The present invention provides a method for isolation and culture of rat olfactory ensheathing cells, which includes: taking out female rats in the middle and late pregnancy, taking out embryonic mice, taking out the olfactory bulb of embryonic mice, cutting the olfactory bulb tissue of the embryonic mice, adding the complete culture medium containing serum, filtering with 200 mesh screen, sucking out tissue fluid, centrifuging in centrifugal tube, discarding supernatant, re-suspending, and adding the complete culture medium to adjust cell concentration three times. OECs were cultured in a constant temperature incubator and then purified by differential adherence method. The method for isolating and culturing rat olfactory ensheathing cells provided by the invention has the advantages of large number, high density and strong biological activity.
【技术实现步骤摘要】
一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法
本专利技术涉及医药生物领域，尤其涉及一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法。
技术介绍
嗅球区不同于中枢神经系统的其他部位，该区具有很强的神经再生能力，原因在于这个区域存在一种特殊的胶质细胞——嗅鞘细胞（olfactoryensheathingcells,OECs），其能为受损神经组织的修复创造适宜的环境。通过OECs移植来治疗各种神经系统疾病已成为神经修复学科的一个热点。获取大量的，较高纯度的，生物活性良好的OECs，是实验研究成功的关键，也是临床应用的前提。现有技术采用人胚胎、雄性大鼠或者新生大鼠分离纯化嗅鞘细胞，但是分离培养的嗅鞘细胞单位面积密度小，生物学活性不强。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，分离培养的嗅鞘细胞数量多、密度大，生物学活性强。为了解决上述技术问题，本专利技术提供的大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法是这样实现的：一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，包括：取怀孕中后期雌鼠，取出胚鼠，取出所述胚鼠的嗅球，剪碎所述嗅球组织，加入含血清的完全培养基，使用200目筛网过滤，吸出组织液加入离心管中离心、弃上清...
【技术保护点】
1.一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，其特征在于，包括：取怀孕中后期雌鼠，取出胚鼠，取出所述胚鼠的嗅球，剪碎所述嗅球组织，加入含血清的完全培养基，使用200目筛网过滤，吸出组织液加入离心管中离心、弃上清、重悬，重复三次；加入完全培养基调整细胞浓度，置于恒温培养箱中培养；然后使用差速贴壁法纯化嗅鞘细胞。
【技术特征摘要】
1.一种大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，其特征在于，包括：取怀孕中后期雌鼠，取出胚鼠，取出所述胚鼠的嗅球，剪碎所述嗅球组织，加入含血清的完全培养基，使用200目筛网过滤，吸出组织液加入离心管中离心、弃上清、重悬，重复三次；加入完全培养基调整细胞浓度，置于恒温培养箱中培养；然后使用差速贴壁法纯化嗅鞘细胞。2.根据权利要求1所述的大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，其特征在于，两次差速贴壁法纯化嗅鞘细胞后，再次进行差速贴壁时，在嗅鞘细胞再次贴壁后，加入阿糖胞苷抑制成纤维细胞的生长。3.根据权利要求1或2所述的大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，其特征在于，所述使用100目-300目筛网过滤后，使用吸管上下吹打组织液，使之成为组织悬液。4.根据权利要求1所述的大鼠嗅鞘细胞的分离培养方法，其特征在于，所述吸出组织液加入离心管中离心为：组织液加入15ml离心管，转速1...
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