【技术实现步骤摘要】
碱性磷酸酶去磷酸化的方法
本专利技术涉及生物
更具体地说，本专利技术涉及一种碱性磷酸酶去磷酸化的方法。
技术介绍
蛋白质磷酸化修饰是最为普遍且重要的一种蛋白质翻译后修饰方式，其反应可逆，经磷酸酶催化发生去磷酸化反应。碱性磷酸酶是普遍存在的一种磷酸酶，可对底物分子起到去磷酸化作用，在医学、免疫学、生物化学和分子生物学等领域应用广泛。碱性磷酸酶作为一种非特异性酶，以同源二聚体形式存在于动物肌肉中，在进行凝胶电泳时会解聚成分子量约为65KDa左右的亚基分子。已有研究表明碱性磷酸酶调控宰后肉中蛋白质的磷酸化水平，当宰后肉中蛋白质发生去磷酸化修饰后，可以正向调控肉嫩度、色泽、保水性等品质。普遍认为，碱性磷酸酶可以催化蛋白质发生去磷酸化反应，降低蛋白质磷酸化水平，但碱性磷酸酶自身发生磷酸化/去磷酸化的现象尚未被关注。本专利技术旨在建立了一种碱性磷酸酶催化自身发生去磷酸化的方法，调控碱性磷酸酶磷酸化水平，为进一步改善肉食用品质提供方法支撑。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供碱性磷酸酶去磷酸化的方法...
【技术保护点】
1.一种碱性磷酸酶去磷酸化的方法，其特征在于，包括：步骤一、配制碱性磷酸酶离体模型的缓冲溶液，所述缓冲溶液包括按摩尔份计的如下成分：二硫苏糖醇1份、氯化镁8～12份、三羟甲基氨基甲烷40～60份、5’‑三磷酸腺苷二钠盐水合物ATP 80～120份以及氯化钾300～500份，其中ATP预先调节其pH为6.8～7.2；步骤二、将碱性磷酸酶加入到步骤一中的缓冲溶液中，得到碱性磷酸酶的离体模型，向碱性磷酸酶的离体模型中加入肌原纤维蛋白得混合溶液；步骤三、将步骤二所得混合溶液进行孵育，孵育pH为5.0～10，孵育温度为0～30℃，孵育时间至少为10min。
【技术特征摘要】
1.一种碱性磷酸酶去磷酸化的方法，其特征在于，包括：步骤一、配制碱性磷酸酶离体模型的缓冲溶液，所述缓冲溶液包括按摩尔份计的如下成分：二硫苏糖醇1份、氯化镁8～12份、三羟甲基氨基甲烷40～60份、5’-三磷酸腺苷二钠盐水合物ATP80～120份以及氯化钾300～500份，其中ATP预先调节其pH为6.8～7.2；步骤二、将碱性磷酸酶加入到步骤一中的缓冲溶液中，得到碱性磷酸酶的离体模型，向碱性磷酸酶的离体模型中加入肌原纤维蛋白得混合溶液；步骤三、将步骤二所得混合溶液进行孵育，孵育pH为5.0～10，孵育温度为0～30℃，孵育时间至少为10min。2.如权利要求1所述的碱性磷酸酶去磷酸化的方法，其特征在于，步骤一...
【专利技术属性】
技术研发人员：张德权，任驰，侯成立，陈丽，李欣，郑晓春，王振宇，潘腾，惠腾，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。