参考序列转录变体4(NM_001351296.1)及其编码的较短蛋白同种型4(NP_001338225.1)；以及NCBI(GenBank)参考序列转录变体5(NM_001351297.1)及其编码的较短蛋白同种型5(NP_001338226.1)。该基因编码的蛋白是ATP结合盒(ABC)转运蛋白超家族的成员。ABC蛋白通过细胞外和细胞内膜运输各种分子。ABC基因分为七个不同的亚家族(ABC1、MDR/TAP、MRP、ALD、OABP、GCN20，白色)。该蛋白是MRP亚家族的成员，其参与多药抗性。该蛋白作为ATP敏感性钾通道和胰岛素释放的调节剂起作用。已经在患有婴儿期高胰岛素血症低血糖症的患者中观察到该蛋白质的突变和缺陷，这是一种不受调节的高胰岛素分泌的常染色体隐性遗传疾病。突变也与非胰岛素依赖型II型糖尿病有关，II型糖尿病是胰岛素分泌缺陷的常染色体显性疾病。目前已经发现该基因的剪接转录物变体。人PART1(前列腺雄激素调节的转录本1)基因具有NCBI(GenBank)基因ID25859，其位于染色体5的NC_000005.10位置，PART1的参考包括NCBI(GenBank)参考RNA序列NR_024617.1、NR_028508.1和NR_028509.1。该基因由前列腺腺癌细胞中的雄性激素诱导。已描述了该基因的多个选择性转录物变体，预测其中没有一个变体编码蛋白产物。目前，关于KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因在胰腺神经内分泌肿瘤中的作用机制尚不清楚，其功能和表达变化的临床意义尚未有报道。因此，分析KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因与胰腺神经内分泌肿瘤发生发展的关系，探索针对KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1途径的肿瘤治疗策略有利于改善针对胰腺神经内分泌肿瘤的检测和治疗。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术一个目的是提供胰腺神经内分泌肿瘤的分子标记物KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1在制备胰腺神经内分泌肿瘤检测、预后或治疗产品中的应用，其中所述分子标记物为人源KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1基因，其中在NCBI数据库中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物在制备胰腺内神经分泌肿瘤检测、预后或治疗产品中的应用，其中所述分子标记物为人源KLKB1、IL13RA2、ABCC8基因或蛋白以及PART1基因。

【技术特征摘要】
1.与胰腺神经内分泌肿瘤相关的分子标记物在制备胰腺内神经分泌肿瘤检测、预后或治疗产品中的应用，其中所述分子标记物为人源KLKB1、IL13RA2、ABCC8基因或蛋白以及PART1基因。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述分子标记物KLKB1、IL13RA2、ABCC8和PART1在患者的胰腺神经内分泌肿瘤组织或细胞中表达上调。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述产品为用于胰腺神经内分泌肿瘤检测或预后的试剂盒。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测或预后为根据所检测对象的生物样本中的KLKB1、IL13RA2、ABCC8和/或PART1表达水平来判断对象中胰腺神经内分泌肿瘤的疾病状况、进行疗效评估或转移复发监控。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述生物学样本为胰腺神经内分泌肿瘤组织或细胞。6.用于胰腺神经内分泌肿瘤检测或预后的试剂盒，其特征在于，包含特异性扩增人KLKB1、IL13RA2、ABCC8和/或PART1基因的引物对，其中扩增KLKB1基因的正向引物为如SEQIDNO.1所示的序列，反向引物为如SEQIDNO.2所示的序列；扩增IL13RA2基因的正向引物为如SEQIDNO...

【专利技术属性】
技术研发人员：王文泽，石秀玉，肖雨，李晓欧，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京,11