一种含有人工标签的杂交探针制造技术

本发明专利技术公开了一种含有人工标签的杂交探针。本发明专利技术通过在传统的两条杂交探针(上游探针和下游探针)基础上引入新的不与扩增区域杂交的人工标签序列，并使用额外的专门与人工标签区域杂交的探针提供荧光供体或受体基团。因为人工标签序列杂交区域的Tm值低于前两条杂交探针与扩增区域杂交部分的Tm值，因此整个体系的Tm值仅由人工标签部分的Tm值决定，从而使熔解曲线分析时的Tm值保持恒定，不受扩增区域SNP、缺失、插入等突变的影响。

A Hybrid Probe Containing Artificial Labels

The invention discloses a hybridization probe containing an artificial label. The invention introduces a new artificial tag sequence without hybridization with the amplified region on the basis of two traditional hybridization probes (upstream probe and downstream probe), and provides fluorescent donor or receptor groups with additional probes specially hybridized with the artificial tag region. Because the Tm value of the hybridization region of the artificial label sequence is lower than that of the hybridization region of the first two hybridization probes and the amplification region, the Tm value of the whole system is only determined by the Tm value of the artificial label part, so that the Tm value of the melting curve analysis is kept constant and is not affected by mutations such as SNP, deletion and insertion in the amplification region.

【技术实现步骤摘要】
一种含有人工标签的杂交探针
：本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种含有人工标签的杂交探针。
技术介绍
：当一个荧光分子(又称为供体分子)的荧光光谱与另一个荧光分子(又称为受体分子)的激发光谱相重叠时，供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光，同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减，这种现象称为荧光共振能量转移(FRET)现象。FRET程度与供、受体分子的空间距离紧密相关，一般为7～10nm时即可发生FRET，随着距离延长，FRET呈显著减弱。FRET杂交探针可用于对待测序列进行检测(Matthews,JAAnalyticalBiochemistry169(1988)1-25)，其特征为同时使用与待测序列同一链互补相邻位点互补的两个单链杂交探针对，两个探针用不同荧光成分标记，当特定波长激发时，第一种成分(供体)将吸收的能量转移到第二种成分(受体)上，通过检测第二种成分的荧光发射量对待测序列的量进行检测。当退火到靶序列时，杂交探针之间必须非常接近，通常第一个探针标记的3`端和第二个探针的5`端间隙为1-5个碱基，约10-100埃。除进行实时PCR外，FRET杂交探针还可用于熔解曲线分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含有人工标签的杂交探针，包括上游探针和下游探针，其特征在于，包括：a、在上游探针的3’端连有荧光受体基团或荧光供体基团，在下游探针的5’端连有人工标签序列，还含有第三探针，所述的第三探针是与人工标签序列杂交的探针，第三探针的5’端连有荧光供体基团或荧光受体基团，所述的人工标签序列不与上游探针、下游探针和扩增模板杂交，人工标签序列杂交区域的Tm值低于上游探针和下游探针与扩增区域杂交部分的Tm值；或b、在上游探针的3’端连有人工标签序列，在下游探针的5’端连有荧光受体基团或荧光供体基团，还含有第三探针，所述的第三探针是与人工标签序列杂交的探针，第三探针的5’端连有荧光供体基团或荧光受体基团...

【技术特征摘要】
1.一种含有人工标签的杂交探针，包括上游探针和下游探针，其特征在于，包括：a、在上游探针的3’端连有荧光受体基团或荧光供体基团，在下游探针的5’端连有人工标签序列，还含有第三探针，所述的第三探针是与人工标签序列杂交的探针，第三探针的5’端连有荧光供体基团或荧光受体基团，所述的人工标签序列不与上游探针、下游探针和扩增模板杂交，人工标签序列杂交区域的Tm值低于上游探针和下游探针与扩增区域杂交部分的Tm值；或b、在上游探针的3’端连有人工标签序列，在下游探针的5’端连有荧光受体基团或荧光供体基团，还含有第三探针，所述的第三探针是与人工标签序列杂交的探针，第三探针的5’端连有荧光供体基团或荧光受体基团，所述的人工标签序列不与...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄劭，宋方丽，张家剑，方健，
申请(专利权)人：黄劭，
类型：发明
国别省市：江西,36