一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法及鉴别方法技术

本发明专利技术涉及中药材检测技术领域，具体公开了一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法及鉴别方法。所述的特征图谱的建立方法包含如下步骤：S1.精密称取杜仲药材、盐杜仲药材，制备得到杜仲、盐杜仲供试品溶液；S2.分别将杜仲供试品、盐杜仲供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到杜仲特征图谱、盐杜仲特征图谱；所述的特征图谱可以更全面的反映样品的特征峰信息，从分子层面上鉴别了杜仲和盐杜仲之间的特征性差异，且该方法精密度、稳定性和重现性较好；利用该特征图谱可以对杜仲药材或盐杜仲药材进行真伪或品质鉴别。

【技术实现步骤摘要】
一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法及鉴别方法
本专利技术涉及中药材检测
，具体涉及一种杜仲及盐杜仲药材特征图谱的构建及其鉴别方法。
技术介绍
杜仲为杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliv.的干燥树皮。《神农本草经》称：“杜仲，又名思仙、木绵、思仲、玉丝皮等，主腰脊痛，补中益精气，坚筋骨，强志，除阴下痒湿、小便余沥”；《名医别录》记载：“杜仲性温味甘，补肝肾、强筋骨”；《本草正》记载：“止小水梦遗、暖子宫、安胎气”。历版《中国药典》均收载杜仲皮作为药材，其性味甘，温。归肝、肾经。用于肝肾不足，腰膝酸痛，筋骨无力，头晕目眩，妊娠漏血，胎动不安，取自国家二级珍贵保护树种杜仲树的树皮，是中国名贵滋补药材。盐杜仲是杜仲的炮制品。盐制后可走下焦，增强补肝肾、安胎及降血压的作用。由于经过盐制，饮片和炮制品会存在活性成分的差异。因此，对不同炮制方法的同种药材进行鉴别，对于提升中药品质具有重要的实际意义。目前，鉴别方法包括传统方法和与现代科技结合的色谱方法。现阶段，传统的眼看、口尝、鼻闻、手摸等简便方法在中药材鉴别已非常局限，而色谱方法如HPLC、IR、NIR、TLC中存在大量的假阳性和假阴性问题，容易导致结论的偏差。因此，本专利技术应用超高效液相色谱法建立杜仲特征图谱，从根本上进行色谱峰的归属和鉴定，从分子层面上鉴别杜仲和盐杜仲之间的特征性差异。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供了一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法及鉴别方法，应用超高效液相色谱法建立杜仲特征图谱，从根本上进行色谱峰的归属和鉴定，从分子层面上鉴别杜仲和盐杜仲之间的特征性差异。本专利技术所要解决的上述技术问题，通过如下技术方案予以实现：一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，包含如下步骤：S1.精密称取杜仲药材、盐杜仲药材，制备得到杜仲、盐杜仲供试品溶液；S2.分别将杜仲供试品、盐杜仲供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到杜仲特征图谱、盐杜仲标准特征图谱。作为一种优选方案，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为30~40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.2~0.4ml/min；检测波长为200~300nm；进样量为0.5~5μl。作为一种优选方案，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为35~40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.25~0.35ml/min；检测波长为230~270nm；进样量为0.8~2μl。作为一种优选方案，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min；检测波长为254nm；进样量为1μl。上述0.2％甲酸水表示水中含有体积分数为0.2％的甲酸。作为一种优选方案，所述梯度洗脱条件为：0~3min，乙腈的体积分数变化为3~10%；3~6min，乙腈的体积分数为10%；6~15min，乙腈的体积分数变化为10~20%；15~17min，乙腈的体积分数变化为20~55%；17.01~20min，乙腈的体积分数为3%。作为一种优选方案，所述的供试品溶液通过包含如下步骤的方法制备得到：取杜仲药材或盐杜仲药材粉末2.0~4.0g，精密称定，至具塞锥形瓶中，精密加入70~80%甲醇100~200ml，称定重量，加热回流3.5~4.5小时，放冷，称定重量，用70~80%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液。作为一种优选方案，所述的杜仲药材通过包含如下步骤的方法制备得到：取杜仲原药材，刮去残留粗皮后，用清水洗去泥沙等杂质，晾干或用干布略擦，用铡刀切成2~3mm的细丝，大小分档，在50~60℃下干燥2～5小时，取出，放凉，即得杜仲药材。作为一种优选方案，所述的盐杜仲药材通过包含如下步骤的方法制备得到：取杜仲药材，加入盐水（每100kg杜仲丝加入1.5~2.5kg氯化钠），拌匀，稍闷，待盐水被吸尽后，置炒锅内，以功率为1000~1400W、温度为130~170℃的中火炒20~30min，炒至丝易断、表面焦黑色时，取出，放凉，筛去灰屑，得盐杜仲药材。作为一种优选方案，一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的鉴别方法，包括如下步骤：首先按特征图谱的建立方法，得到待检测杜仲药材或盐杜仲药材的特征图谱；然后与杜仲药材或盐杜仲药材的标准特征图谱进行比较，最后鉴别杜仲和盐杜仲之间的特征性差异。作为一种优选方案，所述的杜仲与盐杜仲的特征图谱的鉴别方法，若通过所述方法得到的样品特征图谱与通过所述方法得到的杜仲标准特征图谱一致，则样品为杜仲药材；若通过所述方法得到的样品特征图谱与通过所述方法得到的盐杜仲标准特征图谱一致，则样品为盐杜仲药材。有益效果：(1)本专利技术首次建立了杜仲药材与盐杜仲药材的特征图谱以及杜仲药材与盐杜仲药材的标准特征图谱；(2)该方法得到的特征图谱以及标准特征图谱可以更全面的反映样品的特征峰信息，且该方法稳定性、精密度和重现性较好；（3）该方法得到的特征图谱，从根本上进行色谱峰的归属和鉴定，从分子层面上鉴别了杜仲和盐杜仲之间的特征性差异；(4)利用该方法得到的特征图谱以及标准特征图谱可以对杜仲与盐杜仲进行真伪或品质鉴别。附图说明图1为杜仲药材的标准特征图谱。图2为盐杜仲药材的标准特征图谱。图3为杜仲药材的标准特征图谱的精密度实验图。图4为盐杜仲药材的标准特征图谱的精密度实验图。图5为杜仲药材的标准特征图谱的重复性实验图。图6为盐杜仲药材的标准特征图谱的重复性实验图。图7为杜仲药材的标准特征图谱的稳定性实验图。图8为盐杜仲药材的标准特征图谱的稳定性实验图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建1.主要仪器与试剂超高效液相色谱仪；ACQUITYUPLCHSST3色谱柱（2.1mm×100mm，1.7μm）；AY120型托盘电子分析天平(日本岛津公司)；甲醇为色谱纯(欧普森牌)；液相用水为屈臣氏蒸馏水；其它试剂为分析纯；杜仲原药材购自药材市场。2.实验方法2.1杜仲药材与盐杜仲药材的制备：杜仲药材的制备：取杜仲原药材，刮去残留粗皮后，用清水洗去泥沙等杂质，晾干或用干布略擦，用铡刀切成2.5mm的细丝，大小分档，在50℃下干燥，取出，放凉，即得杜仲药材。盐杜仲药材的制备：取杜仲药材，加入盐水（每100kg杜仲丝，用食盐2kg）拌匀，稍闷，待盐水被吸尽后，置炒锅内，以功率为1200W、温度为150℃的中火炒20min，炒至丝易断、表面焦黑色时，取出，放凉，筛去灰屑，得盐杜仲药材。2.2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，包含如下步骤：S1.精密称取杜仲药材、盐杜仲药材，制备得到杜仲、盐杜仲供试品溶液；S2.分别将杜仲供试品、盐杜仲供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到杜仲特征图谱、盐杜仲标准特征图谱。

【技术特征摘要】
1.一种杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，包含如下步骤：S1.精密称取杜仲药材、盐杜仲药材，制备得到杜仲、盐杜仲供试品溶液；S2.分别将杜仲供试品、盐杜仲供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到杜仲特征图谱、盐杜仲标准特征图谱。2.根据权利要求1所述的杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为30~40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.2~0.4ml/min；检测波长为200~300nm；进样量为0.5~5μl。3.根据权利要求1所述的杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为35~40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.25~0.35ml/min；检测波长为230~270nm；进样量为0.8~2μl。4.根据权利要求1所述的杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤S2中超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2.1mm×100mm，1.7μm的WatersAcquityBEHC18色谱柱；柱温为40℃；以乙腈为流动相A，以0.2%甲酸为流动相B进行梯度洗脱；流速为0.3ml/min；检测波长为254nm；进样量为1μl。5.根据权利要求1所述的杜仲与盐杜仲的特征图谱的构建方法，其特征在于，梯度洗脱条件为：0~3min，乙腈的体积分数变化为3~10%；3~6min，乙腈的体积分数为10%；6~15min，乙腈的体积分数变化为10~20%；15~17min，乙腈的体积分数变化为20~55%；17.01~...

【专利技术属性】
技术研发人员：李振雨，王闽予，杨敏娟，罗宇琴，陈向东，毕晓黎，胥爱丽，江洁怡，李养学，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44