The invention relates to an ELONA detection method and a kit for lactoferrin by nucleic acid aptamer. Further, the kit of the present invention contains two nucleic acid adapters for identifying different immune sites of lactoferrin. On the other hand, the present invention relates to the use of two nucleic acid aptamers for identifying different immune sites of lactoferrin in ELONA kits for detecting lactoferrin.
【技术实现步骤摘要】
用于检测乳铁蛋白的ELONA适配体及其应用
本专利技术设计使用核酸适配体来检测乳铁蛋白的ELNOA方法和试剂盒。进一步地，本专利技术涉及检测牛奶、奶粉等乳制品中的乳铁蛋白的ELONA方法和试剂盒。
技术介绍
乳铁蛋白(Lactoferrin，简写为LF)是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有光谱抗菌，抗病毒感染作用，能调节体内铁的平衡。能够促进细胞的生长，调节机体的免疫功能，增强机体抗病能力。乳铁蛋白广泛分布于哺乳动物乳汁中，人乳中乳铁蛋白浓度约为1.0-3.2mg/mL，约是牛乳中的10倍。它被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和具有潜力的食品和饲料添加剂，国家食品安全标准GB14880也将其列为营养强化剂。目前市场上常见的乳铁蛋白主要是从牛乳中提取的乳铁蛋白，然后将其添加至配方乳粉、营养食品及保健品等，乳铁蛋白的含量已经成为这些相关产品质量的主要指标。酶联免疫吸附技术(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)目前广泛应用于蛋白分子的检测。但是传统的基于抗体的ELISA检测技术有一些不足，例如抗体需要使用严格的低温保存条...
【技术保护点】
1.用于检测乳铁蛋白的ELONA适配体，其特征在于，包括SEQ ID NO.1～2所示的核苷酸序列。
【技术特征摘要】
1.用于检测乳铁蛋白的ELONA适配体，其特征在于，包括SEQIDNO.1～2所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的用于检测乳铁蛋白的ELONA适配体，其特征在于，SEQIDNO.1～2所示的核苷酸序列的3’端利用生物素标记。3.一种用于检测乳铁蛋白的ELONA方法，该方法包括以下步骤：(1)获得待测样品；(2)将包被缓冲液加入固体支持物中过夜孵育；(3)封闭；(4)将核酸适配体A加入到封闭处理后的固体支持物中，反应，然后清洗；(5)将待测样品、标准品分别加入固体支持物；并加入核酸适配体B与酶标试剂反应，然后清洗；(6)加入显色液避光反应，最后加入终止液终止反应，并检测待测样品在450nm处的吸光值；所述核酸适配体A的序列如SEQIDNO.1所示；所述核酸适配体B的序列如SEQIDNO.2所示；。4.根据权利要求3所述的用于检测乳铁蛋白的ELONA方法，其特征在于，步骤(2)中，所述包被缓冲液的配方如下：Na2CO31.59g/L，NaHCO32.94g/L。5.根据权利要求3或4所述的用于检测乳铁蛋白的ELONA方法，其特征在于，所述包被缓冲液的pH值为7.0～10.0。6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：李周敏，贾文超，
申请(专利权)人：南京祥中生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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