一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法技术

本发明专利技术提供了一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，对于经过固定化发酵后的海藻酸钠微胶囊，使用无氧柠檬酸钠溶液在加热条件下使微胶囊溶解，取溶解液测定有机磷含量，用囊内有机磷量表征囊内菌量。由于菌体的含磷量相对稳定，因此可用有机磷量表征菌量。此外，本发明专利技术的海藻酸钠囊膜溶解方法可避免囊膜溶解时有机磷向无机磷的转化，不影响总磷及无机磷含量的测定。整个测定过程操作便捷、快速准确、易于实现。

【技术实现步骤摘要】
一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法
本专利技术属于测定菌量测定
，具体涉及一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法。
技术介绍
菌量测定的方法很多，如：氨基葡萄糖法、麦角固醇法、称干重法、qPCR法等。对于细菌和真菌的快速测定，均有不足之处，如：麦角固醇法不适于细菌菌量的测定；氨基葡萄糖法测定时间长；称干重法仅适用于液态游离发酵；qPCR法成本较高。对于海藻酸钠固定化细胞微胶囊而言，欲测定其囊膜内菌量，必先将膜溶解，而溶解囊膜的方法可能对菌量的测定造成干扰，因此需要构建合适的溶解囊膜和测定菌量的方法。对于细胞而言，含磷化合物主要为：核酸、ATP、细胞膜中的磷脂双分子层，细菌的细胞壁还含有磷壁酸。总体而言，细胞的含磷量相对稳定，并随着菌量的增加而成比例增加。因此，利用有机磷表征菌量是一种合理的方法。有机磷的直接测定较为困难，一般通过总磷量减去无机磷量进行间接测定。对无机磷进行测定时，必须避免有机磷和无机磷之间的转化。海藻酸钠微胶囊的囊膜溶解方法可以使用高温、强碱、金属离子螯合剂等方法，而强碱（pH＞11）或有氧高温条件下可引起有机磷向无机磷的转化，因此在对囊膜进行溶解时，应避免上述情况本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：将海藻酸钠微胶囊溶解，取溶解液进行有机磷的测定，根据囊内有机磷量换算囊内菌量。

【技术特征摘要】
1.一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：将海藻酸钠微胶囊溶解，取溶解液进行有机磷的测定，根据囊内有机磷量换算囊内菌量。2.根据权利要求1所述的一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：海藻酸钠微胶囊溶解方法为将海藻酸钠微胶囊放置于25~100倍体积的0.2mol/L的无氧柠檬酸钠溶液中沸水浴5min，使微胶囊裂解并完全溶于柠檬酸钠溶液，即得溶解液。3.根据权利要求2所述的一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：无氧柠檬酸钠溶液为准确称取0.2moL柠檬酸钠，用煮沸冷却后的去离子水定容至1L，100W超声20min再次排除氧气。4.根据权利要求1所述的一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：有机磷的测定方法为基于比色法对磷元素含量进行测定，有机磷量=总磷量-无机磷量。5.根据权利要求4所述的一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：总磷量的测定方法，取1mL溶解液或待测液加2.5mL27wt.%无氧硫酸溶液和玻璃珠1颗，高温消化至溶液澄清，然后稀释至10mL，取1mL稀释液依次加0.5mL的6mol/L硫酸溶液、0.5mL的25g/L钼酸铵溶液、0.1mL10%的抗坏血酸溶液，2.9mL的去离子水，50℃水浴15min后测定660nm处的吸光值。6.根据权利要求4所述的一种测定海藻酸钠微胶囊内菌量的方法，其特征在于：无机磷量的测定方法，1mL溶解液或待测液依次加0.5mL的6mol/L硫酸溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪莉，周康熙，刘志彬，张雯，张晨，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35