新型SsCas12a蛋白在核酸检测方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了新型SsCas12a蛋白在核酸检测方面的应用。本发明专利技术首次研究发现SsCas12a蛋白具有DNA切割活性，因此可作为新型CRISPR/SsCas12a系统应用于核酸检测、基因编辑、基因修饰，为基于Cas12a的基因编辑、修饰及分子检测提供了一种新的必要工具。同时本发明专利技术提供了一种包括SsCas12a蛋白和gRNA的核酸检测系统和试剂盒，可在25℃‑37℃的室温下实现高灵敏、高精度的分子检测，检测特异性好、灵敏度高，成本低廉、操作方便、快捷、应用范围广，在核酸检测方面具有很好的应用前景。

Application of New SsCas12a Protein in Nucleic Acid Detection

The invention discloses the application of a novel SsCas12a protein in nucleic acid detection. For the first time, the SsCas12a protein has DNA cleavage activity, so it can be used as a new CRISPR/SsCas12a system for nucleic acid detection, gene editing and gene modification, and provides a new necessary tool for gene editing, modification and molecular detection based on Cas12a. At the same time, the invention provides a nucleic acid detection system and kit including SsCas12a protein and gRNA, which can realize high sensitivity and high precision molecular detection at room temperature of 25

【技术实现步骤摘要】
新型SsCas12a蛋白在核酸检测方面的应用
本专利技术属于分子生物学
更具体地，涉及新型SsCas12a蛋白在核酸检测方面的应用。
技术介绍
为实现病原体等的高灵敏、高精度检测，开发低成本、准确、高效、快速的诊断方法非常重要。在病原体检测方面，使用经典的基于培养的表型试验测定易感性或抗性、ELISA等是临床病原体检测中使用的一般方法。但是由于病原体并不完全能在体外进行培养，其相关蛋白、小分子等检测灵敏度有限，传统的检测方法耗时并且准确性不高。而基于分子的诊断方法可以提高检测的速度和准确性，这对医院和社区环境中的感染控制、预防、治疗很有意义。目前用于如病原体检测等的技术有：(1)分离培养技术：病原体分离培养，特别是对于病原微生物和病毒的分离培养，是早期的病原体金标准鉴定技术。该方法存在对的问题主要有：分离培养耗时长，往往需要几天时间，无法实现短时间内迅速得到检测结果，且必须高度依赖检测实验室硬件及实验操作人员条件，且不适用于目前未有成熟培养手段的病原微生物和病毒的检测。(2)免疫学检测：以基于抗原-抗体的免疫反应，识别病原相关蛋白，从蛋白水平对病原体进行检测。该方法存在检测灵本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于CRISPR/Cas12a的核酸检测系统，其特征在于，包括SsCas12a蛋白和gRNA。

【技术特征摘要】
1.一种基于CRISPR/Cas12a的核酸检测系统，其特征在于，包括SsCas12a蛋白和gRNA。2.根据权利要求1所述的核酸检测系统，其特征在于，所述gRNA的设计原则为：在选取gRNA靶向序列时，靶向序列5’端应具有5’-TTTN-3’序列，且靶向序列本身不形成稳定二级结构、靶向序列和其余序列间不形成稳定二级结构。3.根据权利要求2所述的核酸检测系统，其特征在于，当靶序列如SEQIDNO.2所示时，gRNA序列如SEQIDNO.3所示。4.根据权利要求1所述的核酸检测系统，其特征在于，SsCas12a蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.6所示。5.一种基于权利要求1～3任一所述系统的核酸检测方法，其特征在于，是利用SsCas12a蛋白和对应...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈翀，刘华勇，胡洋，
申请(专利权)人：广州普世利华科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44