【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】工程化β-葡糖苷酶和葡糖基化方法本申请要求2016年6月15日提交的美国临时专利申请序列第62/350,625号的优先权,该美国临时专利申请为了所有目的特此通过引用全文并入。专利
本专利技术提供了工程化的β-葡糖苷酶(BGL)酶、具有BGL活性的多肽、和编码这些酶的多核苷酸、以及包含这些多核苷酸和多肽的载体和宿主细胞。本专利技术还提供了包含这些酶的组合物,以及使用工程化BGL酶制备带有β-葡萄糖键的产物的方法。对作为ASCII文本文件提交的“序列表”、表格或计算机程序列表附录的引用序列表的正式副本作为ASCII格式化文本文件经由EFS-Web与说明书同时提交,文件名为“CX8-157USP1_ST25.txt”,创建日期为2016年6月15日,且大小为1,110,016字节。经由EFS-Web提交的序列表为说明书的一部分并且通过引用以其整体并入本文。专利技术背景糖苷水解酶(糖苷酶、糖基水解酶)在复杂糖中糖苷键的水解中起作用。它们是自然界中具有不同作用的常见酶。它们通常基于它们的底物命名。β-葡糖苷酶(BGL)(EC3.2.1.21;β-D-葡糖苷葡糖水解酶)在 ...
【技术保护点】
1.一种非天然存在的β‑葡糖苷酶变体,所述非天然存在的β‑葡糖苷酶变体与SEQ ID NO:12、14、16、18和/或20具有至少80%序列同一性。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.15 US 62/350,6251.一种非天然存在的β-葡糖苷酶变体,所述非天然存在的β-葡糖苷酶变体与SEQIDNO:12、14、16、18和/或20具有至少80%序列同一性。2.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体在选自31、32、34、36、37、38、57/91、58、59、60、61、62、62/403、66、70、89、89/187、91/595、124/297、125、126/188、133、138/296、147、150、184、186、187、230、231、233、266、296、297、403、405、449、450、492、590和601的一个或更多个位置包含至少一个取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。3.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体包含选自31C/G、V32G/P/S、34I/P、36P、37K/W、38E、57R/91P、58P、59R、60C/R/V、61R、62N、62P/403R、66G/N、70W、89L、89S/187R、91G/595V、124D/297P、125G、126V/188R、133G/R、138G/296S、147L、150H/L/M/P/T、184A/R、186E、187G/N/Y、230F/H/I、231G/R、233L/P/Q、266F/G、296R/T、297R、403E/P、405R、449G/P、450G、492P、590W、601A/E/L、601E和601L的至少一种取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。4.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体包含选自P31C/G、V32G/P/S、G34I/P、I36P、T37K/W、T38E、G57R/I91P、L58P、F59R、N60C/R/V、L61R、K62N、K62P/W403R、R66G/N、V70W、D89L、D89S/H187R、I91G/G595V、A124D/V297P、S125G、A126V/F188R、F133G/R、D138G/M296S、R147L、E150H/L/M/P/T、C184A/R、K186E、H187G/N/Y、M230F/H/I、A231G/R、F233L/P/Q、Y266F/G、M296R/T、V297R、W403E/P、V405R、M449G/P、F450G、S492P、R590W和F601A/E/L的至少一种取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。5.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体在选自32、34、36、57/91、58、59、60、62、62/403、66、89、89/187、91/595、124/297、126/188、133、138/296、147、150、184、186、187、230、231、233、266、296、297、403、405、449、492、590和601的一个或更多个位置包含至少一个取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。6.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体包含选自32G/P/S、34I/P、36P、57R/91P、58P、59R、60C/R/V、62N、62P/403R、66N、89L、89S/187R、91G/595V、124D/297P、126V/188R、133G/R、138G/,296S、147L、150H/L/M/P/T、184R、186E、187G、187N/Y、230F/H/I、231G/R、233P/Q、266F/G、296R/T、297R、403E/P、405R、M449G/P、492P、590W和601A/E/L的至少一种取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。7.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体包含选自V32G/P/S、G34I/P、I36P、G57R/I91P、L58P、F59R、N60C/R/V、K62N、K62P/W403R、R66N、D89L、D89S/H187R、I91G/G595V、A124D/V297P、A126V/F188R、F133G/R、D138G/M296S、R147L、E150H/L/M/P/T、C184R、K186E、H187G/N/Y、M230F/H/I、A231G/R、F233P/Q、Y266F/G、M296R/Y、V297R、W403E/P、V405R、M449G/P、S492P、R590W和F601A/E/L的至少一种取代,其中所述位置参考SEQIDNO:12编号。8.如权利要求1所述的非天然存在的β-葡糖苷酶变体,其中所述变体在选自15、16、16/84、17、19、21、35、45、55、76、79、121、164、168、168/256、170、179、215/413、221、221/311、225、247、313、351、356、402、404、405、409、411、...
【专利技术属性】
技术研发人员:杰克·梁,乔纳森·弗罗姆,斯蒂芬妮·苏·加兰妮,尼基·德拉斯,拉维·大卫·加西亚,
申请(专利权)人:科德克希思公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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