一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(1)将羧基聚苯乙烯微球置于缓冲液中，调节羧基聚苯乙烯微球浓度；(2)将抗体加入到步骤(1)缓冲液中，添加偶联剂进行偶联反应；(3)将步骤(2)反应后的溶液混匀，加入封闭试剂；(4)向步骤(3)封闭后的溶液中加入表面活性剂，混匀得到所述偶联抗体的聚苯乙烯微球；本发明专利技术提供的制备方法省去了离心和超滤过程，降低了工艺难度，同时降低了生产成本，对于实际应用生产具有较高的价值。

【技术实现步骤摘要】
一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法
本专利技术属于生物材料领域，涉及一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法。
技术介绍
现在用于微球和抗体偶联的方式主要有两种：一种为使用化学偶联剂在功能化(羧基/氨基/醛基等)与抗体之间产生共价键结合，另一种为物理吸附的方法，依靠静电力使抗体吸附到微球表面。为了将未结合的抗体去除，这两种方式都涉及到过滤和清洗的步骤，在过滤和清洗过程中，一般使用离心和超滤的方法。但是这些清洗和过滤过程耗费时间，生产的批量大小受到离心机或者超滤设备的限制，使成品成本升高。CN104530459A公开了一种偶联抗体的聚苯乙烯荧光微球的制备方法，该方法包括以下步骤：步骤1，活化荧光微球表面的羧基；步骤2，偶联单克隆抗体的氨基与荧光微球表面的羧基；步骤3，封闭荧光微球表面没有完全反应的活化基团；步骤4，保存偶联抗体的聚苯乙烯荧光微球。此制备方法简单，易行，成本低，适合产业化。但是此方法在制备过程中需要离心的步骤，具有一定的限制。CN101871935A公开了一种羧基化聚苯乙烯微球与C反应蛋白抗体的共价交联法，包括：选择合适粒径的羧基化聚苯乙烯微球；将羧基化聚苯乙烯微球用缓冲液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)将羧基聚苯乙烯微球置于缓冲液中，调节羧基聚苯乙烯微球浓度；(2)将抗体加入到步骤(1)缓冲液中，添加偶联剂进行偶联反应；(3)将步骤(2)反应后的溶液混匀，加入封闭试剂；(4)向步骤(3)封闭后的溶液中加入表面活性剂，混匀得到所述偶联抗体的聚苯乙烯微球。

【技术特征摘要】
1.一种偶联抗体的聚苯乙烯微球的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)将羧基聚苯乙烯微球置于缓冲液中，调节羧基聚苯乙烯微球浓度；(2)将抗体加入到步骤(1)缓冲液中，添加偶联剂进行偶联反应；(3)将步骤(2)反应后的溶液混匀，加入封闭试剂；(4)向步骤(3)封闭后的溶液中加入表面活性剂，混匀得到所述偶联抗体的聚苯乙烯微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述缓冲液为MES缓冲液；优选地，步骤(1)中所述缓冲液的pH值为5.5～6；优选地，步骤(1)中所述缓冲液的浓度为40～60mM。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中调节羧基聚苯乙烯微球浓度至0.2％～0.3％；优选地，调节羧基聚苯乙烯微球浓度至0.25％。4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；优选地，步骤(2)中控制抗体在缓冲液中的终浓度为0.5～1mg/mL。5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述偶联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。6.根据权利要求1-5中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述偶联反应的时间为1～24h；优选地，步骤(2)中所述偶联反应在pH值为5.5～6的条件下进行。7.根据权利要求1-6中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述封...

【专利技术属性】
技术研发人员：李子樵，王森，
申请(专利权)人：蓝怡科技集团股份有限公司，浙江蓝怡医药有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31