一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法技术

本发明专利技术涉及一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法，以磷酸酯类载体替代固相树脂，在脱水偶联剂的作用下与保护甘氨酸(Fmoc‑Gly‑OH)的C‑端连接；借助磷酸酯类载体在不同溶剂系统中易结晶沉淀的特性，可将生成物与其他杂质分离，经过多肽偶联后采用侧链脱、剪除载体和谷胱甘肽的分离纯化得到谷胱甘肽结晶。与目前已有的合成方法相比，本发明专利技术兼备了液相和固相合成法的优点，可以更加简便、快捷、节约、高效地合成制备谷胱甘肽，而且磷酸酯类载体可以回收并直接再利用，降低原材料浪费，减少废弃物污染，节约成本，利于环保。

A Total Synthesis Method of Glutathione Based on Phosphate Carriers

The present invention relates to a total synthesis method of glutathione based on phosphate carrier, in which phosphate carrier is used instead of solid resin to connect with C terminal of Fmoc Gly OH under the action of dehydration coupling agent, and the product can be separated from other impurities by means of the characteristics of phosphate carrier which is easy to crystallize and precipitate in different solvent systems. The crystallization of glutathione was obtained by the separation and purification of chain-breaking, cutting carrier and glutathione. Compared with the existing synthesis methods, the present invention has the advantages of both liquid and solid phase synthesis methods, and can synthesize and prepare glutathione more simply, quickly, economically and efficiently. Moreover, the phosphate carrier can be recycled and reused directly, reducing raw material waste, reducing waste pollution, saving cost and benefiting environmental protection.

【技术实现步骤摘要】
一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法
本专利技术属于有机化学与多肽合成领域，，涉及一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法。本专利技术以磷酸酯类小分子为载体替代固相树脂载体，辅助分离纯化，兼备了液相和固相合成法的优点，可以更加简便、快捷、节约、高效地合成制备谷胱甘肽及其衍生物，而且磷酸酯类载体可以回收并直接再利用，降低原材料浪费，减少废弃物污染，节约成本，利于环保。
技术介绍
1888年，谷胱甘肽(GSH)首先从酵母中分离出来。日本1983年进行了含量较多的GSH酵母的生产，其后又研究了GSH提取、分离技术及分析检测方法。目前国外实现了GSH规模生产。世界主要的氨基酸制造商Kyowa，Aji-nomoto和Degussa等都相继投巨资于氨基酸的研究与开发，仅Kyowa1998年氨基酸的研究与开发就耗费达1.9亿美元，而GSH是其重点之一，Kyowa目前是GSH主要的供应商。目前GSH的主要生产方法有：萃取法、发酵法、酶法和化学合成法。1.萃取法：见文献：Ikeno,Y.；Tanno,K.L；Omori,I.Glutathione.1976,JPl87299.Kono,G.；Har本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法，其特征在于步骤如下：步骤1、载体偶联：以磷酸酯类载体替代固相树脂，在脱水偶联剂的作用下与氨基酸在0～50℃下搅拌反应1～3小时，得到生成物A；所述氨基酸与磷酸酯类载体的摩尔比为1～3:1；所述脱水偶联剂为1︰1摩尔比的脱水偶联活化剂和碱性物质；所述氨基酸采用芴甲氧羰基(Fmoc)保护的甘氨酸(Fmoc‑Gly‑OH)，保护甘氨酸Fmoc‑Gly‑OH的C‑端连接；步骤2、分离纯化：向生成物A加入极性小的烷烃或醚类溶剂，借助磷酸酯类载体在不同溶剂系统中易结晶沉淀的特性，可将生成物A与其他杂质分离；对分离后的生成物A进行过滤和洗涤或重结晶操作得到纯化的...

【技术特征摘要】
1.一种基于磷酸酯类载体的谷胱甘肽全合成方法，其特征在于步骤如下：步骤1、载体偶联：以磷酸酯类载体替代固相树脂，在脱水偶联剂的作用下与氨基酸在0～50℃下搅拌反应1～3小时，得到生成物A；所述氨基酸与磷酸酯类载体的摩尔比为1～3:1；所述脱水偶联剂为1︰1摩尔比的脱水偶联活化剂和碱性物质；所述氨基酸采用芴甲氧羰基(Fmoc)保护的甘氨酸(Fmoc-Gly-OH)，保护甘氨酸Fmoc-Gly-OH的C-端连接；步骤2、分离纯化：向生成物A加入极性小的烷烃或醚类溶剂，借助磷酸酯类载体在不同溶剂系统中易结晶沉淀的特性，可将生成物A与其他杂质分离；对分离后的生成物A进行过滤和洗涤或重结晶操作得到纯化的生成物A；步骤3、脱除N-端Fmoc：将纯化的生成物A采用脱Fmoc试剂处理，在10～50℃下搅拌反应0.5～2小时得到生成物B；向生成物B加入极性小的烷烃或醚类溶剂，借助磷酸酯类载体在不同溶剂系统中易结晶沉淀的特性，可将生成物B与其他杂质分离；对分离后的生成物B进行过滤和洗涤或重结晶操作得到纯化的生成物B；步骤4：重复步骤1～步骤3，所述氨基酸采用半胱氨酸[Fmoc-Cys(Trt)-OH]；再重复步骤1～步骤3，所述氨基酸采用γ-谷氨酸[Fmoc-Glu(OH)-OtBu]，依次偶联上侧链保护的半胱氨酸[Fmoc-Cys(Trt)-OH]和γ-谷氨酸[Fmoc-Glu(OH)-OtBu]，脱Fmoc后得到化合物F；步骤3脱Fmoc后得到化合物F为多肽偶联；步骤5、侧链脱保护：以三氟乙酸的有机溶液为侧链脱保护剂，反应条件为通氮气或氩气保护，-5～30℃下，搅拌1～2小时，同时脱除侧链上的保护基团Trt和tBu，得到化合物G；所述三氟乙酸的有机溶液中三氟乙酸与溶剂的体积比为1:1～4；步骤6、剪除载体：将化合物G溶于溶剂中，以氢氧化锂的水溶液或钯-碳催化加氢作为剪除反应试剂，反应条件为通氮气或氩气保护，15～40℃下，搅拌1～3小时；反应完毕后，旋蒸回收溶剂；合并有机相回收磷酸酯类载体：残留溶液以乙酸乙酯萃取并与水相分离，萃取时加入极性小的烷烃或醚类溶剂；所述加入氢氧化锂水溶液或钯-碳催化加氢，氢氧化锂的加量为化...

【专利技术属性】
技术研发人员：钦传光，李海迪，晁洁，金雅涛，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61