一种肾脏的制造方法技术

本发明专利技术提供一种肾脏的制造方法，其包括：组织特异性地去除非人动物的后肾的后肾间充质的工序；将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序；以及，使所述后肾的产生得以进行且其中移植后的所述肾脏前体细胞分化成熟并形成肾脏的一部分的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种肾脏的制造方法
本专利技术涉及一种肾脏的制造方法。更详细而言，涉及肾脏的制造方法、肾脏、非人动物、移植用脏器、肾脏制造用试剂盒、肾脏再生用药物、肾脏的移植方法以及肾病的治疗方法。本申请基于2016年6月29日在日本提出申请的日本特愿2016－129393号而主张优先权，且将其内容引用于本文。
技术介绍
由于老龄化、适应疾病的扩大等，人工透析患者急速增加。虽然通过透析医疗能够挽救这些患者的生命，但通过人工透析无法补偿全部的肾功能，因此，存在患者的心血管疾病增加，致死率上升的趋势。另外，透析患者的时间负担、精神负担非常大，难以重新回到社会的情况也较多。另外，世界上需要进行肾脏移植的晚期肾病的患者存在约2百万人，由于供体脏器不足，其数量存在进一步增加的趋势。因此，晚期肾病是医疗上的重大的问题。目前，能够由iPS细胞/ES细胞等多能干细胞诱导各种组织特异性的前体细胞或组织干细胞(例如参照非专利文献1)。然而，例如肾脏是自修复能力低的脏器，肾功能依赖于由多种细胞构成的复杂结构。因此，目前尚未实现由肾脏前体细胞来再生具有复杂的三维结构的肾脏。现有技术文献非专利文献非专利文献1：TakasatoM,etal.,Directinghumanembryonicstemcelldifferentiationtowardsarenallineagegeneratesaself-organizingkidney,Nat.CellBiol.,16(1),118-126,2014.
技术实现思路
专利技术所要解决的技术问题本专利技术的目的在于提供由肾脏前体细胞制作肾脏的技术。用于解决问题的技术方案本专利技术包括以下技术方案。(1)一种肾脏的制造方法，其包括：组织特异性地去除非人动物的后肾的后肾间充质的工序；将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序；以及，使所述后肾的产生得以进行且其中移植后的所述肾脏前体细胞分化成熟并形成肾脏的一部分的工序。(2)如(1)所述的肾脏的制造方法，其还包括：组织特异性地去除所述后肾的输尿管芽的工序；以及将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序。(3)如(1)或(2)所述的肾脏的制造方法，其中，所述肾脏前体细胞为猫细胞。(4)如(1)至(3)中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为猪。(5)如(1)至(3)中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为小鼠。(6)如(1)至(3)中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为猫。(7)一种肾脏，其是通过(1)至(6)中任一项所述的制造方法而制造的。(8)一种肾脏，其包含源自非人动物的细胞和源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的细胞，并且源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的所述细胞的比例为70质量％以上。(9)如(8)所述的肾脏，其中，源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的所述细胞为猫细胞。(10)一种非人动物，其具有(7)至(9)中任一项所述的肾脏。(11)一种移植用脏器，其具备(7)至(9)中任一项所述的肾脏、输尿管以及膀胱。(12)如(11)所述的移植用脏器，其中，所述输尿管及所述膀胱源自所述非人动物。(13)一种肾脏制造用试剂盒，其具备非人动物的后肾、组织特异性地去除所述后肾的后肾间充质的药剂、以及源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞。(14)如(13)所述的肾脏制造用试剂盒，其还具备组织特异性地去除所述后肾的输尿管芽的药剂。(15)一种肾脏再生用药物，其具备非人动物的后肾、组织特异性地去除所述后肾的后肾间充质的药剂、以及源自非人动物的肾脏前体细胞。(16)如(15)所述的肾脏再生用药物，其还具备组织特异性地去除所述后肾的输尿管芽的药剂。(17)一种肾脏的移植方法，其包括：将如(11)或(12)所述的移植用脏器移植到患病动物(被感染动物)的体内的工序；以及，从移植起经过规定期间后将上述移植用脏器的膀胱与患病动物的输尿管连接的工序。(18)一种肾病的治疗方法，其包括：将非人动物的后肾及泄殖腔移植到患病动物的体内的工序；组织特异性地去除所述后肾的后肾间充质的工序；将肾脏前体细胞移植到所述后肾且其中移植后的所述肾脏前体细胞分化成熟而形成肾脏的一部分、所述泄殖腔分化成熟而形成膀胱、该膀胱通过输尿管而连接于所述肾脏的工序；以及，从所述肾脏前体细胞的移植起经过规定期间后将所述膀胱与患病动物的输尿管连接的工序(b)。专利技术效果基于本专利技术能够提供由肾脏前体细胞制作肾脏的技术。附图说明图1是表示胎生11天左右的小鼠的胚胎(胎儿)的示意图。图2(a)至(c)是说明肾脏产生的情形的示意图。图3是表示实验例3中的肾脏组织标本的免疫染色结果的照片。图4是表示实验例4中的肾脏组织标本的免疫染色结果的照片。图5(a)及(b)是拍摄实验例5中在小鼠体内再生的肾脏而得的照片。图6(a)及(b)是实验例5中在小鼠体内再生的肾脏的组织切片标本的显微照片。图7(a)至(c)是示出实验例6中的后肾的组织标本的免疫染色结果的照片。具体实施方式[肾脏的制造方法]图1是表示胎生11天左右的小鼠的胚胎(胎儿)的示意图。肾脏经由前肾、中肾、后肾这3个阶段而形成。其中，前肾及中肾在之后发生退行性化生(retroplasia)。在哺乳类成体中发挥作用的肾脏是后肾。如图1所示，肾脏是通过输尿管芽与其周围的后肾间充质的相互作用而形成的。输尿管芽构成集合管至输尿管，后肾间充质中所含的肾单位前体细胞成为肾小球及肾小管的起源。本说明书中，将包含输尿管芽及后肾间充质的生肾区域称为生肾微环境(niche)。在一个实施方式中，本专利技术提供一种肾脏的制造方法，其包括：组织特异性地去除非人动物的后肾的后肾间充质的工序(i)；将源自与上述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到上述后肾的工序(ii)；以及，使上述后肾的产生得以进行并且其中移植后的上述肾脏前体细胞分化成熟且形成肾脏的一部分的工序(iii)。以往，向生肾微环境的细胞移植的固着效率非常差。与此相对，如实施例中后面所述的那样，基于本实施方式的制造方法，能够使移植的肾脏前体细胞以高效率进行植入。进而，移植的肾脏前体细胞能够继承宿主的产生程序而自主地进行复杂的分化诱导而形成肾脏的一部分。参照图2对本实施方式的肾脏的制造方法详细地进行说明。图2(a)至(c)是说明肾脏产生的情形的示意图。其中，图2(a)与本实施方式的肾脏的制造方法对应。在图2(a)中，通过添加去除药剂而去除非人动物的胚的初期肾脏的后肾间充质。由此，成为不存在源自宿主的肾干细胞的状态、即微环境处于空置状态。接下来，向生肾微环境移植新的肾脏前体细胞(肾干细胞)。如此一来，移植的肾脏前体细胞固着且通过继承宿主的产生程序而使肾脏的产生得以进行。其结果，通过移植的肾脏前体细胞而再生肾脏。另一方面，在图2(b)中，通过添加去除药剂而去除非人动物的胚的初期肾脏的后肾间充质。由此，成为不存在源自宿主的肾干细胞的状态、即微环境处于空置状态。在图2(b)中，不进行新的肾脏前体细胞的移植。即使在该状态下使肾脏的产生得以进行，肾脏也会退化。另外，在图2(c)中，在使源自宿主的肾干细胞残留于非本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肾脏的制造方法，其包括：组织特异性地去除非人动物的后肾的后肾间充质的工序；将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序；以及使后肾的产生得以进行且其中移植后的所述肾脏前体细胞分化成熟并形成肾脏的一部分的工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.29 JP 2016-1293931.一种肾脏的制造方法，其包括：组织特异性地去除非人动物的后肾的后肾间充质的工序；将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序；以及使后肾的产生得以进行且其中移植后的所述肾脏前体细胞分化成熟并形成肾脏的一部分的工序。2.如权利要求1所述的肾脏的制造方法，其还包括：组织特异性地去除所述后肾的输尿管芽的工序；以及将源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的肾脏前体细胞移植到所述后肾的工序。3.如权利要求1或2所述的肾脏的制造方法，其中，所述肾脏前体细胞为猫细胞。4.如权利要求1至3中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为猪。5.如权利要求1至3中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为小鼠。6.如权利要求1至3中任一项所述的肾脏的制造方法，其中，所述非人动物为猫。7.一种肾脏，其是通过权利要求1至6中任一项所述的制造方法而制造的。8.一种肾脏，其包含源自非人动物的细胞和源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的细胞，并且源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的所述细胞的比例为70质量％以上。9.如权利要求8所述的肾脏，其中，源自与所述非人动物同种异体或异种的非人动物的所述细胞为猫细胞。10.一种非人动物，其具有权利要求7至9中...

【专利技术属性】
技术研发人员：横尾隆，山中修一郎，
申请(专利权)人：横尾隆，TES控股有限责任公司，
类型：发明
国别省市：日本,JP