一种猪流行性腹泻病毒基因工程抗原和抗体制造技术

技术编号:20669540 阅读:69 留言:0更新日期:2019-03-27 15:37
本发明专利技术公开了一种猪流行性腹泻病毒基因工程抗原和抗体,以该病毒经典毒株和变异毒株为基础材料,经试验验证,将原有的遗传基因序列进行了系统的改造、优化、人工从头合成,分别得到了源自经典毒株的三条保护性抗原基因,以及源自变异毒株的三条保护性抗原基因,将六条基因分别与原核表达载体连接,筛选鉴定后得到重组表达菌株;经IPTG诱导得目的蛋白;将六种蛋白纯化,按照质量比为1:1:(2‑4):1:1:(2‑4)的比例混合,加入白油或其他免疫增强剂,制备成油包水型的免疫原。免疫蛋鸡,收集鸡蛋,从卵黄中提取卵黄抗体。新生哺乳仔猪口服该抗体制剂,能够预防猪流行性腹泻经典毒株和变异毒株的感染,大大提高了临床使用范围,提高了治疗和预防效果。

【技术实现步骤摘要】
一种猪流行性腹泻病毒基因工程抗原和抗体
本专利技术属于基因工程制备抗原和抗体
,具体涉及一种猪经典毒株和变异毒株主要保护性抗原和卵黄抗体及其制备方法。
技术介绍
猪流行性腹泻(porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)引起的以水样呕吐、腹泻、脱水为主要特征的肠道传染病,死亡率高达100%。经典PEDV毒株感染,传播速度慢,以地方性流行为主要流行特点,而自2010年以来,我国陆续出现新的PEDV变异流行毒株,凸显传播快、高发病率和高死亡率等特点。自2013年4月PED疫情在北美洲爆发并迅速传播,给猪业造成巨大的经济损失。我国新流行的变异毒株无论是在致病性还是流行特点方面都与以往的经典毒株有所不同,其基因水平差异甚大,美国新流行毒株与我国2011~2012间的流行部分毒株同源性达99%以上,韩国也分离得到同源性高度相似的毒株。尽管不同国家和地区的分离毒株在基因序列有所差异,但它们都处在一个遗传分支上,而以往的经典PEDV毒株处在另外一个遗传分支;相对经典毒株,新流行毒株的主要抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,包含六种蛋白中的一种或几种,六种蛋白的氨基酸序列如:SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6所示。

【技术特征摘要】
1.猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,包含六种蛋白中的一种或几种,六种蛋白的氨基酸序列如:SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6所示。2.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,所述的六种蛋白的核苷酸序列如:SEQIDNo.7、SEQIDNo.8、SEQIDNo.9、SEQIDNo.10、SEQIDNo.11、SEQIDNo.12所示。3.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,所述的六种蛋白还包括通过碱基的删减,增加或者替换之后表达的具有相似免疫原功能的蛋白。4.根据权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,包含六种蛋白,六种蛋白的氨基酸序列如:SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6所示。5.根据权利要求4所述的猪流行性腹泻病毒基因工程免疫原,其特征在于,六种蛋白按照质量比为1:1:(2-4):1:1:(2-4)的比例混合。6.根据权利要求5所述的猪流行性腹泻病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员:唐青海孙国印魏平华杨海李晓楠张抒王瑞峰曹书显唐斯萍杨灿王芳宇
申请(专利权)人:衡阳师范学院南阳市天华制药有限公司广州格雷特生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:湖南,43

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