一种新的三萜化合物及其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术公开了一种新的三萜化合物及其制备方法和医药用途。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的三萜化合物，可以从文冠果的干燥枝中提取、分离纯化得到。体外试验证明Aβ1‑40的毒性损害神经细胞，引起PC12大量凋亡，细胞活性下降，化合物(Ⅰ)干预后凋亡情况得到改善，可以用来开发成神经保护药物。

A New Triterpenoid Compound and Its Preparation Method and Medical Use

The invention discloses a new triterpenoid compound, a preparation method and a medical use thereof. This compound is the first reported triterpenoid with novel structure. It can be extracted, isolated and purified from the dried branches of Xanthoceras sorbifolia. In vitro experiments showed that the toxicity of Abeta 1 40 damaged nerve cells, resulted in a large number of apoptotic PC12 cells, decreased cell activity, and improved apoptotic situation after intervention of compound (I), which could be used to develop neuroprotective drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种新的三萜化合物及其制备方法和医药用途
本专利技术属于药物
，具体涉及从文冠果的干燥枝中分离得到的一种具有神经保护作用的三萜化合物及其制备方法。
技术介绍
文冠果XanthocerassorbifoliaBunge为无患子科(Sapindaceae)文冠果属植物，单属单种，别名文登阁、僧灯毛道、崖木瓜、山木瓜等。其分布于我国东北、华北及陕西、甘肃、宁夏、安徽、河南等地的丘陵山坡等，各地也常有栽培，文冠果始载于《救荒本草》，以文冠花为名，在《本草纲目》中亦有记载。文冠果是我国特有的珍稀木本油料植物，有北方油茶之称，因其种仁富含脂肪油，其质量分数高达52％，有很高的经济价值。除作为油料树种外，该植物还有良好的药用、食用、观赏等价值。文冠果的茎、枝(文冠木)味甘、微苦，性凉，具有消肿止痛、祛风湿、敛干黄水的功效，在蒙医中常用于治疗热性“协日乌素”、瘰疬、风湿性关节炎等疾病。民间用其种仁治疗小儿遗尿症，中国科学院沈阳应用生态研究所将其开发成治疗小儿遗尿的制剂，疗效显著。从文冠果外果壳、果柄等部位中分离得到的化学成分多以三萜类(尤以玉蕊醇型三萜类化合物居多)、黄酮类为主，此外还有苯丙素、甾类、酚酸、生物碱、单萜及脂肪酸类化合物。三萜类化合物是文冠果中报道最多的一类成分，其结构母核主要为齐墩果烷骨架结构的玉蕊醇型(A、B)，此外还有羽扇豆烷型(C)、甘遂烷型(D)、环阿屯烷型、羊毛脂烷型等。文冠果有多方面的药理活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抑菌、抑制HIV蛋白酶、改善学习记忆功能等。其中文冠果种仁中亚油酸、亚麻酸量丰富，经常食用可以预防心脑血管疾病；花萼片中的秦皮苷可用于解热、安眠、抗痉；叶中的杨梅苷可用于杀菌、降胆固醇等。文冠果种仁、果柄和叶的水浸膏用于小儿遗尿症疗效显著，并可拮抗化学药物所致的小鼠学习记忆障碍。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从文冠果的干燥枝中分离得到的一种具有神经保护作用的三萜化合物及其制备方法。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将文冠果的干燥枝粉碎，用75～85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为D101大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80％。一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(Ⅰ)和药学上可接受的载体。所述的化合物(Ⅰ)在制备神经保护药物中的应用。所述的药物组合物在制备神经保护药物中的应用。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。制备方法：(a)将文冠果的干燥枝(10kg)粉碎，用80％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水饱和的正丁醇(3L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用D101大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏(172g)；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体积)、45:1(8个柱体积)、25:1(8个柱体积)、10:1(10个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4(65g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1(8个柱体积)、10:1(10个柱体积)和5:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(37g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(45mg)。结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z567.3302，结合核磁特征可得分子式为C32H48O7，不饱和度为9。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，500MHz)：H-1(2.23，m)，H-1(2.07，m)，H-3(5.02，s)，H-5(1.37，m)，H-6(1.84，m)，H-6(1.67，t，J＝14.6)，H-7(2.98，d，J＝6.4)，H-11(1.83，m)，H-11(1.92，m)，H-12(1.51，m)，H-12(1.92，m)，H-15(1.47，m)，H-15(1.29，ddd，J＝12.5，12.5，5.3)，H-16(1.28，m)，H-16(2.03，m)，H-17(1.60，m)，H-18(0.99，s)，H-19(0.93，s)，H-20(1.31，m)，H-21(0.91，d，J＝6.6)，H-22(1.11，m)，H-22(1.48，m)，H-23(1.78，m)，H-23(1.95，m)，H-24(4.96，tt，J＝7.1，1.4)，H-26(1.68，s)，H-27(1.79，s)，H-28(0.91，s)，H-29(0.91，s)，3-OAc(2.12，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，125本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)将文冠果的干燥枝粉碎，用75～85％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱8个柱体积，再用75％乙醇洗脱10个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体...

【专利技术属性】
技术研发人员：路云香，
申请(专利权)人：淄博鸣桐环保技术研发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37