一种新城疫病毒的荧光定量RT-PCR检测方法技术

本发明专利技术的目的是提供一种新城疫病毒荧光RT‑PCR检测方法，其中使用的检测新城疫病毒引物对和探针组，其特征在于，所述的引物对和探针组中，正向引物的序列为SEQ ID NO:1，反向引物的序列为SEQ ID NO:2；探针序列为SEQ ID NO:3。本发明专利技术提供一种基于分子生物学的快速检测新城疫病毒的方法，以实现对新城疫病毒进行安全、特异、快速、灵敏、简单、高通量的快速检测，从而弥补现有传统检测技术的不足。并且此方法非常适用于高通量检测，能够同时检测大量样品并快速判定结果，而且使用TaqMan荧光探针，避免传统SYBR Green染色法造成的污染和低特异性。

Detection of a New Castle Disease Virus by Fluorescence Quantitative RT-PCR

The object of the present invention is to provide a fluorescent RT_PCR method for detection of Newcastle disease virus, in which a pair of primers and a probe group for detection of Newcastle disease virus are used. The primer pair and a probe group are characterized by SEQ ID NO:1 for forward primers, SEQ ID NO:2 for reverse primers and SEQ ID NO:3 for probe sequences. The invention provides a method for rapid detection of Newcastle disease virus based on molecular biology, in order to achieve a safe, specific, fast, sensitive, simple and high throughput rapid detection of Newcastle disease virus, thereby making up for the shortcomings of the existing traditional detection technology. This method is very suitable for high throughput detection. It can simultaneously detect a large number of samples and quickly determine the results. Moreover, TaqMan fluorescent probe is used to avoid pollution and low specificity caused by traditional SYBR Green staining.

【技术实现步骤摘要】
一种新城疫病毒的荧光定量RT-PCR检测方法
本专利技术属于荧光定量RT-PCR检测
，具体涉及一种新城疫病毒荧光定量RT-PCR的检测方法，包括鉴定新城疫病毒的引物对和探针。
技术介绍
新城疫(Newcastledisease，ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起禽类的一种急性、败血性和高度接触性传染病，主要表现为浆膜黏膜出血、呼吸困难、下痢及神经紊乱等。ND传播速度快、致死率高、接触传染性强、分布广泛，对禽类养殖业造成严重威胁，所以世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类传染病。该病对我国的养禽业造成重大的经济损失。该病能引起鸡、火鸡、鹌鹑等多种禽类的感染和死亡，是危害禽类最主要的疾病之一。新城疫病毒还被认为是一种人畜共患病毒，其潜伏期约为48h，主要引起急性结膜炎。新城疫病毒属禽副黏病毒1型，有囊膜，基因组为单股负链RNA，大小约15kb，编码6种蛋白质，包括RNA聚合酶(L)、血凝素一神经氨酸酶蛋白(HN)、融合蛋白(F)、基质蛋白(M)、磷蛋白(P)和核蛋白(N)。根据病毒基因组长度、F基因和L基因序列，NDV可分为两大分支为C本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测新城疫病毒引物对和探针组，其特征在于，所述的引物对和探针组对的序列信息如下：正向引物的序列为SEQ ID NO:1；反向引物的序列为SEQ ID NO:2；探针序列为SEQ ID NO:3。

【技术特征摘要】
1.一种检测新城疫病毒引物对和探针组，其特征在于，所述的引物对和探针组对的序列信息如下：正向引物的序列为SEQIDNO:1；反向引物的序列为SEQIDNO:2；探针序列为SEQIDNO:3。2.如权利要求1所述的引物对和探针组，其特征在于，所述的探针的5′端进行羧基荧光素FAM标记，3′端进行淬灭基团BHQ1标记。3.权利要求1或2所述的引物对和探针组在制备检测新城疫病毒的制品中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的制品为荧光定量RT-PCR检测试剂盒。5.一种荧光定量RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包含有权利要求1或2所述的引物对和探针组。6.一种检测临床样品中新城疫病毒的荧光定量RT-PCR检测方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)配制荧光定量RT-PCR反应体系反应液每管25μL，含有2×OneStepRT-PCRBufferⅢ12.5μL，5U/μLTaKaRaExTa...

【专利技术属性】
技术研发人员：王素春，王楷宬，黄保续，庄青叶，李昂，
申请(专利权)人：中国动物卫生与流行病学中心，
类型：发明
国别省市：山东,37