新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用。所述的新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系，命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT‑NBSC，其保藏编号CCTCC NO：C2018201。试验发现，hTERT‑NBSC可以连续传代65代以上，且生长增殖特性保持不变。该细胞系对接种ORFV较为敏感，可以高效增殖ORFV病毒，且可以保证病毒的均一、稳定。用该细胞系所增殖的ORFV病毒滴度与新生牛睾丸支持细胞相当，且细胞分种率高于NBSC，分种率可达1:3。同时利用该传代细胞系来制备疫苗，简化了生产工艺、缩短了生产周期，降低了生产成本，同时还保证了制备得到的羊传染性脓疱病疫苗的质量稳定。因此，本发明专利技术的提出对羊传染性脓疱病疫苗的规模化生产提供了新的技术手段。

Establishment and application of immortalized bovine testicular Sertoli cell line

The invention discloses an immortalized bovine testicular Sertoli cell line and its establishment method and application. The immortalized bovine testicular Sertoli cell line is named as the immortalized bovine testicular Sertoli cell line hTERT_NBSC, and its preservation number is CCTCC NO:C2018201. It was found that hTERT NBSC could be subcultured continuously for more than 65 generations, and the growth and proliferation characteristics remained unchanged. The cell line is sensitive to ORFV inoculation, and can efficiently proliferate ORFV, and ensure the uniformity and stability of the virus. The viral titer of ORFV proliferated by this cell line was similar to that of Sertoli cells of newborn bovine testis, and the cell differentiation rate was higher than that of NBSC, and the cell differentiation rate could reach 1:3. At the same time, the cell line was used to prepare the vaccine, which simplified the production process, shortened the production cycle and reduced the production cost. At the same time, the quality of the vaccine was stable. Therefore, the invention provides a new technical means for the large-scale production of sheep infectious pustulosis vaccine.

【技术实现步骤摘要】
新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和应用
本专利技术涉及一种永生化细胞系及其建立方法和应用，特别涉及一种新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系及其建立方法和在培养、增殖培养羊传染性脓疱病毒中的应用。本专利技术属于细胞工程

技术介绍
睾丸支持细胞(Sertolicell,SC)是生精小管基膜上的上皮细胞，是生精小管内唯一的体细胞。在结构上为生精细胞的分化成熟提供支架，为生精细胞提供支持、营养和保护作用，被称为生精细胞的“保姆细胞”。在精子的分化成熟过程中，支持细胞不但向生精上皮传递促性腺激素，控制生精细胞的有丝分裂、减数分裂及后续分化一系列动态过程，而且对精细胞具有支持、营养、吞噬、释放、分泌等多种功能。其分泌的雄激素结合蛋白(androgenbindingprotein,ABP)、苗勒氏管抑制物质(mullerianinhibitingsubstance,MIS)、抑制素(inhibin)、激活素(activin)、转化生长因子β(TGFβ)、胰岛素样生长因子1(IGF1)、白介素1和6(IL1，IL6)、生精生长因子(spermatogenicgrowthfactor,S本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系，命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT‑NBSC，该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，地址在武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：C2018201，保藏时间为2018年10月12日。

【技术特征摘要】
1.新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系，命名为新生牛睾丸支持细胞永生化细胞系hTERT-NBSC，该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，地址在武汉大学，其保藏编号为CCTCCN...

【专利技术属性】
技术研发人员：王光祥，张志东，王艳华，秦晓东，李彦敏，杨能能，贾宁，苏雅杰，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃,62