重组核酸的线粒体递送制造技术

本公开内容描述了包括人巨细胞病毒β2.7RNA的至少一个正义或反义RNA亚结构域的核酸递送构建体，其中每个亚结构域能够定位在线粒体内，用于转运到线粒体中。本文还公开了增强线粒体基因功能或抑制有缺陷的线粒体基因功能或两者的方法，以及治疗线粒体病症的方法。

Mitochondrial delivery of recombinant nucleic acid

This disclosure describes at least one nucleic acid delivery construct comprising a just or antisense RNA subdomain of human cytomegalovirus beta 2.7 RNA, in which each subdomain can be located in mitochondria for transport to mitochondria. Methods for enhancing or inhibiting the function of mitochondrial genes or both, and for treating mitochondrial diseases are also disclosed.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】重组核酸的线粒体递送相关申请的交叉引用本申请要求于2016年5月6日提交的新加坡临时申请10201603628Q的优先权，为所有目的将其全部内容通过引用并入此处。
本公开内容涉及分子生物学领域。特别地，本专利技术涉及线粒体靶向序列用于转运核酸序列的用途。
技术介绍
线粒体是几乎所有活的生物体中参与呼吸循环末端部分的细胞器。线粒体的基因组组织是独特的且编码37种基因，其中22种是tRNA基因，2种是线粒体核糖体RNA(12s和16s)基因，13种是呼吸酶亚基的基因。这些呼吸基因的缺陷与许多神经退行性疾病有关，例如共济失调、视神经病变、帕金森病，也与衰老有关。但是，被线粒体摄取的核酸用于线粒体保护和调节的研究很少，并且尚未鉴定出有效的线粒体递送载体。因此，需要一种能够将有效负载(例如，由递送系统携带的核酸序列)递送到细胞线粒体中的递送系统。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术涉及核酸递送构建体，该核酸递送构建体包括人巨细胞病毒β2.7RNA的至少一个正义或反义RNA亚结构域，其中每个亚结构域能够定位在线粒体内。在另一方面，本专利技术涉及包括本文公开的核酸序列的载体、重组细胞或重组生物体。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸递送构建体，其包含人巨细胞病毒β2.7 RNA的至少一个正义或反义RNA亚结构域，其中每个亚结构域能够定位在线粒体内。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.06 SG 10201603628Q1.一种核酸递送构建体，其包含人巨细胞病毒β2.7RNA的至少一个正义或反义RNA亚结构域，其中每个亚结构域能够定位在线粒体内。2.根据权利要求1所述的核酸递送构建体，其中来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列与选自由β2.7RNA(SEQIDNO：1或SEQIDNO：2)、β2.7RNA的结构域1(D1；SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、β2.7RNA的结构域2(D2；SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、β2.7RNA的结构域3(D3；SEQIDNO：5或SEQIDNO：9)、β2.7RNA的结构域4(D4；SEQIDNO：6或SEQIDNO：10)及其组合组成的组中的一种或多种RNA序列具有90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性。3.根据前述权利要求中任一项所述的核酸递送构建体，其中来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列选自由β2.7RNA(SEQIDNO：1或SEQIDNO：2)、β2.7RNA的结构域1(D1；SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、β2.7RNA的结构域2(D2；SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、β2.7RNA的结构域3(D3；SEQIDNO：5或SEQIDNO：9)、β2.7RNA的结构域4(D4；SEQIDNO：6或SEQIDNO：10)及其组合组成的组。4.根据权利要求3所述的核酸递送构建体，其中来自人巨细胞病毒β2.7RNA的一个，或两个，或三个，或四个或更多个RNA序列包括选自由β2.7RNA的全长序列(SEQIDNO：1(正义))、β2.7RNA的全长序列(SEQIDNO：2(反义))、β2.7RNA的结构域1(SEQIDNO：3(正义))、β2.7RNA的结构域1(SEQIDNO：7(反义))、β2.7RNA的结构域2(SEQIDNO：4(正义))、β2.7RNA的结构域2(SEQIDNO：8(反义))、β2.7RNA的结构域3(SEQIDNO：5(正义))、β2.7RNA的结构域3(SEQIDNO：9(反义))、β2.7RNA的结构域4(SEQIDNO：6(正义))和β2.7RNA的结构域4(SEQIDNO：10(反义))组成的组的序列。5.根据权利要求3所述的核酸递送构建体，其中来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列包括β2.7RNA的结构域2、结构域3和结构域4(SEQIDNO：11(正义)或SEQIDNO：39(反义))；或β2.7RNA的结构域1、结构域3和结构域4(SEQIDNO：12(正义)或SEQIDNO：40(反义))；或β2.7RNA的结构域1、结构域2和结构域4(SEQIDNO：13(正义)或SEQIDNO：41(反义))；或β2.7RNA的结构域1、结构域2和结构域3(SEQIDNO：14(正义)或SEQIDNO：42(反义))。6.根据前述权利要求中任一项所述的核酸递送构建体，其中所述核酸递送构建体包含至少一个间隔子序列。7.根据权利要求6所述的核酸递送构建体，其中如果所述核酸递送构建体包含至少两个间隔序列，则至少一个间隔序列位于来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列的5’端且至少另一个间隔序列位于来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列的3’端。8.根据权利要求6至7中任一项所述的核酸递送构建体，其中所述至少一个间隔序列选自由S1a(SEQIDNO：26)、S1b(SEQIDNO：27)、S2a(SEQIDNO：28)、S2b(SEQIDNO：29)、S3a(SEQIDNO：30)、S3b(SEQIDNO：31)、S4a(SEQIDNO：32)、S4b(SEQIDNO：33)、S6a(SEQIDNO：34)、S6b(SEQIDNO：35)、S8a(SEQIDNO：36)、S8b(SEQIDNO：37)和间隔子F3A(SEQIDNO：38)组成的组；和/或任选地，其中所述间隔序列包含终止密码子。9.根据权利要求3所述的核酸递送构建体，其中每个RNA序列选自由β2.7RNA的结构域1(D1；SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、结构域2(D2SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、结构域3(D3；SEQIDNO：5或SEQIDNO：9)和结构域4(D4；SEQIDNO：6或SEQIDNO：10)组成的组，根据式I：其中每个X独立地选自D1(SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、D2(SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、D3(SEQIDNO：5或SEQIDNO：9)、D4(SEQIDNO：6或SEQIDNO：10)或其组合，包括两次重复、三次重复、四次重复、五次重复、六次重复、七次重复、八次重复或更长的单个结构域的重复；并且其中每个X任选地在其之前或之后或侧接至少一个或多个如权利要求6至8中所定义的间隔序列。10.根据权利要求3所述的核酸递送构建体，其中来自人巨细胞病毒β2.7RNA的RNA序列是RNA序列的四聚体，其中每个RNA序列选自由β2.7RNA的结构域1(D1；SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、结构域2(D2SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、结构域3(D3；SEQIDNO：5或SEQIDNO：9)和结构域4(D4；SEQIDNO：6或SEQIDNO：10)组成的组，根据式II：其中每个X独立地选自D1(SEQIDNO：3或SEQIDNO：7)、D2(SEQIDNO：4或SEQIDNO：8)、D3(SEQIDNO：...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·帕策尔，K·查特吉，
申请(专利权)人：新加坡国立大学，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG