一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法技术

本发明专利技术提供了一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，包括以下步骤：步骤一、待测样品制取；步骤二、根据单因素多水平试验，筛选提取时间、超声功率、料液比的参数范围；步骤三、根据步骤二中的参数范围结合响应面法，以提取时间、超声功率、料液比三个因素为考察对象，以柴胡皂苷a提取率为评价指标，设计三因素三水平试验表；步骤四、根据步骤三进行实验，得到柴胡皂苷a的响应值；步骤五、进行多元线性回归和二次多元方程拟合并建立回归方程并分析得柴胡皂苷a的最佳提取工艺参数。通过单因素多水平结合响应面法确定的柴胡皂苷a的提取工艺参数，经多样品重复试验，柴胡皂苷a的提取率稳定性很好。

A Method for Optimizing the Ultrasound Extraction of Saikosaponin a

The invention provides a method for optimizing the ultrasonic extraction process of saikosaponin a to be measured, which includes the following steps: step 1, preparation of the sample to be measured; step 2, screening the parameters range of extraction time, ultrasonic power and material-liquid ratio according to single factor and multi-level test; step 3, combining response surface method with parameter range in step 2 to extract time, ultrasonic power and material-liquid ratio. Taking the extraction rate of saikosaponin a as the evaluation index, a three-factor and three-level test table was designed. Step 4: According to step 3, the response value of saikosaponin a was obtained. Step 5: Multivariate linear regression and quadratic multivariate equation fitting were used to establish regression equation and analyze the optimal extraction process parameters of saikosaponin a. The extraction process parameters of saikosaponin a were determined by single factor and multi-level combined with response surface methodology. After repeated experiments, the extraction rate of saikosaponin a was stable.

【技术实现步骤摘要】
一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法
本专利技术涉及中药药材及样品的超声提取工艺的优化方法，尤其涉及一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法。
技术介绍
柴胡是我国的传统中药，原名茈胡、地黛，始载于《神农本草经》，列为上品，至宋代《图经本草》始易名为柴胡。柴胡为伞形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡BupleurumscorzonerifoliumWilld.的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”和“南柴胡”，主产于内蒙古、河南、华北、东北、陕西及甘肃等地。柴胡药性辛、苦，微寒，归肝、胆、肺经，具有疏散退热，疏肝解郁，升举阳气等功效。柴胡皂苷是柴胡的主要化学指标和生物活性成分，柴胡皂苷具有a、b、c、d结构成分，现代研究表明柴胡皂苷中柴胡皂苷a、d的含量与柴胡的解热抗炎功效密切相关，因此所含柴胡皂苷a、d含量的多少常作为柴胡药材质量控制的重要指标。其中以柴胡皂苷a(C42H68O13)是活性最强的柴胡皂苷类成分之一，它除了具有抗炎、抗病毒、保肝的作用，还有降血脂。为有效控制药材质量，2015版中国药典中也对柴胡中柴胡皂苷的含量做具体的限定，即柴胡药材中含柴胡皂苷a(C42H68O13)和柴胡皂苷d(C42H68O13)的总量不得少于0.30％。柴胡药材的供试样品溶液制备方法为：取精密称定本品粉末(过四号筛)约0.5g，并置具塞锥形瓶中，加入含5％浓氨试液的甲醇溶液25ml，密塞，在30℃水温超声处理(功率200W，频率40kHz)30分钟，滤过，用甲醇20ml分2次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。一般，企业或者研究院校对中药材的质量检测要求较高，中药材中有效成分的准确测量，对于科研研发方面的工艺、技术等研究具有很重要的意义；对于企业的中药材的成本及产品的稳定性也有很重要；对于市场上药品的稳定性也有很重要。因此，企业或者研究院校均会在中国药典中柴胡质量检测的基础上做进一步的工艺优化，前有一般通过单因素试验或者正交试验设计对中药材的提取工艺做研究，而使用根据单因素或者正交试验设计优化的提取工艺的进行实验或者生产时，对实验结果或者生产数据的分析是，仍然存在分析结果不准确的问题。有鉴于此，有必要对现有技术中的柴胡药材中柴胡皂苷a的提取工艺予以改进，以解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，本专利技术通过单因素试验结合Box-Behnken响应面法对待测样品中的柴胡皂苷a的提取方法进行优化，通过优化后的方法对待测样品中柴胡皂苷a进行提取，经多试样的多次重复提取测定，其测定结果稳定。实现专利技术目的的技术方案如下：一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，包括以下步骤：步骤一：将柴胡药材或供试样品烘干并粗粉，过65目筛，摇匀，得待测样品；步骤二：对待测样品中柴胡皂苷a的提取进行预试验，得出影响柴胡皂苷a提取率的因素为提取时间、超声功率、料液比；并根据单因素多水平试验，筛选提取时间、超声功率、料液比的参数范围；步骤三：根据步骤二中各参数的筛选范围，结合响应面法，以提取时间、超声功率、料液比三个因素为考察对象，以柴胡皂苷a提取率为评价指标，设计三因素三水平试验表；步骤四：根据步骤三中实验设计表设计实验方案，并进行重复实验，得到柴胡皂苷a的响应值；步骤五：对步骤四中的实验数据进行多元线性回归和二次多元方程拟合并建立回归方程，得到以柴胡皂苷a提取率为响应值的相应曲面图，通过对试验结果分析，得到柴胡中柴胡皂苷a的最佳提取工艺参数。进一步的，在步骤二中，待测样品的提取时间参数范围为80～120min；超声功率参数范围为175～225W；料液比参数范围为20:1～40:1(ml：g)。进一步的，在步骤五中，回归方程如下：其中，其中Y表示柴胡皂苷a的含量，X1为提取时间(min)，X2为提取功率(W)，X3为料液比(ml/g)。进一步的，在步骤五中，对待测样品中柴胡皂苷a提取率影响影响顺序为：料液比＞提取时间＞提取功率。进一步的，在步骤五中，待测样品的提取时间为114min；超声功率为225W；料液比为40：1。进一步的，在步骤二中，待测样品中柴胡皂苷a的提取溶剂为5％氨水-甲醇溶液。与现有技术相比，本专利技术型的有益效果是：1.通过单因素多水平结合响应面法确定的柴胡皂苷a的提取工艺参数，经多样品重复试验，柴胡皂苷a的提取率稳定性很好。2.采用单因素多水平结合响应面法优化柴胡中柴胡皂苷a的超声提取工艺，旨在为进一步开发利用柴胡资源提供一定的理论依据。3.采用单因素多水结合平响应面法优化柴胡中柴胡皂苷a的超声提取工艺，也为其他中药材中有效成分的提取提供了参考价值。附图说明图1为本专利技术中料液比对柴胡皂苷a提取率的影响；图2为本专利技术中提取时间对柴胡皂苷a提取率的影响；图3为本专利技术中超声功率对柴胡皂苷a提取率的影响；图4为本专利技术中提取时间A和超声功率B对柴胡中柴胡皂苷a提取的3D响应面图；图5为本专利技术中提取时间A和料液比C对柴胡中柴胡皂苷a提取的3D响应面图；图6为本专利技术中超声功率B和料液比C对柴胡中柴胡皂苷a提取的3D响应面图。具体实施方式下面结合附图所示的各实施方式对专利技术进行详细说明，但应当说明的是，这些实施方式并非对本专利技术的限制，本领域普通技术人员根据这些实施方式所作的功能、方法、或者结构上的等效变换或替代，均属于本专利技术的保护范围之内。在本实施例的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术创造和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术创造的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”等的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本专利技术创造的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以通过具体情况理解上述术语在本专利技术创造中的具体含义。一、柴胡皂苷a提取工艺优化原理及柴胡皂苷a检测方法1.1柴胡皂苷a提取工艺优化原理通过HPLC法检测柴胡药材或供试样品中柴胡皂苷a的含量，首先需要将柴胡皂苷a进行提取，即，通过提取溶解通过超声、微波、回流等方法提取。本专利技术是首先通过预试验确定影响柴胡皂苷a提取率的因素；再通过单因素多水平筛选各因素的参数范围；最后，通过响应面法结合多元线性回归和二次多元方程拟合并建立回归方程确定柴胡皂苷a的最佳提取参数。具体包括以下步骤：步骤一：取柴胡药材或供试样品烘干并粗粉，过65目筛，摇匀，得待测样品；步骤二：对待测样品中柴胡本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：将柴胡药材或供试样品烘干并粗粉，过65目筛，摇匀，得待测样品；步骤二：对待测样品中柴胡皂苷a的提取进行预试验，得出影响柴胡皂苷a提取率的因素为提取时间、超声功率、料液比；并根据单因素多水平试验，筛选提取时间、超声功率、料液比的参数范围；步骤三：根据步骤二中各参数的筛选范围，结合响应面法，以提取时间、超声功率、料液比三个因素为考察对象，以柴胡皂苷a提取率为评价指标，设计三因素三水平试验表；步骤四：根据步骤三中实验设计表设计实验方案，并进行重复实验，得到柴胡皂苷a的响应值；步骤五：对步骤四中的实验数据进行多元线性回归和二次多元方程拟合并建立回归方程，得到以柴胡皂苷a提取率为响应值的相应曲面图，通过对试验结果分析，得到柴胡中柴胡皂苷a的最佳提取工艺参数。

【技术特征摘要】
1.一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：将柴胡药材或供试样品烘干并粗粉，过65目筛，摇匀，得待测样品；步骤二：对待测样品中柴胡皂苷a的提取进行预试验，得出影响柴胡皂苷a提取率的因素为提取时间、超声功率、料液比；并根据单因素多水平试验，筛选提取时间、超声功率、料液比的参数范围；步骤三：根据步骤二中各参数的筛选范围，结合响应面法，以提取时间、超声功率、料液比三个因素为考察对象，以柴胡皂苷a提取率为评价指标，设计三因素三水平试验表；步骤四：根据步骤三中实验设计表设计实验方案，并进行重复实验，得到柴胡皂苷a的响应值；步骤五：对步骤四中的实验数据进行多元线性回归和二次多元方程拟合并建立回归方程，得到以柴胡皂苷a提取率为响应值的相应曲面图，通过对试验结果分析，得到柴胡中柴胡皂苷a的最佳提取工艺参数。2.根据权利要求1所述的一种优化柴胡皂苷a待测品超声提取工艺的方法，其特征在于：步骤二中，待测样品的提取时间参数范围为80～120min；超声功率参数范围为175...

【专利技术属性】
技术研发人员：常星，宋逍，王昌利，张小飞，崔春利，王露，焦莹，赵樱霞，王怒，
申请(专利权)人：陕西中医药大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61