一种金属离子沉淀-环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种金属离子沉淀‑环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法。该方法包括步骤：1)海稻米胚粉碎，低温冻干到含水量5‑8％，采用超临界二氧化碳流体萃取法脱除海稻米胚脂类物质；2)脱脂海稻米胚热水浸提，取上清浓缩得谷胱甘肽粗品；3)谷胱甘肽粗品溶于热水，加醋酸调节溶液pH4‑5，缓慢加入醋酸锌，100‑150rpm搅拌反应，生成谷胱甘肽锌盐沉淀；维持pH4‑5保温30℃反应4h充分反应陈化；4)高速离心，去上清，取沉淀投入0.5％EDTA溶液，在室温下搅拌溶解；5)缓慢加入10％β‑环糊精水溶液，加热到45℃，搅拌产生沉淀，离心弃去沉淀，上清液减压浓缩即得纯化的谷胱甘肽。超临界萃取脱脂不使用常见的石油醚正己烷等有机溶剂，避免有机残留污染，防止海稻米胚脂类物质干扰分离结果。

Extraction and Purification of Glutathione by Metal Ion Precipitation-Cyclodextrin Inclusion

The invention discloses a method for extracting and purifying glutathione by metal ion precipitation and cyclodextrin inclusion. The method comprises the following steps: 1) crushing rice embryos, freeze-drying at low temperature to water content of 5_8%, removing lipids from rice embryos by supercritical carbon dioxide fluid extraction (SCFE); 2) extracting degreased rice embryos in hot water and extracting supernatant to concentrate glutathione crude products; 3) dissolving glutathione crude products in hot water, adding acetic acid to adjust solution pH 4_5, slowly adding zinc acetate and stirring reaction at 100_150m; Formation of glutathione zinc salt precipitation; Maintain pH 4 5 holding temperature 30 reaction for 4 hours to fully react aging; 4) High-speed centrifugation, supernatant removal, precipitation into 0.5% EDTA solution, stirring and dissolving at room temperature; 5) Slowly adding 10% beta cyclodextrin aqueous solution, heating to 45 C, stirring to produce precipitation, centrifugal discarding precipitation, supernatant decompression concentration, and purification of glutathione. Supercritical extraction degreasing does not use common organic solvents such as petroleum ether n-hexane to avoid organic residual contamination and prevent rice germ lipids from interfering with the separation results.

【技术实现步骤摘要】
一种金属离子沉淀-环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法
本专利技术涉及一种纯化谷胱甘肽的方法，属于生物化工
，特别是涉及一种金属离子沉淀-环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法。
技术介绍
谷胱甘肽(glutathione，GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸结合，含有巯基的的三肽，具有抗氧化作用和整合解毒作用。半胱氨酸上的巯基为谷胱甘肽活性基团(故谷胱甘肽常简写为G-SH)，易与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、芥子气，铅、汞、砷等重金属)等结合，而具有整合解毒作用。故谷胱甘肽(尤其是肝细胞内的谷胱甘肽)能参与生物转化作用，从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外。谷胱甘肽还能帮助保持正常的免疫系统的功能。谷胱甘肽为胞内产物,须从细胞中抽提出谷胱甘肽。提取谷胱甘肽有以下几种方法:热水抽提、甲酸抽提、乙醇抽提、硫酸抽提、三氯乙酸抽提、有机酸混合抽提、低温抽提等。现有一种常规工艺采用氧化亚铜和谷胱甘肽反应沉淀，后续沉淀细小难分离，且铜盐污染难以除尽，最终产品含有较高的铜离子，不利于健康产品应用。因此，迫切需要出现一种采用超临界二氧化碳流体萃取法脱除海稻米胚脂类物质，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种金属离子沉淀‑环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法，其特征在于，该方法包括步骤：1)海稻米胚粉碎，低温冻干到含水量5‑8％，采用超临界二氧化碳流体萃取法脱除海稻米胚脂类物质；2)脱脂海稻米胚热水浸提，取上清浓缩得谷胱甘肽粗品；3)谷胱甘肽粗品溶于热水，加醋酸调节溶液pH4‑5，缓慢加入醋酸锌，生成谷胱甘肽锌盐沉淀；维持pH4‑5保温30℃，反应4h充分反应陈化；4)高速离心，去上清，取沉淀投入0.5％EDTA溶液，在室温下搅拌溶解2h；5)缓慢加入10％β‑环糊精水溶液，加热到45℃，搅拌产生沉淀，离心弃去沉淀，上清液减压浓缩即得纯化的谷胱甘肽。

【技术特征摘要】
1.一种金属离子沉淀-环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法，其特征在于，该方法包括步骤：1)海稻米胚粉碎，低温冻干到含水量5-8％，采用超临界二氧化碳流体萃取法脱除海稻米胚脂类物质；2)脱脂海稻米胚热水浸提，取上清浓缩得谷胱甘肽粗品；3)谷胱甘肽粗品溶于热水，加醋酸调节溶液pH4-5，缓慢加入醋酸锌，生成谷胱甘肽锌盐沉淀；维持pH4-5保温30℃，反应4h充分反应陈化；4)高速离心，去上清，取沉淀投入0.5％EDTA溶液，在室温下搅拌溶解2h；5)缓慢加入10％β-环糊精水溶液，加热到45℃，搅拌产生沉淀，离心弃去沉淀，上清液减压浓缩即得纯化的谷胱甘肽。2.根据权利要求1所述的金属离子沉淀-环糊精包合提取纯化谷胱甘肽的方法，其特征在于：步骤1)中，海稻米...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕应年，罗辉，梁力中，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44